中国人肝细胞腺瘤基因组微卫星变异特征及其临床病理学意义的研究

论文摘要

目的：通过对大系列166例国人肝细胞腺瘤（HCA）微卫星变异特征及其临床病理学意义的研究，探讨HCA的发生机制和分子病理学诊断的意义。方法：对166例HCA患者的临床病理学参数进行系统的统计学分析；采用显微组织切割基础上的PCR-SSCP检测方法，选取60例HCA病例进行12个基因组微卫星的不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）检测，对HCA的临床和病理特征与微卫星MSI和LOH的相关性进行对比分析。结果：在166例HCA中，男性114例，占68.4%，平均年龄40.0±2.1岁；女性52例，占31.6%，平均年龄33.4±3.8岁。男女HCA患者性别构成比在1030岁、3050岁和≥50岁3个年龄组之间，以及在体重指数（BMI）＜24、24-28、≥28（kg/㎡）3个组之间均有显著差别（P＜0.05）；女性HCA患者中，HCA瘤体直径≥10㎝的比例明显高于男性（P＜0.05）；免疫组织化学染色显示，HCA的Glypican-3阳性表达率显著低于高分化肝细胞癌（P＜0.05）； HCA的β-catenin阳性表达率显著高于局灶性结节性增生（P＜0.05）。MNR谱（5种国际微卫星MSI标准对照谱）和本组12个微卫星MSI检测谱的符合率为77.5%，两种检查方法存在高度一致性（P＞0.05）。在本组12个微卫星中，MSI和LOH的总体发生率分别为35.72%和8.82%，其中D11S4207在女性HCA患者、D2S2726在有高血压病史的HCA患者中发生MSI的频率显著升高（P＜0.05）；D6S1581在女性HCA患者发生LOH的频率显著升高（P＜0.05）；40例发生高频微卫星MSI（≥2/5MNR谱）的男性HCA患者与酗酒有显著相关性（P＜0.05）；在女性HCA患者中，BMI≥24者微卫星MSI的发生率显著增高（P＜0.05）。结论：（1）与西方国家HCA患者以青年女性为主不同，中国HCA患者以中年男性为主，提示可能存在HCA病因学和发生机制上的差异。（2）微卫星变异特征分析显示，中国HCA的发生可能与多种代谢途径紊乱有关，其中包括：1.女性HCA易发生D11S4207微卫星MSI，可能与NF-κB途径有关；2.有高血压病史的HCA患者易发生D2S2726微卫星MSI，可能与HNF-1α途径有关；3. BMI≥24的女性HCA患者易发生D6S2075微卫星MSI，女性HCA患者易发生D6S1581微卫星LOH，可能与ERK和AKT途径有关。（3）HCA的分子变异以代表错配修复基因途径的MSI特征为主，代表肿瘤抑制基因LOH途径可能部分参与HCA的发病机制，这对HCA的分子分型，有助于为评估HCA患者的发生机制及与组织病理学变异的关系提供重要的理论依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 肝细胞腺瘤的临床病理特点
• 1 材料和方法
• 1.1 研究对象
• 1.2 研究参数
• 1.3 统计学分析
• 2 结果
• 2.1 HCA 患者的发病特点
• 2.2 HCA 患者的年龄分布特点
• 2.3 HCA患者的BMI特点
• 2.4 临床特点
• 2.5 实验室检查
• 2.6 影像学检查
• 2.7 HCA 病理特点
• 2.8 免疫组织化学特点
• 2.9 诊断与鉴别诊断
• 2.10 5 例 HCA 癌变复发的特点
• 2.11 本组 HCA 患者与国外 HCA 患者的比较
• 3 讨论
• 第二部分 肝细胞腺瘤基因组微卫星变异研究
• 1 材料和方法
• 1.1 主要仪器、试剂和溶剂
• 1.2 标本收集
• 1.3 基因组 DNA 制备
• 1.4 显微组织切割
• 1.5 微卫星引物
• 1.6 12 对微卫星引物序列
• 1.7 5 对 MNR 微卫星谱引物序列
• 1.8 PCR 反应
• 1.9 聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 1.10 统计学处理
• 2 结果
• 2.1 12 对微微卫星检测和 MNR 谱检测变异结果及比较
• 2.2 12 对微卫星相关基因组变异结果比较
• 2.3 HCA 临床病理参数和 MNR 谱微卫星 MSI 比较
• 2.4 HCA 患者性别因素和微卫星变异的关系
• 2.5 HCA 微卫星变异与基因相关信号转导途径和临床病理特征
• 3 讨论
• 3.1 MNR 谱和 12 对微卫星检测方法比较
• 3.2 微卫星变异的临床病理意义
• 3.3 12 对微卫星变异与信号转导途径
• 参考文献
• 主要缩略词中英文对照（按字母序排列）
• 肝细胞腺瘤临床病理特征和免疫组织化学特点
• 一 临床表现和特点
• 二 实验室检查
• 三 影像学检查
• 四 病理检查
• 五 免疫组织化学
• 六 诊断与鉴别诊断
• 讨论
• 参考文献
• 超重/肥胖患者肝细胞腺瘤微卫星不稳定性特点
• 1 材料和方法
• 1.1 标本来源
• 1.2 HCA 病理诊断标准
• 1.3 微卫星位点选择
• 1.4 PCR-SSCP 检测方法
• 1.5 PCR-SSCP 结果判断标准
• 1.6 MSI 类型定义
• 1.7 统计学方法
• 2 结果
• 2.1 HCA 患者性别特点
• 2.2 HCA 患者年龄特点
• 2.3 HCA 患者 BMI 特点
• 2.4 HCA 患者 MSI 特点
• 2.5 超重/肥胖 HCA 患者微卫星 MSI 特点
• 3 讨论
• 参考文献
• 致谢