陈静（衡阳市第三人民医院湖南衡阳421001）
【摘要】目的：探讨测定陈香露白露中橙皮苷含量的方法。方法：用高效液相色谱法测定陈皮中橙皮苷的含量。结果：橙皮苷的平均加样回收率为99.35%，RSD为1.3%。结论：所建鉴别方法专属性强，定量方法简便、准确。能有效地控制制剂的质量。
【关键词】陈香露白露片TLCHPLC橙皮苷
【中图分类号】R94【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2014）16-0199-02
陈香露白露片收载于《中药成方制剂第八册》由甘草、次硝酸铋、陈皮、碳酸镁、川木香、氧化镁、大黄、碳酸氢钠、石菖蒲9味组成，具有健胃和中，理气止痛。用于胃溃疡，糜烂性胃炎，胃酸过多，急性、慢性胃炎，肠胃神经功能症和十二指肠炎等。为了有效控制该制剂的质量，用HPLC法测定了陈皮中橙皮苷的含量，为陈香露白露片的质量提供简便可行、准确可靠地定性定量检测方法。
1仪器与试药
高效液相色谱仪（Waters2695），MettlerAe240电子分析天平。陈香露白露片（湖南康寿制药有限公司，批号分别为111001、110301、120201）；处方中药材（衡阳市药材公司）；橙皮苷（批号110721-200613），均由中国生物制品鉴定所提供；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其它所用试剂均为分析纯。
2含量测定
2.1检测波长的选择：参考文献[1]，并对橙皮苷对照品溶液200～350nm波长范围内进行扫描，其在283.1nm波长处有最大吸收且灵敏度高，故选定检测波长为283nm。
2.2色谱条件：色谱柱：DiamonsilTMC18柱（250mm×4.6mm，5um）；流动相：甲醇-醋酸-水（35：4：61）；流速：1.0ml/min；检测波长283nm；柱温：30℃；进样量10ul；理论板数以芍药苷峰计算为3805。
2.3对照品溶液的制备：精密称取橙皮苷对照品，加流动相制成1ml含4.1031mg的溶液，作为对照品储备液。精密吸取对照品储备液1ml置10ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为对照品溶液。
2.4供试品溶液的制备：取本品10片，除去包衣，研细，取约1g，精密称定，置索氏提取器中加石油醚（60～90℃）40ml，回流提取3小时，弃去提取液，药渣挥干，加甲醇40ml，回流提取至无色，放冷，过滤，用甲醇定容到50ml过滤，取续滤液作为供试品溶液。
2.5线性关系的考察：精密吸取上述橙皮苷对照品贮备液0.10，0.50，1.00，2.00，4.00，8.00置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度。分别精密吸取10ul注入液相色谱仪中测定。线性回归方程为Y=14248721.3X-28612.7，r=0.9999。结果表明橙皮苷进样量在0.0603～4.8248ug范围内与峰面积线性关系良好。
2.6空白试验：取不含陈皮的阴性样品，按供试品溶液制备方法提取，并按上述色谱条件进行检测。结果在橙皮苷对照品相同保留时间处无干扰峰出现。（见图2）
2.7精密度试验：取同一供试品溶液10ul，连续测定6次。结果峰面积积分值的RSD为0.66%（n=6），表明仪器精密度良好。
2.8稳定性试验：取同一供试品溶液，分别在2，4，6，8，10，12h依法测定。结果RSD为0.87%（n=6），表明供试品溶液在12小时内稳定。
2.9加样回收试验：取已知含量的样品，分别添加橙皮苷对照品适量，按拟定色谱条件进行测定，计算加样回收率，结果见表1。
表1橙皮苷加样回收试验结果（n=6）
样品含量（ug）加入量（ug）测得量（ug）回收率（%）x-（%）RSD（%）
0.4580.1120.571100.9
0.4650.1120.579101.8
0.4460.1710.61598.8
0.4510.1710.623100.6100.81.16
0.4600.2320.697102.2
0.4520.2320.685100.4
2.10样品含量测定：按拟订色谱条件和溶液制备方法，用HPLC法测定样品中橙皮苷的含量。结果湖南康寿制药有限公司，批号分别为111001、110301、120201的样品中橙皮苷含量分别为7.26，7.24，7.24mg/g。
3讨论
3.1在测定橙皮苷时，曾比较甲醇-醋酸-水（不同比例）及其他流动相（如乙腈-3%磷酸溶液）。发现使用甲醇-醋酸-水（35：4：61）流动相时出峰时间约为22.5分钟，待测成分分离度较好，且峰形佳。
3.2方法学研究证明，HPLC法稳定性、重现性好，精密度、回收率都较满意。
4小结
经过实验的摸索最终确定以甲醇-醋酸-水（35:4:61）为流动相，经验证，分离度好，踏板系数高。通过对本品的线性关系的考察、线性关系的考察、精密度试验、稳定性试验、加样回收试验等方法的考察，结果表明采用高效液相色谱条件测定陈香露白露片中橙皮苷的含量，方法稳定、可靠，能有效的控制药品的质量。.
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2010：176.