论文摘要
目的建立海人酸小鼠内侧颞叶癫痫模型,并探讨Notch信号通路在癫痫形成过程中的作用。方法C57BL/6小鼠100只,随机分为对照组30只、模型组70只,通过脑立体定位技术,向模型组小鼠右侧海马内注射海人酸制备内侧颞叶癫痫模型,对照组以同样方式注射等体积生理盐水。通过观察注射后小鼠行为学变化,以及术后不同时间点病理学检查,判定模型建立是否成功。以western blot定量检测注射后不同时间点,小鼠注射侧海马组织Notch信号通路关键分子(NICD)表达量的变化,并通过NICD免疫荧光分析其在海马组织的分布。结果1.模型组小鼠单侧海马内注射海人酸后,癫痫持续状态出现率为91%(62/66),6只小鼠因癫痫持续状态死亡,建模成功率80%(56/70)。对照组小鼠均无癫痫发作。2.同对照组小鼠相比,模型组小鼠术后3h即于双侧海马CA1区、CA3区、门区及齿状回出现细胞排列紊乱、体积变小、胞核固缩等神经元受损表现,以CA3区最显著；术后5d,模型组小鼠双侧海马各区均出现明显的神经元丢失,注射对侧CA2区神经元相对保留；术后5w,模型组小鼠注射侧海马各区神经元进一步丢失,伴明显的齿状回颗粒细胞散布,这和人类内侧颞叶癫痫病理表现相似,而注射对侧海马结构得到修复。3.模型组小鼠海人酸注射侧,术后3h、16h、24h、3d、5d、1w海马组织NICD相对表达量依次为(以对照组表达量为1,n=6)：1.079±0.101、1.446±0.249(P<0.01)、1.334±0.268（P<0.05)、1.685±0.390(P<0.01)、2.036±0.698(P<0.05)、1.257±0.456。4.模型组小鼠术后5d,注射侧海马区NICD免疫荧光明显升高,且主要集中在齿状回颗粒细胞下层。结论1.以C57BL/6小鼠为对象,通过海人酸单侧海马内注射建立内侧颞叶癫痫动物模型是可行且可靠的。2. NICD表达量在内侧颞叶癫痫形成过程中上调,且集中分布在齿状回颗粒细胞下层,提示Notch信号通路可能参与了内侧颞叶癫痫的形成,但其具体机制还需进一步研究。
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