论文摘要
一、研究目的本项目在前期研究基础上,通过对大鼠糖尿病模型的一般情况及其并发肾脏病理改变的研究,进一步探讨穿心莲内酯（AP）对糖尿病及其并发肾脏改变病理生理过程的影响,特别是对肾脏的一般功能及组织病理改变与超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱苷肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）等抗氧化酶活性的影响。按照以药测证的方法寻找药物作用的靶点,尝试以此为基础来阐释糖尿病并发肾脏病理改变时各种抗氧化酶发生的改变,及药物干预所致抗氧化酶的改变对糖尿病并发肾脏病理改变的影响。以期对糖尿病及其并发肾脏病理改变进行有效防治作出一点尝试。二、研究内容与方法实验研究将清洁级雄性SD大鼠分为阴性对照组（C组）、预防治疗组（PA组）和糖尿病造模组后,PA组及糖尿病造模组给予高脂饲料喂养,同时PA组给予AP水溶液100mg·kg-1d-1灌胃。4周,后采用分两次间隔一周腹腔注射STZ(单次剂量为30mg·kg-1)的方法建立糖尿病大鼠模型。确定成模第二天后,将模型成功的大鼠随机分为穿心莲内酯大剂量组（HA组）;穿心莲内酯小剂量组（LA组）、二甲双胍对照组（M组）、糖尿病模型组（D组）。加上之前分好的PA组与C组,共6组。各组大鼠按10ml·kg-1灌胃给药,M组用二甲双胍片的研碎粉剂250mg·kg-1d-1灌胃;LA组每只予AP水溶液50mg·kg-1d-1灌胃;HA组每只予AP水溶液100mg·kg-1d-1灌胃;D组与C组用蒸馏水灌胃。上述各组灌药1次·d-1,连续给药共8周。成模之后各组大鼠自由进食、饮水,实验中不予使用胰岛素和其它降糖药。观察各组大鼠一般情况,测体重。最后测双侧肾重,计算肾脏指数,检测血糖、24小时尿蛋白、尿肌酐和血肌酐等情况,可见光分光光度计法测大鼠肾皮质组织MDA、SOD、CAT、GSH-Px的OD值,并计算其酶活性,HE、Masson、PAS、PASM+MASSON特染检测大鼠肾组织的病理改变。三、研究结果实验中观察到D组大鼠及各治疗组大鼠成模后,开始表现为多饮、多食、多尿、体重下降。随着实验进展,以上表现逐渐好转,且各治疗组经治疗后,缓解程度较D组明显。同时,与阴性对照组比较,D组大鼠24小时尿蛋白、血肌配、血尿素氮、血糖、肾重指数均显著性升高,而HA组比D组各项指标均有显著性降低（P<0.05）。M和HA组肾脏组织MDA水平显著低于D组（P<0.05）。HA组、C组的GSH-PX活性大于D组,且有显著性差异（P<0.05）。病理学光镜下可见D组大鼠肾小球肥大、系膜细胞和系膜基质增生明显,肾小球基底膜增厚。与D组比较,HA组大鼠肾脏组织病理变化明显改善且肾脏ECM相对面积（肾小球基质面积/肾小球面积）显著性降低（P<0.05）。四、结论AP可以通过对糖尿病大鼠肾脏组织GSH-Px的影响,降低糖尿病导致的肾脏高氧化应激状态,提高肌酐清除率,降低尿蛋白、血肌酐、血尿素氮等指标,使糖尿病大鼠一般状况和肾小球及系膜细胞的病理改变好转,能降低糖尿病引起的肾脏损害,可能提高长期存活率。AP可能可以作为未来防治糖尿病并发肾脏病理改变的药物,具有潜在的研究价值。