阳长清(四川省邻水县人民医院检验科四川邻水638500)
【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)26-0257-01
【摘要】目的为了提高HBsAg检测质量，自制BHsAg室内质控血清，以降低假阳性、假阴性的出现率，相应提高检测的准确度。方法采用不同厂家的诊断试剂检测，将质控血清分装放在不同温度下保存后多次测定。结果经统计处理三者之间无显著差异(P>0.05)。结论自制HBsAg室内质控血清稳定，易保存，能反映常规检测精密度，该质控血清适宜作HBsAg室内质控使用。
【关键词】HbsAg室内质控ELISA
乙型肝炎是我国发病率较高的疾病之一，除现症病人外约有10%的人群为乙肝携带者，其临床诊断主要依赖于临床检验结果，而实际工作中HBsAg检测结果往往出现假阳性、假阴性，给患者造成误珍，延误诊治时间[1]。鉴于此，笔者以卫生部临床检验中心提供的HBsAg临界值血清为模板，然后自制HBsAg的临界值质控血清，并应用于常规条件下的室内质控，大大降低了假阳性、假阴性的发生。现报道如下。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1标本收集用无菌管收集临床与检验确诊为“乙型病毒性肝炎患者”的血清，外观需无溶血、脂血、黄疸、无污染、清晰透明。收集20份左右，约10ml，充分混匀，分装后置4℃和－20℃冰箱保存备用。
1.1.2参考血清卫生部临检中心提供的乙型病毒临界值血清，批号“0805”，含量2ng/ml。
1.1.3试剂与仪器上海实业科华生物技术有限公司提供的HBsAgELISA检测试剂盒；北京万泰生物药业股份有限公司提供的HBsAgELISA检测试剂盒；DLA-960酶标仪；AMPW自动洗板机；YDME微量振荡器。
1.2实验与方法
1.2.1确定稀释度用灭活2H2O稀释混合血清成不同稀释倍数，严格按照试剂盒操作说明，常规条件下与卫生部临检中心提供临界值血清同测，测得1/400倍时其OD、S/CO值与卫生部临检中心提供的临界值血清接近。
1.2.2分装备用将混合血清作1/400倍的大批量稀释，其中小牛血清占15%，二甲亚砜占0.5%，叠氮钠占0.3%,混匀灭菌分装、冷藏和冰冻保存。
1.2.3标本处理取4℃和－20℃冰箱保存的质控血清置56℃10小时灭活后离心沉淀，过滤除菌。
2实验结果
2.1取1/400倍稀释血清连续20次重复测定，两种试剂两种批号的结果差异不大
2.2将4℃冷藏一周和－20℃冷冻一月的稀释血清随机抽取质控血清，连续检测20次
2.3统计学方法所有指标用OD均值X，SD的均值S，以X±S表示，采用SpSS10.0软件统计，比较采用配对t检验。
3讨论
3.1在实验室常规操作进行中测得S/CD均值为1.15，保证了实验的可靠性，且该实验质控血清显示结果时颜色较浅，但肉眼仍可与阴性对照明显区别。
3.2按我国临床实验室条件和试剂生产水平，卫生部HBsAg（ELISA）临界值血清标准为2ng/mL]。其OD值在0.056左右，S/CO均值为1.15，SD为0.002593，CV为4.6%,4℃和－20℃保存后连续检测结果0D值在0.059左右，SD值0.002900左右，CV为5.3%左右，S/CO的均值为1.16。说明该自制质控血清较稳定。
参考文献
[1]赵祥胜.乙型肝炎表面抗原室内质控血清制备及质量保证的控讨，武汉医学杂志，1995，19(3)：191-192