论文题目: 8号染色体上肝癌转移抑制基因的功能性定位及相关研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 肿瘤学
作者: 宋丽杰
导师: 叶胜龙,刘银坤,刘虎
关键词: 肝细胞癌,转移,肿瘤转移抑制基因,序列标签位点,基因,侵袭
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的 已有研究提示人类染色体8p的缺失与肝癌的转移侵袭有关。我们前期运用微细胞介导的染色体转移方法(MMCT)将人类完整的8号染色体导入高转移大鼠肝癌细胞系C5F中可抑制转移灶的形成。在此基础上运用序列标签位点(STS)为路标,用基因组物理图谱的方法分析人类染色体8p上肝癌转移抑制基因相关染色体缺失状况,为进一步寻找克隆可能的肝癌转移抑制基因奠定基础。 方法 从NCBI的UniSTS数掘库查询STS的引物序列,以大鼠肝癌高转移系C5F为阴性对照,染色体供体细胞A9 (neo8)为阳性对照,微细胞杂交克隆DNA为模板(A9/C5F-1 A9/C5F-2为转移不抑制组,A9/C5F-4 A9/C5F-8 A9/C5F-10为转移抑制组)进行STS-PCR,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳分析,对结果进行验证。 结果 通过两次人类8号染色体短臂STS位点的筛选,在人类染色体8p上从D8S542位点起至D8S1973位点区段(位于染色体8p21.1-23.1位置),约18cM,D8S542(10194919-10195159),D8S552(12786562-12786681),D8S1733(22576582-22576836),D8S1734 (22851217-22851336),D8S254(16652480-16652550)及D8S1973 (28681110-28681363)等STS位点所在区域在转移抑制组杂交克隆(A9/C5F-4 A9/C5F-8 A9/C5F-10)存在STS位点的不同程度的获得和转移不抑制组杂交克隆组(A9/C5F-1 A9/C5F-2)STS位点的缺失。提示这些位点所在区域可能存在与肝癌转移相关的抑制基因。 结论 初步推测D8S254-D8S1973所在的人类染色体8p21.1-23.1位置存在可能的肝癌转移抑制基因。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
引言
第一部分 肝癌转移抑制基因在8号染色体上的功能定位
前言
材料和方法
结果
讨论
参考文献
第二部分 DLC-1基因在人肝癌组织及不同转移潜能肝癌细胞系中表达的分析
前言
材料和方法
结果
讨论
参考文献
第三部分 DLC-1基因功能的体外研究
前言
材料和方法
结果
讨论
参考文献
小结与创新
文献综述
附件
致谢
附录
论文独创性声明
发布时间: 2005-09-19
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