一、健脑合剂对小鼠急性脑缺氧的保护作用及学习记忆障碍的改善作用（论文文献综述）
王双[1]（2021）在《保健食品益智咀嚼片的开发与研究》文中认为目的益智咀嚼片是在六味地黄丸的基础上经化裁重组而得的一种具有填精益髓、养血补虚、安神益智功效的保健食品,为进一步开发益智咀嚼片提供试验依据,本研究对益智咀嚼片的处方配伍、制备工艺、功能学评价、安全性评价及质量标准进行了系统研究。方法通过文献考证,对该方中各药物起决定性作用的成分及其相关药物的作用机制进行了分析,检验组方思路的合理性;同时采用功能学实验对处方不同剂量进行优选,采用正交实验进行工艺优选;采用东莨菪碱模型小鼠通过跳台实验、避暗实验和Morris水迷宫实验验证处方改善记忆的功能。此外,利用网络药理学研究技术及分子对接技术,预测并筛选益智咀嚼片改善记忆障碍的潜在作用靶点,为其潜在作用机制提供理论依据,并在此基础上运用分子对接技术以验证靶点预测的可靠性来进一步阐释益智咀嚼片处方配伍特点。提取工艺中对处方中的原料药经过前处理后,采用了正交设计试验,考察指标为总皂苷的含量,对浸泡时间、煎煮时间、加水量、煎煮次数为四个因素,通过设计正交试验进行考察,确定水提取的工艺参数,从而选择最佳的水提工艺,并加以验证。成型工艺中以水提取物为主要原料,在选择适当的辅料时,通过单因素试验法,将在使用量上对填充剂、黏合剂及矫味剂进行优化筛选,从而确定最优方案,应用湿法制粒压片工艺,研制出制备方法简单、酸甜可口、携带食用方便的益智咀嚼片。根据最优工艺进行工艺验证。益智咀嚼片3个剂量低剂量组（2 g/kg）、中剂量组（4 g/kg）、高剂量组（8 g/kg）,连续对ICR小鼠灌胃给予30 d后,在末次给予受试物后,对空白组以外的其他各组小鼠,采用腹腔注射的方法,每只注射东莨菪碱5 mg/kg,从而制备记忆障碍模型。造模后,通过跳台实验、避暗实验、Morris水迷宫实验等学习记忆相关指标,进一步评价各组小鼠学习记忆能力的变化,对小鼠脑组织中的乙酰胆碱（Ach）、乙酰胆碱酯酶（Ach E）及乙酰胆碱转移酶（Ch AT）含量的变化进行检测,以此来评价益智咀嚼片改善小鼠记忆的功能作用。对益智咀嚼片进行安全性评价研究。首先,在给予小鼠、SD大鼠受试物时,以最大剂量（46g生药/kg）、最大灌胃量（20 m L/kg BW）进行灌胃,不间断地观察14天,同时记录动物中毒反应情况;然后设定益智咀嚼片的3个剂量分别为2g生药/kg、4g生药/kg、8g生药/kg连续对SD大鼠灌胃30天,期间动态观察动物一般情况、体重、摄食量,试验结束后对其进行剖检、血液学、血液生化、脏器指数和组织病理检查。在质量控制研究中,以感官评价对其进行视觉、嗅觉、味觉等评判;本研究采用紫外分光光度法,建立了益智咀嚼片中的总皂苷的含量测定的方法;采用高效液相色谱法建立益智咀嚼片远志皂苷的含量测定方法;采用高效液相色谱法对远志中的细叶远志指标成分进行含量测定,建立制定了益智咀嚼片产品质量标准草案。结果益智咀嚼片具有填精益髓、养血补虚、安神益智的功效。网络药理学研究显示益智咀嚼片中的活性成分主要活动范围在经活性配体-受体相互作用通路、血管内皮生长因子信号通路、胆碱能突触信号通路等上,益智咀嚼片可能是通过豆甾醇、β-谷甾醇、薯蓣皂甙元、海风藤烯酮等活性成分细胞通过增殖凋亡调控、炎症反应、线粒体组成等过程AKT1、VEGFA、PTGS2、Ach、Ach E、Ch AT靶点作用于通路发挥改善记忆作用。益智咀嚼片最佳制备的处方工艺是:将原料药材浸泡在水中1h,加至其10倍体积的水,煎煮2次,每次煎煮60min,滤过,浓缩成浸膏并采用减压干燥的方法得到浸膏粉末,将浸膏粉末过100筛后,加入处方量的17%乳糖、6%微晶纤维素和17%木糖醇混合均匀,并使用95%乙醇作为润湿剂,湿法制粒过20目筛,将所得的颗粒在50℃真空干燥至水分在5-8%左右过14目筛,最后将制得的颗粒加入处方量的6%二氧化硅和2%硬脂酸镁混合进行压片,即得片重控制在910±3%mg、片子硬度5-7Kg.N,且片重差异检查合格,素片用薄膜包衣预混剂（白色和绿色）进行包衣,得到鲜绿色,十分美观。功能学评价结果显示益智咀嚼片能显着延长东莨菪碱小鼠跳台潜伏期,明显减少3 min内错误次数,显着延长模型小鼠的避暗潜伏期,明显减少5 min内的错误次数,能够缩短小鼠定位航行中逃逸潜伏期,显着增加以及平台进入次数,提示益智咀嚼片能够明显地改善东莨菪碱所引起的学习记忆障碍。益智咀嚼片4g生药/kg、8g生药/kg剂量组能显着降低东莨菪碱小鼠脑组织中Ach含量,且8g生药/kg组能显着提高东莨菪碱小鼠脑组织中Ach E及Ch AT的含量,益智咀嚼片可明显改善东莨菪碱小鼠模型的学习记忆能力,其可能通过调节胆碱能通路,增加Ach、Ch AT和降低Ach E的含量来改善东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍。在安全性评价方面,益智咀嚼片未见明显的毒副性,新增、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏等多个重要器官未见明显损伤,安全最大剂量为46g生药/kg,等同于临床人用剂量的150倍,可见益智咀嚼片安全性之高,具有推广性。在质量标准方面,本文运用紫外分光光度法对益智咀嚼片中指标成分总皂苷地含量进行测定,采用HPLC法建立了益智咀嚼片中细叶远志皂苷的含量测定方法,参照国家标准（GB16740-2014）,制定了益智咀嚼片质量标准草案。结论本文研制的益智咀嚼片是一款以改善记忆障碍为主要功效的保健品。通过大量数据挖掘、网络药理学及功能学评价等手段,全面阐述了益智咀嚼片处方配伍的合理性,确定了工艺参数,并对益智咀嚼片在改善记忆障碍的功能和安全性方面进行了评价,制定了质量标准,大体完成了益智咀嚼片的研制,值得进一步推广应用。
田丹枫[2]（2020）在《参知健脑方对拟血管性痴呆细胞模型的神经保护作用及机制研究》文中指出血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）是痴呆常见类型之一,以记忆力进行性衰退、认知功能障碍及性格、情感等精神改变为主要临床表现。VD的病理机制与兴奋性氨基酸毒性损伤、突触可塑性改变、钙超载、氧化应激损伤及细胞凋亡等过程密切相关,早预防、早发现、早治疗可显着提高VD患者的生存率及生活质量,降低死亡率。课题组基于VD的“毒损脑络”中医创新病因病机理论并结合多年临床经验,创制了具有解毒通络作用的参知健脑方。前期动物体内实验研究表明,本方可改善VD大鼠的认知功能,修复受损海马神经元,通过调控谷氨酸突触囊泡转运关键蛋白clathrin介导的NMDA受体内吞过程,减轻谷氨酸所致神经兴奋性毒性而起到神经保护作用。但研究大多仅从单个靶点或通路评估参知健脑方对VD的干预作用,并未完全解释其药效机制;且目前尚未对其进行体外细胞实验深入分析验证,其分子机制值得更深入地探索研究。目的:基于VD“毒损脑络”理论,（1）通过网络药理学探讨参知健脑方治疗VD的药理作用及分子机制;（2）通过体外实验,筛选干预药物的适宜浓度,并探讨参知健脑方对拟VD细胞模型增殖及毒性的影响;（3）研究参知健脑方对拟VD细胞模型周期、凋亡及细胞内游离Ca2+和ROS/Superoxide水平的影响,探讨其对VD细胞模型谷氨酸兴奋性毒性的神经保护作用,并验证参知健脑方的治疗有效性及网络药理学结果的可靠性;（4）研究参知健脑方对拟VD细胞模型clathrin、RAB5B和NMDAR1表达水平的影响,探讨其是否通过调控clathrin介导的NMDA受体内吞过程发挥对VD的治疗作用,并验证网络药理学结果的可靠性。方法:第一部分:依托多种数据库检索并收集参知健脑方的入血化学成分、作用靶点和VD作用靶点,随后整合数据获得参知健脑方治病靶点。通过Cytoscape3.7.1构建参知健脑方-活性化合物-治病靶点网络图,STRING数据库构建蛋白互作网络,DAVID数据库进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。第二部分:采用谷氨酸诱导PC12细胞损伤作为VD细胞模型,采用CCK-8法和IncuCyte动态细胞成像技术筛选出谷氨酸适宜造模剂量及参知健脑方低、中、高干预剂量。参知健脑方各剂量与盐酸美金刚分别干预VD细胞模型,观察其对细胞形态、细胞增殖及毒性的作用。第三部分:采用谷氨酸诱导的PC12细胞损伤作为VD细胞模型,参知健脑方各剂量与盐酸美金刚分别干预VD细胞模型,采用流式细胞术等技术观察其对细胞周期、凋亡、细胞内游离Ca2+、活性氧和超氧化物（ROS/Superoxide）水平的影响,qRT-PCR检测caspase-3 mRNA的相对表达水平。第四部分:采用谷氨酸诱导的PC12细胞损伤作为VD细胞模型,参知健脑方各剂量与盐酸美金刚分别干预VD细胞模型。采用免疫荧光和Western blot技术分别检测clathrin、RAB5B和NMDAR1的分布和蛋白表达水平;qRT-PCR技术检测clathrin和NMDAR1在mRNA水平上的表达情况。结果:第一部分:网络药理学研究结果表明,（1）参知健脑方-活性化合物-治病靶点网络图包含3个单味药,18个活性化合物,154个治病靶点。其中,芍药苷、白芍苷和新芒果苷等活性成分关联基因较多,FGF1和FGF2位列治病靶点首位。（2）PPI网络包含154个靶点蛋白,关键蛋白涉及INS、ALB、AKT1、CASP3、JUN、PTGS2等。（3）GO富集分析共有条目4960个,其中生物过程相关条目4176个,细胞组成相关条目306个,分子功能相关条目478个。（4）KEGG富集分析共有相关通路30条,涉及MAPK信号通路、HIF-1信号通路、凋亡通路、神经活性配体-受体相互作用通路、钙信号通路等。第二部分:体外实验结果表明,（1）药物干预剂量筛选:谷氨酸适宜造模剂量为22.5 mM,参知健脑方低、中、高剂量分别为:0.05、0.1、0.2 mg/mL,盐酸美金刚干预剂量为10 μM。（2）细胞形态学:正常PC12细胞呈不规则长梭形,形态完整,突起明显,贴壁牢固;谷氨酸处理的PC12细胞呈圆球形,结构不完整,胞体皱缩,易聚集成团;突起变短或减少、消失,细胞贴壁不牢;随着时间的增加,死细胞数明显增多,细胞死亡率显着上升。与模型组相比,参知健脑方各剂量组细胞胞体均相对完整,部分细胞突起少量存在,存在突触间联系;细胞贴壁较模型组牢固;随着时间的增加,死细胞数增多不明显,细胞死亡率没有显着上升。盐酸美金刚组细胞形态较模型组略有改善。（3）CCK-8增殖实验:谷氨酸可以显着降低PC12细胞活力,抑制细胞增殖（P<0.05）;参知健脑方各剂量和盐酸美金刚均可明显提高PC12细胞活力,促进细胞增殖,降低细胞毒性（P<0.01）。（4）IncuCyte增殖实验:谷氨酸可以持续增加细胞绿色荧光面积和死细胞数,死亡率呈明显上升趋势,细胞融合率持续下降;参知健脑方各剂量均可以有效减少细胞绿色荧光面积和死细胞数,死亡率降低,融合率呈上升趋势;盐酸美金刚的各项结果趋势与谷氨酸类似。（5）CFSE增殖实验:谷氨酸可以明显增高CFSE平均荧光强度（P<0.01）,参知健脑方各剂量和盐酸美金刚CFSE平均荧光强度均呈减弱趋势,但差异无显着统计学意义（P>0.05）。第三部分:体外实验结果表明,（1）细胞周期:谷氨酸可以显着增加S期细胞比例,使细胞阻滞在S期（P<0.01）;参知健脑方各剂量和盐酸美金刚均可以显着降低S期细胞比例（P<0.01）。（2）细胞凋亡:谷氨酸可以明显增加凋亡率（P<0.01）,参知健脑方各剂量和盐酸美金刚均可以显着减少细胞凋亡（P<0.01）。（3）Ca2+和ROS/Superoxide水平:谷氨酸可明显升高细胞内Ca2+和ROS/Superoxide水平（P<0.01）,参知健脑方各剂量和盐酸美金刚均可不同程度降低细胞内Ca2+和ROS水平（P<0.05,P<0.01）。（4）qRT-PCR:谷氨酸可以明显增加caspase-3 mRNA的表达水平（P<0.01）;参知健脑方和盐酸美金刚均可显着降低caspase-3 mRNA的表达水平（P<0.01）。第四部分:体外实验结果表明,（1）免疫荧光:clathrin主要表达于细胞膜和细胞质;RAB5B主要表达于细胞膜和细胞质中的早期内体;NMDAR1主要表达于细胞膜和突触。谷氨酸显着降低clathrin和RAB5B的表达（P<0.01,P<0.01）,增加NMDAR1的水平（P<0.01）;参知健脑方各剂量均可上调clathrin、RAB5B水平（P<0.05,P<0.05）,下调NMDAR1水平（P<0.05）。（2）qRT-PCR:谷氨酸可明显降低clathrin mRNA的表达（P<0.01）,并增加NMDAR1 mRNA的表达水平（P<0.01）;参知健脑方可明显增加clathrin的表达并显着降低NMDAR1的表达水平（P<0.01）。（3）Western Blot:谷氨酸可抑制clathrin和RAB5B的表达,明显增加NMDAR1的表达水平（P<0.01）;参知健脑方各剂量均可以显着上调clathrin、RAB5B表达水平,下调NMDAR1 的水平（P<0.01）。结论:（1）参知健脑方治疗VD的作用靶点和通路机制呈现多角度、多途径、多环节的特点,其治病靶点大多与血管、神经保护及突触可塑性调节相关,且靶点与通路之间相互协同发挥作用,提示这可能是参知健脑方治疗VD的关键,为深入研究参知健脑方治疗VD的其他机制提供了新思路。（2）适宜浓度的谷氨酸可以显着促进PC12细胞增殖,但谷氨酸浓度过高会产生细胞毒性,导致细胞死亡。参知健脑方各剂量能均能明显促进细胞增殖,提高细胞活力及细胞融合率,减少死细胞数目及死亡率,减少细胞毒性损伤;均对细胞形态有一定修复作用,改善细胞贴壁不牢的状态。（3）参知健脑方能有效修复细胞周期循环,下调caspase-3的表达而减少细胞凋亡;降低细胞内Ca2+浓度而阻止Ca2+内流并增强细胞清除ROS和Superoxide的能力,减少谷氨酸毒性积累及氧化应激损伤。参知健脑方可影响上述多种途径发挥神经保护作用;验证了参知健脑方治疗VD的有效性以及网络药理学计算机预测结果的可靠性。（4）Clathrin介导的NMDA受体胞吞障碍导致谷氨酸兴奋性毒性积累,“解毒通络”的参知健脑方可改善谷氨酸损伤PC12细胞clathrin介导的NMDA受体胞吞过程而降低谷氨酸神经兴奋性毒性。其发挥神经保护的作用机制可能与上调clarhrin和RAB5B的表达,促进clathrin介导的NMDA受体胞吞过程有关。验证了参知健脑方治疗VD的有效性以及网络药理学研究结果的可靠性,为“解毒通络”法则治疗VD提供了微观证据。
王璐[3]（2019）在《基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用》文中研究说明目的:以自然衰老大鼠为研究对象,观察补肾方药（左归丸）、益气方药（益气聪明汤药）及两方合用（合剂）对老年大鼠空间学习能力,血清皮质酮含量,mi RNAFkbps-GR调控回路相关蛋白、表观遗传修饰酶与乙酰化修饰组蛋白的表达及学习记忆相关基因表达的影响,初步探索mi RNA-Fkbps-GR在自然衰老大鼠大脑海马分区的表达情况,为探索增龄性糖皮质激素的变化与学习记忆衰退的关系及中医补肾益气健脑、延缓学习记忆退化提供实验依据。方法:以自然衰老（23月龄）SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年左归组、老年益气组、老年合剂组和老年皮质酮（GC）拮抗组,另设青年对照组（同品系5月龄）。采用Morris水迷宫法观察各组大鼠记忆能力,ELISA法检测大鼠血清GC含量。免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜法观察各组大鼠大脑海马区表观遗传修饰相关酶蛋白Hdac2与Me CP2的共定位情况,免疫荧光法检测大鼠海马区与皮层区Fkbp5蛋白表达,免疫组化法检测Fkbp4蛋白表达,荧光定量PCR法及Western blotting检测大鼠糖皮质激素受体调控回路蛋白（GR,Fkbp5,Fkbp4,Dynein IC2）、表观遗传修饰酶（Dnmt1,Dnmt3a,Hdac2,Hat1）和学习记忆相关信号转导分子（Nptx2,Synapsin-1、Homer1）表达,Western blotting法检测乙酰化修饰组蛋白H4K5Ac,H4K12Ac表达情况,荧光定量PCR法检测mi R-124a与mi R-511的表达变化及各药物对老年大鼠上述各项指标异常变化的改善作用。结果:1.与青年对照组相比,老年大鼠学习记忆能力显着减退（P<0.05）,血清GC含量明显升高（P<0.05）,GR蛋白在大脑皮层与海马组织切片中荧光强度显着增强,表观遗传修饰酶Hdac2与Me CP2在海马神经元细胞核内共定位表达增多。海马总GR蛋白表达量与细胞核GR蛋白含量显着降低（P<0.01）,而细胞浆GR蛋白表达显着升高（P<0.01）,GR m RNA表达显着降低（P<0.001）,mi R-Fkbp5-GR调控回路中:动力蛋白Dynein IC2表达显着降低（P<0.001）、分子伴侣蛋白Fkbp5与Fkbp4蛋白表达显着升高（P<0.05）、Fkbp5基因m RNA表达显着升高（P<0.001）、mi R-511表达显着降低（P<0.001）、mi R-124a表达显着升高（P<0.001）,表观遗传修饰酶Hat1的基因表达（蛋白及m RNA）显着降低（P<0.05）、乙酰化修饰组蛋白H4K12Ac表达显着降低（P<0.05）、H4K5Ac无显着性变化、Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达显着增高（P<0.05）,学习记忆相关基因Nptx2、Synapsin-1基因表达显着降低（P<0.001）,Homer1基因表达无显着性变化。2.与老年对照组相比,补肾益气方药左归丸、益气聪明汤及拮抗剂RU38486均能不同程度的改善老年大鼠衰退的空间学习记忆能力、降低老年大鼠血清GC含量,减弱GR蛋白在大脑海马区与皮层组织切片中荧光强度,减少Hdac2与Me CP2在细胞核内的共定位表达。3.RU38486能够显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白、细胞浆GR蛋白（P<0.05）、GR m RNA（P<0.001）的表达,Hat1基因（P<0.01）、H4K12Ac蛋白的表达（P<0.001）,Nptx2蛋白（P<0.05）、Synapsin-1基因的表达（P<0.01）。同时RU38486可以显着下调Fkbp5、Dnmt1、Hdac2基因表达（P<0.05）,Dnmt3a m RNA（P<0.01）,mi R-124a表达（P<0.001）。而对Nptx2基因表达仅有上升趋势。对于Fkbp4蛋白、Dynein IC2蛋白等则无明显调整作用。4.左归丸还能显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白（P<0.001）、GR m RNA（P<0.001）、mi R-511表达（P<0.001）,Hat1基因表达（P<0.01）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时左归丸可以显着下调Fkbp4蛋白与mi R-124a表达（P<0.001）,Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达（P<0.01）。而对于细胞浆GR蛋白、Fkbp5蛋白等均无明显调整作用。5.益气聪明汤还能够显着上调老年大鼠海马细胞核GR蛋白（P<0.001）、mi R-511的表达（P<0.001）,Hat1 m RNA的表达（P<0.01）,H4K12Ac蛋白表达（P<0.001）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时益气聪明汤可以显着下调Fkbp5 m RNA（P<0.001）的表达,Dnmt1、Hdac2基因表达（P<0.01）。而对于Hat1蛋白的表达则有上调趋势,对于细胞浆GR蛋白、Dynein IC2等蛋白表达,均无调整作用。6.两方合剂（左归丸与益气聪明汤合剂）能够显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白及细胞浆GR蛋白（P<0.05）、GR m RNA的表达（P<0.001）;Hat1基因表达（P<0.01）、H4K12Ac蛋白表达（P<0.001）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时两方合剂还可以显着下调Fkbp5基因表达（P<0.05）,Fkbp4蛋白表达（P<0.05）、mi R-124a表达（P<0.001）,Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达（P<0.001）。而对于mi R-511表达、Dynein IC2蛋白的表达,两方合剂均无明显调整作用。结论:补肾益气方药左归丸、益气聪明汤主要是通过不同程度降低老年大鼠血清GC含量,调整mi R-Fkbps-GR回路相关基因m RNA表达,增高GR的核转位,降低海马组织表观遗传修饰酶（Dnmt1,Dnmt3a,Hdac2）的表达,增高组蛋白乙酰转移酶（Hat1）与乙酰化组蛋白H4K12Ac的表达,上调学习记忆相关基因（Nptx2、Snapsin-1）的表达,以抵抗高皮质酮对海马区域的毒性影响,进而发挥延缓学习记忆退化的作用。
王曙光[4]（2019）在《核桃肽改善睡眠剥夺诱导大鼠记忆障碍及其对PC12细胞神经保护作用机制研究》文中研究说明学习和记忆障碍被广泛认为是许多神经退行性疾病的主要临床综合症。失眠是导致现代社会部分与记忆缺陷相关的神经退行性疾病的主要原因之一。因此,开发功能性食品以减轻由失眠所导致的记忆缺陷显得尤为重要。研究报道核桃肽在多种动物记忆损伤模型中显示出明显的神经保护作用,然而未见关于核桃肽对睡眠剥夺（SD）诱导的大鼠学习和记忆障碍具有改善作用的研究报道。此外,大量研究主要集中在核桃蛋白水解物（WPH）的神经保护作用方面。较少涉及核桃蛋白水解物（WPH）中神经保护肽的结构特征。因此,本论文以核桃肽为研究对象,探明核桃肽对大鼠SD诱导的记忆缺陷具有改善作用的基础之上,进一步鉴定和表征核桃肽中的神经保护肽,并系统研究其对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用,揭示核桃神经保护肽的作用机制。本论文研究了核桃肽对睡眠剥夺导致的大鼠记忆障碍的改善作用:结果显示,核桃蛋白酶解物低分子肽段（WPHL,MW<3 kDa）较核桃蛋白酶解物（WPH）在定位航行和空间探索行为学试验中对模型大鼠具有更好的改善效果。使用WPH和WPHL干预可使得SD大鼠脑中抗氧化防御酶（CAT,GSH-px和SOD）活性和GSH/GSSG比例降低,以及MDA含量的升高趋于正常。以上结果表明核桃肽可以通过减轻氧化应激来减弱SD诱导的记忆缺陷,且WPHL表现出比WPH更强的神经保护作用。随后,对WPHL肽段进行分离鉴定,并化学合成目标肽进行谷氨酸损伤PC12细胞的体外神经保护作用研究:结果表明,采用Sephadex G-15凝胶过滤色谱可将WPHL分成的6个组分（G1-G6）,其中G4和G6对谷氨酸处理的PC12细胞存活率的提升作用最强。利用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS从G4和G6中鉴定出18条肽,其中GGW、VYY和LLPF可显着提高谷氨酸损伤PC12细胞的存活率,表现出较强的神经保护作用。最后,采用谷氨酸诱导PC12细胞氧化损伤模型探讨GGW、VYY和LLPF对神经细胞的保护作用机制:结果表明,GGW、VYY和LLPF可以保护PC12细胞免受谷氨酸诱导的细胞凋亡,并减少PC12细胞中ROS的产生。其中GGW和VYY发挥保护作用的潜在机制可能与它们强烈的自由基清除活性,以及减少PC12细胞中SOD和GSH-px消耗的能力有关。值得注意的是,几乎不具有自由基清除活性的LLPF也表现出显着的神经保护作用,可能与其对Ca2+内流和MMP损失的强烈抑制作用有关。此外,以上三条肽均可正向调控凋亡相关蛋白（Bax和Bcl-2）的表达。因此,核桃肽可作为预防记忆缺陷相关的神经退行性疾病的潜在营养保健品。
蔡浩斌[5]（2017）在《巴戟甲素改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力及其机制研究》文中研究说明目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）,又被称作老年性痴呆,一般多于老年期发病,临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征。阿尔茨海默病是以大脑中出现大量老年斑（SP）的形成、神经纤维缠结（NFTs）以及神经元细胞的大量丢失为主要病理改变的进展性神经系统退行性变疾病。根据世界卫生组织的报道,到目前为止,阿尔茨海默病在65岁以上老年人群中的发病率高达10%,而80岁以上的老年人群中,其发病率更是上升到40%以上。现在全世界大约有3500万的阿尔茨海默病患者,病人平均生存期为5到10年。阿尔茨海默病在老年人群中的致死率仅次于心脏病、恶性肿瘤和中风,排名第四位。按照老年人口比例以及发病率估算,目前中国已有超过1000万阿尔茨海默病患者,占亚太地区的40%,占世界约1/4。我国已成为阿尔茨海默病患者最多的国家。阿尔茨海默病带来的社会问题、经济问题、家庭问题以及公共卫生问题变得越来越严重,已经成为各国政府、公众以及广大医务工作者关注的焦点,中国也面临着比全球任何一个国家都更为严峻的阿尔茨海默疾病的挑战。至今仍未研究出能够有效治疗阿尔茨海默病或者阻断其病理进程的药物。阿尔茨海默病是美国十大死亡原因中,唯一一种既不可治愈,也不能阻止或减缓的疾病。从2012年至现在,6个阿尔茨海默症治疗药物也已夭折一半,但这仍不能阻止人们积极探索治愈阿尔茨海默症的信心。巴戟甲素是从巴戟天中分离出的一种单体,具有安全性高、药效确切、易于获得等特点。巴戟甲素在治疗AD方面有着巨大的研究价值,其作用靶点仍有待进一步的探索。本选题着眼于AD的一个重要致病因素Aβ的生成与降解,采用APP/PS1双转基因小鼠模拟AD病理和行为学特征,观察巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力以及脑内A β代谢、神经营养因子表达、神经炎症因子表达和突触结构稳定性的影响,阐明其神经保护作用机制及可能的作用靶点,为开发防治AD新药提供科学依据。方法:巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响:本研究选用7月龄APP/PS1双转基因小鼠30只（雄性）,按随机区组设计以及体质量相近的原则进行分组,每组10只小鼠,分为模型组以及巴戟甲素低剂量组、巴戟甲素高剂量组。选择10只（雄性）同背景7月龄非转基因C57BL/6J小鼠作为野生对照组。全部小鼠饲养于广州中医药大学实验动物中心SPF级清洁鼠房。巴戟甲素低剂量组给予20mg/kg/d,巴戟甲素高剂量组给予80mg/kg/d灌胃,野生对照组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,每日灌胃1次,持续给药4周。随后分别应用Morris水迷宫和新物体识别两个行为学试验,从宏观方面观察巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响。巴戟甲素对APP/PSl双转基因小鼠脑中A β代谢的影响:采用荧光定量PCR法检测APP/PS1双转基因小鼠脑中APP、PS1的基因水平。采用Western Blot检测APP/PS1双转基因小鼠脑中APP、PS1、BACE1、NEP、IDE等与Aβ生成及降解相关蛋白水平的变化,采用ELISA检测APP/PS1双转基因小鼠脑中A β 1-42含量的变化。采用硫黄素S染色法检测APP/PS1双转基因小鼠脑中老年斑数量的变化。巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中神经营养因子表达水平的影响:采用Western Blot检测APP/PS1双转基因小鼠脑中神经营养因子BDNF和NGF蛋白水平的变化。巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中神经炎症因子表达水平的影响:采用Western Blot检测APP/PS1双转基因小鼠脑中核转录因子NF-κ B以及TNF-α、IL-1β等中枢神经炎症相关因子表达水平的变化。巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中突触结构稳定性的影响:采用Western Blot检测APP/PS1双转基因小鼠脑中SYN、PSD-93和PSD-95等与突触结构相关蛋白水平的变化。结果:1.巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响Morris水迷宫测试结果:在为期5天的定位航行试验中,各实验组小鼠的逃避潜伏期随着训练时间呈缩短趋势。与模型组比较,野生对照组小鼠的逃避潜伏期缩短更为显着,差异有统计学意义（P<0.01）。且巴戟甲素低剂量组和高剂量组小鼠的逃避潜伏期均较模型组小鼠缩短更为显着,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。随后进行的空间探索测试结果,与模型组比较,野生对照组小鼠穿越原平台位置的次数以及在平台所在象限停留的时间均显着增多,差异有统计学意义（P<0.01,P<0.01）。且巴戟甲素高剂量组小鼠穿越原平台位置的次数以及在平台所在象限停留的时间也均较模型组小鼠增多,差异有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。新物体识别测试结果:在第二天的学习期中,各实验组小鼠对两个物体的偏好程度并没有显着的差异,差异无统计学意义（P>0.05）。第三天的测试期结果,与模型组比较,野生对照组小鼠对新物体的偏好指数显着增高,差异有统计学意义（P<0.01）,且巴戟甲素高剂量组小鼠对新物体的偏好指数也较模型组增高,差异有统计学意义（P<0.05）。2.巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中Aβ代谢的影响荧光定量PCR法检测结果显示,巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中APP和PS1基因水平的影响并不显着,差异无统计学意义（P>0.05）。Western Blot检测结果显示,巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中APP和PS1蛋白水平的影响并不显着,差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中与Aβ生成相关蛋白BACE1的蛋白水平显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中与A β降解相关蛋白NEP和IDE的蛋白水平升高,差异有统计学意义（P<0.01,P<0.01）。ELISA检测结果显示,与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中A β 1-42含量显着减少,差异有统计学意义（P<0.01）。硫黄素S染色法检测结果显示,与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中老年斑数量显着减少,差异有统计学意义（P<0.01）。3.巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中神经营养因子表达水平的影响Western Blot检测结果显示,与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中神经营养因子BDNF和NGF的蛋白水平升高,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。4.巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中神经炎症因子表达水平的影响Western Blot检测结果显示,与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中核转录因子NF-κ B的表达水平显着降低,差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中神经炎症因子TNF-α、IL-1 β的表达水平显着降低,差异有统计学意义（P<0.01,P<0.01）。5.巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中突触结构稳定性的影响Western Blot检测结果显示,与模型组比较,巴戟甲素高剂量组小鼠脑中SYN、PSD-93和PSD-95等与突触结构相关的蛋白水平均升高,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01,P<0.05）。结论:两个行为学试验结果均表明,巴戟甲素能够一定程度上改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力。生化指标检测及病理学染色结果表明,巴戟甲素可能通过调控APP/PS1双转基因小鼠脑中A β代谢、神经营养因子水平、神经炎症因子表达以及维持突触结构的稳定性,发挥保护中枢神经系统的作用。巴戟甲素有希望成为防治中枢神经系统退行性疾病的新策略。然而,本研究的结果较为初步,更深入的作用机制原理仍有待进一步的研究。
揣国钢[6]（2010）在《开窍益智方对亚急性衰老小鼠学习记忆功能的影响》文中研究指明目的建立亚急性衰老小鼠模型,通过Y-型迷宫实验观察衰老小鼠学习记忆行为能力的改变,紫外分光光度法检测大脑和血清酶学变化,光学显微镜法观察衰老小鼠大脑海马组织形态结构的变化等手段,评价药膳-开窍益智方对亚急性衰老小鼠学习记忆功能、大脑和血清中相关物质的含量或活性以及大脑海马组织神经元细胞形态的改善作用,并探讨其可能的作用机理。方法选用4月龄ICR成年鼠78只。适应性饲养一周后,先用Y-型迷宫筛选,按90%区间淘汰7只,剩余71只随机分成6组,即空白对照组（10只）、模型对照组（11只）、阳性对照组（11只）、药膳组（低、中、高剂量组,各13只）。空白对照组与模型对照组每日上午以蒸馏水0.3mL/只灌胃；药膳组（低、中、高剂量组）每日上午分别灌服开窍益智汤0.1mL0.2mL、0.3mL/只；阳性对照组每日上午分别以003mg/mL的石杉碱甲（Huperzine A,SSJJ）0.4mg/kg灌胃,连续42天。空白对照组每日下午以0.86%的生理盐水0.2ml/只腹腔注射,其余各组以25mg/mL的D-半乳糖（D-galactose,D-gal）200mg/kg腹腔注射,同时以18.75mg/mL的三氯化铝（Aluminum chloride, AlCl3）150mg/kg灌胃,连续42天。各组（除空白对照组注射生理盐水外）于动物实验第36-42天进行的行为实验前20min腹腔注射氢溴酸东莨菪碱（Scopolamine,SCOP）2mg/kg,实验时用Y-型迷宫装置测试学习记忆能力。而后摘取小鼠眼球取血、分离血清；然后处死小鼠,分离脑组织,每组随机选取两只小鼠脑组织摘取其海马组织用福尔马林固定,其余脑组织用于制作10%脑组织匀浆。用紫外分光光度计法分别检测脑匀浆和血清的丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）和乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase,AchE）活性；海马组织石蜡包埋制作切片,光学显微镜下观察大脑海马区的神经元数目及形态结构变化。结果经实验证明：模型对照组小鼠完成学习所需要的次数显着增多、对信号判别正确反映率显着降低；大脑重量显着下降,脑组织总蛋白含量显着降低,脑匀浆和血清MDA含量显着增多、SOD活性显着下降、AchE活性显着升高；模型对照组小鼠大脑海马组织石蜡切片显示：海马组织轮廓模糊,神经元细胞分支减少,核仁浓缩变小,分叶不清,有断离,且有大量肿胀变性的神经元细胞,细胞排列松散,细胞间界限模糊。与模型对照组相比,开窍益智方高、中剂量组上述各项指标有极显着性差异（p<0.01）,且与药物剂量呈正相关；开窍益智方低剂量组与模型模型对照组比较有改善趋势,但差异无显着性（p>0.05）；模型对照组与空白对照组差异有极显着性（p<0.01）,与阳性对照组相比差异亦有显着性p<0.05)。与空白对照组相比,开窍益智方中剂量组与其最接近,差异无显着性（p>0.05）。结论（1）联合使用D-ga、AlCl3和SCOP可成功诱导复制出学习记忆功能障碍的衰老小鼠模型。（2）开窍益智方对衰老小鼠学习记忆功能具有改善或促进作用。（3）开窍益智方能降低AchE活性,该作用与改善记忆功能有关。（4）开窍益智方对衰老小鼠具有增强SOD活性、增强抗氧化损伤的活力。（5）开窍益智方可抑制衰老小鼠脂质过氧化产物的生成。（6）开窍益智方可减轻神经元细胞在衰老时的退行性改变,对神经元细胞具有保护作用。
任志丽[7]（2009）在《健脑软脉颗粒治疗老年性痴呆的药效学及机制研究》文中研究指明根据“肾虚髓亏为本,痰瘀阻滞为标,五脏失调,脑髓失用”为老年性痴呆的基本病机,四川省中医药研究院中医研究所一名老中医在几十年临床治疗体会中设计了以补肾健脑、活血化瘀,通络开窍药物为主的方剂—健脑软脉颗粒,治疗老年性痴呆（肾精亏虚,血瘀阻络型）。此方剂是该专家根据中医辨证及结合现代实验研究的基础上拟定的,经过10余年的临床观察,显示该方药在防治老年性痴呆方面,能改善肾虚血瘀的症状诸如学习记忆等认知方面均获较好的疗效。此方剂是在第一代药物健脑通脉胶囊的基础上加减变化而成,但较前者更重视配方,药味较前稍减,化瘀通络加强。目的：故本选题的目的是通过整体动物实验模型进行健脑软脉颗粒在防治AD方面的相应药效学观察,旨在研究探讨,并进一步阐述其作用机理,以期为临床的合理用药提供科学依据。方法：本次实验主要通过以下几个方面来观察该中药复方在防治老年性痴呆方面的药理作用。1)抗脑老化痴呆实验,给小鼠皮下注射D-半乳糖20周造成脑老化痴呆,运用跳台法、Morris水迷宫法,考察对小鼠学习记忆能力的影响并测定其血清、脑组织的SOD、胆碱酯酶活性以及MDA含量,探讨其疗效可能的生化机制。2)益智实验,通过在动物身上分别模拟记忆获得障碍、记忆巩固障碍、记忆再现障碍,考察其是否具有益智作用。3)活血化瘀作用：通过检测对小鼠出血、凝血时间的影响以及对角叉菜胶致小鼠尾部血栓形成的影响、对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响来考察其改善微循环之作用。4)耐缺氧实验,连续灌胃14天,设计常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒、断头致急性缺氧三个实验观察其对脑缺氧的保护作用。5)抗脑缺血实验,通过双侧结扎颈总动脉造成脑缺血模型,对脑指数以及脑含水量进行统计,并进行组织形态学观察。结果：与模型对照组相比,1)抗脑老化痴呆实验中,健脑软脉各剂量组小鼠在跳台法以及Morris水迷宫当中的学习及记忆能力均显着提高（P<0.01或P<0.05）。另外其血清及脑组织中SOD活性显着升高（P<0.01或P<0.05）,MDA含量显着降低（P<0.01或P<0.05）。胆碱酯酶活性低于模型组,但无统计学意义。2)益智实验,健脑软脉颗粒在三个记忆障碍实验中均能不同程度的提高小鼠的学习及记忆能力。3)活血化瘀作用,与空白对照组相比,健脑软脉颗粒各剂量组均有不同程度的延长出血、凝血时间的作用。与模型对照组相比,健脑各剂量组对角叉菜胶致小鼠尾部血栓的形成均有不同程度的抑制作用。对急性血瘀模型大鼠血液流变性有一定的改善作用。4)耐缺氧实验,与空白对照组相比,健脑软脉颗粒各剂量组均有不同程度的对抗脑缺氧作用。5)抗脑缺血实验,可见脑缺血模型组大鼠的脑含水量及脑指数明显高于假手术对照组,表明脑缺血后脑含水量增加,而不同剂量健脑软脉颗粒组都较脑缺血组的含水量及指数有显着减少。结论：健脑软脉颗粒确实对实验性老年性痴呆有一定的防治作用。可能与其抗氧化损伤机制有关,另外在脑缺血缺氧、微循环等方面也有一定的改善作用。
何松彬[8]（2008）在《血管性认知功能障碍的中药药理研究进展》文中指出随着痴呆研究的深入,血管性认知功能障碍（vascular cognitive impairment,VCI）引起人们的重视,国外学者主张用VCI代替血管性痴呆（vascular dementia,VD）。VCI由各种血管因素引起,血管因素主要指脑内血管,可以是这些血管本身的病变,也可以是颅外大血管及心脏病变间接影响脑内血流灌注;认知障碍则包括了各种水平的认知功能下降。VCI的应用有利于早诊断、早干预,避免漏诊。提出这个概念重点在于强调血管因素,发现可治疗的血管性原因和危险因素,有利于疾病的早期诊断和早期干预,以便早期进行一级预防和二级预防。
林海[9]（2005）在《参知健脑方对拟血管性痴呆大鼠的治疗作用及其对胆碱能系统的影响》文中指出血管性痴呆（VD）在我国由于脑血管病的多发而成为高发性疾病,是老年期痴呆的主要类型之一。现代医学在血管性痴呆病理及病理生理研究方面已取得了很大进展,并且从多角度、多层次对其进行了研究,而随着近年来中医药基础和临床研究的深入,中医药在本病的防治上日益显示出优势。 论文的综述部分从中医角度对 VD 病因病机、辨证分型及治疗等方面进行探讨,结合导师的临床经验,提出“正虚毒侵”为 VD 的病因病机;“扶正解毒”为其治则治法;参知健脑方的提出既符合痴呆现代药理学的研究,又是针对“正虚毒侵”的病因病机提出的“扶正解毒“治则治法的体现。从现代医学的角度,对 VD 发病的危险因素、病理变化、诊断治疗及胆碱能调控系统等方面进行研究,推论出胆碱能系统对 VD 的发生发展起重要作用;可以通过有效地消除危险因素,控制和改善心脑血管障碍,达到治疗和预防 VD 的目的。 实验研究分为以下四部分: 实验一、行为学实验 ①通过反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时腹腔注射硝普钠制造大鼠拟血管性痴呆模型,通过 Morris 水迷宫检验大鼠的学习、记忆功能,并反证模型的成功建立。②使用参知健脑方大、中、小剂量对拟血管性痴呆大鼠进行治疗,通过 Morris 水迷宫来探讨参知健脑方对拟血管性痴呆模型大鼠的作用机理,并确定最佳剂量。 实验二、病理学实验 ①通过制作假手术组、模型组、参知健脑方大、中、小剂量组和阳性药组大鼠脑组织的病理切片并使用 HE 染色来观察拟血管性痴呆造模后大鼠海马 CA1 区整体形态和细胞的变化,使用阳性药和参知健脑方大、中、小剂量治疗后大鼠海马 CA1 区的整体形态和细胞是否有所好转。②计数 HE 染色病理切片中 100μm2内各组大鼠脑组织切片海马 CA1区的细胞数,并进行比较。③通过制作假手术组、模型组、参知健脑方大、中、小剂量组和阳性药组大鼠脑组织的病理切片并使用尼氏体甲苯胺蓝染色来观察拟血管性痴呆造模后大鼠海马 CA1 区整体形态及细胞的变化,使用阳性药和参知健脑方大、中、小剂量治疗后大鼠海马 CA1 区整体形态及细胞是否有所好转。④计数尼氏体甲苯胺蓝染色病理切片中 100μm2内各组大鼠脑组织切片海马 CA1 区的细胞数,并进行比较。 实验三、胆碱能系统部分 ①通过病理学方法制作假手术组、模型组、参知健脑方中剂量组大鼠脑组织的病理切片,并使用免疫组化的方法观察胆碱乙酰转移酶（ChAT）在各组大鼠海马 CA1 区的表达情况。②通过病理学方法制作假手术组、模型组、参知健脑方中剂量组大鼠脑组织的病理切片并使用免疫组化的方法观察乙酰胆碱酯酶（AchE）在各组大鼠海马 CA1 区的表达情况。③通过高效液相电化学工作站检测假手术组、模型组、中剂量参知健脑方治疗组大鼠海马内乙酰胆碱含量的变化。④通过胆碱能系统变化进一步探讨血管性痴呆发生的病理机制及参知健脑方对其的治疗作用。进而进一步论治“正虚”的致病机理及“扶正”的治则治法。 2 参知健脑方对拟血管性痴呆大鼠的治疗作用及其对胆碱能系统的影响实验四、Bax 凋亡相关蛋白的测定通过病理学方法制作假手术组、模型组、参知健脑方中剂量组大鼠脑组织的病理切片并使用免疫组化的方法观察凋亡相关蛋白 Bax 在各组大鼠海马 CA1 区的表达情况并且探测其光密度情况和阳性细胞数。进而进一步论治“毒侵”的致病机理及“解毒”的治则治法。结果:拟血管性痴呆模型组大鼠与假手术组大鼠相比,模型组大鼠较学习、记忆能力有显着的降低,海马 CA1 区中段 100μm2内的的细胞数明显减少,海马 CA1 区的 ChAT和 AchE 表达明显的减少,Bax 表达明显增多,海马内 Ach 含量明显减少。阳性药和小剂量组大鼠与模型组比较没有十分明显的改观,大剂量组和中剂量组大鼠有明显恢复,尤其中剂量组大鼠恢复的最佳。结论:拟血管性痴呆模型大鼠的海马和胆碱能调控系统均受到了严重损害,这正符合我们认为血管性痴呆“正虚”的病因病机;同时,模型大鼠海马 CA1 区中段 Bax 的表达明显增加,而 Bax 能够促进凋亡,从另一角度说明血管性痴呆“毒侵”的病因病机。采用参知健脑方可以明显改善大鼠的学习、记忆行为,减轻海马 CA1 区神经细胞所受的损伤,上调模型大鼠海马 CA1 区 ChAT 和 AchE 的表达,下调模型大鼠海马 CA1 区 Bax的蛋白表达,增加拟血管性痴呆大鼠海马内 Ach 含量。说明参知健脑方通过改善拟血管性痴呆模型大鼠的胆碱能调控系统以及降低海马 CA1 区凋亡相关蛋白 Bax 的表达,达到“扶正解毒”的治疗目的。关键词:血管性痴呆、正虚、毒侵、扶正、解毒、参知健脑方
张玉苹[10]（2005）在《增智益寿胶囊改善记忆与延缓衰老的作用及机理的研究》文中进行了进一步梳理目的: 研究增智益寿胶囊（Capsule promoting memory and benefiting longevity CPMBL）对老年痴呆（AD）动物模型的影响及其机制,整理出一般药理学及毒理学结果。 方法: 1.制造学习记忆障碍模型:采用小鼠腹腔注射氢溴酸东莨菪碱、皮下注射亚硝酸钠、灌胃30%乙醇分别对记忆的三环节,获得、巩固、和再现进行阻断,制造记忆获得障碍、巩固障碍、再现障碍,并采用跳台实验、避暗穿梭实验观察CPMBL对记忆三个阶段的影响。 2.制造衰老模型:采用小鼠颈部皮下注射D—半乳糖120mg/kg6周,制造衰老模型诱导动物学习记忆障碍,每天同时将CPMBL按高、中、低剂量灌胃给衰老小鼠,六周后进行学习记忆能力的检测进行包括跳台实验、旷场实验、水迷宫实验,计算脑系数、脾系数、胸腺系数的变化,检测小鼠脑匀浆上清液中乙酰胆碱脂酶AchE、总蛋白含量、超氧化物歧化酶SOD、丙二醛MDA、单胺氧化酶MAO,脑内信息分子—氧化氮NO、钙离子Ca2+的变化,并观察脑组织病理形态学变化,以了解该方对学习记忆的影响及机理。 3.对该方进行急性毒理实验,测定人体对CPMBL的最大耐受量。 结果: 1.CPMBL对于记忆的三个阶段（获得、巩固、再现）有不同程度的保护作用,各剂量以高剂量效果为佳。 2.CPMBL能明显提高拟衰老模型小鼠的学习记忆能力、空间探索能力、方向辨别能力。并能提高拟衰老模型小鼠的脑指数、胸腺指数;降低脑组织中乙酰胆碱脂酶（AchE）活性、丙二醛（MDA）含量、单胺氧化酶（MAO）活性,升高脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力。给予CPMBL低（1.8g/kg）、中（3.6g/kg）、高剂量（7.2g/kg）后,AchE由模型组的1.00±0.31U/mgprot降低到0.95±0.43,0.50±0.31,0.47±0.21U/mgprot;MDA可由模型组的5.61±1.99nmol/mgprot降低到5.49±1.35,4.42±0.59,3.80±1.46nmol/mgprot,MAO由模型组的18.08±3.80U/h/mgprot降低到16.64±4.67,13.44±4.38,12.15±2.04U/h/mgprot,SOD由模型组的82.19±22.42U/mgprot升高到85.33±23.17,104.51±7.938,132.64±27.67U/mgprot。并且CPMBL对Ca2+、NO并无影响。各剂量中以高剂量效果为佳。 结果提示:CPMBL可能通过增强免疫系统免疫能力,提高机体抗氧化酶的活性,清除氧自由基,抑制胆碱脂酶合成,减少乙酰胆碱分解,提高乙酰胆碱水平,从而改善中枢神经系统的功能,改善学习记忆功能。 3.经预实验,给小鼠一次灌胃增智益寿胶囊最大浓度浓缩液0.4ml/10g均不引起死亡,限于给药的浓度和体积不能再增大,不能测出LD50,故进行最大耐受量的测定。小鼠灌胃给药的最大耐受量为83g/kg。相当于人用量的228倍。实验提示:该药急性毒性甚小,口服安全。
二、健脑合剂对小鼠急性脑缺氧的保护作用及学习记忆障碍的改善作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、健脑合剂对小鼠急性脑缺氧的保护作用及学习记忆障碍的改善作用（论文提纲范文）
（1）保健食品益智咀嚼片的开发与研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1 立题背景及研究意义 |
| 参考文献 |
| 2 本课题研究目的、研究思路、技术路线、研究内容和创新点 |
| 2.1 研究目的 |
| 2.2 研究思路 |
| 2.3 技术路线图 |
| 2.4 研究内容 |
| 2.5 创新点 |
| 第一章 益智咀嚼片处方研究 |
| 第一节 益智咀嚼片配方组成 |
| 第二节 益智咀嚼片改善记忆障碍的网络药理学研究 |
| 第三节 益智咀嚼片处方优选研究 |
| 第二章 益智咀嚼片制备工艺研究 |
| 第一节 提取工艺研究 |
| 第二节 成型工艺研究 |
| 第三章 益智咀嚼片改善记忆的功能学评价 |
| 第一节 益智咀嚼片改善小鼠记忆功能的研究 |
| 第四章 益智咀嚼片的毒理学安全性评价 |
| 第一节 急性毒性试验 |
| 第二节 30天喂养试验 |
| 第五章 益智咀嚼片质量标准研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法与结果 |
| 3 讨论与小结 |
| 4 益智咀嚼片的质量标准草案 |
| 总结与展望 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 Morris水迷宫的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）参知健脑方对拟血管性痴呆细胞模型的神经保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 参知健脑方各组分药物改善认知机制研究 |
| 1 人参 |
| 1.1 中医认识 |
| 1.2 化学成分 |
| 1.3 改善认知机制 |
| 2 知母 |
| 2.1 中医认识 |
| 2.2 化学成分 |
| 2.3 改善认知机制 |
| 3 赤芍 |
| 3.1 中医认识 |
| 3.2 化学成分 |
| 3.3 改善认知机制 |
| 参考文献 |
| 综述二 神经元突触囊泡内吞途径对神经系统疾病的影响 |
| 1 网格蛋白介导的内吞作用(CME)与神经系统疾病 |
| 1.1 网格蛋白包被组装 |
| 1.2 质膜内陷和凹窝形成 |
| 1.3 凹陷收缩和剪切 |
| 1.4 囊泡去包被 |
| 2 Kiss and run途径 |
| 3 不依赖网格蛋白的大量内吞作用(clathrin-independent bulk endocytosis,CIE) |
| 4 超速内吞作用 |
| 5 讨论与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一部分 基于网络药理学的参知健脑方治疗血管性痴呆机制研究 |
| 1 研究材料 |
| 1.1 数据库 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 参知健脑方入血活性化学成分的检索与筛选 |
| 2.2 参知健脑方药物成分-靶点、VD疾病-靶点及参知健脑方治病靶点的预测 |
| 2.3 参知健脑方活性成分-VD-靶点的网络构建 |
| 2.4 基因本体论(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 参知健脑方潜在入血活性化学成分的筛选结果 |
| 3.2 参知健脑方药物成分-靶点、VD疾病-靶点及参知健脑方治病靶点预测结果 |
| 3.3 参知健脑方-活性成分-VD靶点的网络构建 |
| 3.4 GO功能及KEGG通路富集分析结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中医药研究与网络药理学 |
| 4.2 参知健脑方的理法方药分析 |
| 4.3 参知健脑方的网络药理学分析 |
| 5 小结 |
| 第二部分 参知健脑方和谷氨酸干预浓度筛选及其对拟VD细胞模型增殖及毒性的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 主要实验药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备及耗材 |
| 1.4 主要试剂的配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 PC12细胞培养 |
| 2.2 谷氨酸诱导PC12细胞损伤的最适宜造模浓度筛选及参知健脑方低、中、高剂量适宜浓度筛选(CCK-8法) |
| 2.3 谷氨酸造模适宜浓度及干预药物适宜浓度的筛选验证(IncuCyte长时间动态活细胞成像及功能分析系统) |
| 2.4 谷氨酸诱导损伤PC12细胞模型的建立及分组给药 |
| 2.5 CCK-8法检测各组细胞增殖及毒性 |
| 2.6 IncuCyte长时间动态活细胞成像及功能分析系统检测各组细胞增殖及毒性2.7 CFSE细胞增殖实验 |
| 2.7 CFSE细胞增殖实验 |
| 2.8 统计学分析 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 生理状态下PC12细胞的形态学特征 |
| 3.2 不同浓度谷氨酸和参知健脑方溶液对PC12细胞增殖及毒性的影响 |
| 3.3 参知健脑方对拟VD细胞模型的增殖及毒性影响 |
| 3.4 CFSE细胞增殖实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 “毒损脑络”与VD |
| 4.2 “毒损脑络”的现代生物学内涵 |
| 4.3 “解毒通络”是治疗VD的重要法则 |
| 4.4 谷氨酸诱导损伤PC12细胞模型的建立 |
| 4.5 参知健脑方对谷氨酸损伤PC12细胞的增殖及毒性作用 |
| 5 小结 |
| 第三部分 参知健脑方对拟VD细胞模型周期、凋亡、钙离子浓度及活性氧的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 主要实验药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备及耗材 |
| 1.4 主要试剂的配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 PC12细胞培养 |
| 2.2 谷氨酸损伤的PC12细胞模型的建立及各组给药 |
| 2.3 流式细胞术检测PC12细胞周期 |
| 2.4 流式细胞术检测PC12细胞凋亡 |
| 2.5 高内涵细胞成像分析系统检测PC12细胞内游离钙离子浓度、活性氧及超氧化物的水平 |
| 2.6 qRT-PCR技术检测PC12细胞caspase-3 mRNA的相对表达水平 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 PC12细胞周期检测结果 |
| 3.2 PC12细胞凋亡检测结果 |
| 3.3 PC12细胞内游离钙离子浓度、活性氧及超氧化物的水平检测结果 |
| 3.4 参知健脑方对谷氨酸损伤PC12细胞caspase-3 mRNA表达水平的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 参知健脑方与谷氨酸损伤的PC12细胞周期阻滞 |
| 4.2 参知健脑方与谷氨酸损伤的PC12细胞凋亡 |
| 4.3 参知健脑方与谷氨酸诱导的PC12细胞内钙超载及氧化应激损伤 |
| 4.4 “解毒通络”法则的部分生物学内涵 |
| 5 小结 |
| 第四部分 参知健脑方对拟VD细胞模型clathrin介导的NMDA受体胞吞过程的作用机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 主要实验药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备及耗材 |
| 1.4 主要试剂的配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 细胞免疫荧光技术检测PC12细胞clathrin、RAB5B和NMDAR1的分布和表达水平 |
| 2.2 qRT-PCR检测PC12细胞clathrin mRNA和NMDAR1 mRNA的表达水平 |
| 2.3 Western Blot检测PC12细胞clathrin、RAB5B及NMDAR1的表达水平 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 PC12细胞的细胞免疫荧光检测结果 |
| 3.2 PC12细胞的qRT-PCR检测结果 |
| 3.3 PC12细胞的Western Blot检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 参知健脑方与clathrin介导的细胞内吞作用 |
| 4.2 参知健脑方与NMDA受体的内吞过程 |
| 4.3 “解毒通络”法则的部分生物学内涵 |
| 5 小结 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试剂与药材 |
| 1.3 仪器与耗材 |
| 1.4 溶液配制 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 动物分组、饲养、造模及用药 |
| 2.2 制备中药复方制剂 |
| 2.3 取材 |
| 2.4 制备脑组织冰冻切片 |
| 2.5 Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力检测 |
| 2.6 ELISA法检测各组大鼠血清皮质酮(GC)含量 |
| 2.7 免疫荧光法检测各组大鼠海马GR分子伴侣蛋白Fkbp5蛋白表达 |
| 2.8 免疫组化法检测各组大鼠海马GR分子伴侣蛋白Fkbp4蛋白表达 |
| 2.9 免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜(CLSM)技术检测各组大鼠Hdac2、MeCP2蛋白在大脑海马神经细胞核内的共定位情况 |
| 2.10 Western blotting法检测各组大鼠海马组织GR调控回路蛋白GR Fkbp5、Fkbp4、Dynein IC2,表观遗传修饰酶Dnmt1、Dnmt3a、Hat1、Hdac2蛋白,乙酰化修饰组蛋白H4K12Ac、H4K5Ac,学习记忆相关蛋白Nptx2、Syn-1、Homer1的表达 |
| 2.11 F-Q-RT-PCR法检测各组大鼠海马组织GR调控回路基因GR、Fkbp5 mRNA,表观遗传修饰酶基因Dnmt1、Dnmt3a、Hat1、Hdac2 mRNA,学习记忆相关基因Nptx2、Syn-1、Homer1 mRNA的表达 |
| 2.12 Q-RT-PCR法检测各组大鼠海马组织miR-124a和miR-511的表达 |
| 2.13 数据统计分析方法 |
| 结果 |
| 1.各组大鼠学习记忆能力的变化 |
| 2.各组大鼠血清皮质酮(GC)含量变化 |
| 3.各组大鼠大脑海马分区和皮层Fkbp5蛋白的表达变化 |
| 4.各组大鼠大脑海马分区Fkbp4蛋白的表达变化 |
| 5.各组大鼠大脑海马分区GR、Fkbp5、Fkbp4和Dynein IC2蛋白与GR、Fkbp5 mRNA的表达变化 |
| 5.1 海马组织总GR蛋白、细胞浆GR蛋白与细胞核GR蛋白的变化 |
| 5.2 海马组织Fkbp5、Fkbp4和Dynein IC2蛋白表达的变化 |
| 5.3 海马组织GR和Fkbp5 mRNA的表达变化 |
| 6.各组大鼠大脑海马分区miR-124a和miR-511 的表达变化 |
| 7.各组大鼠Hdac2和MeCP2在大脑海马神经细胞核内的共定位情况 |
| 8.各组大鼠海马组织表观遗传修饰酶蛋白及其mRNA的表达变化 |
| 8.1 海马组织表观遗传修饰酶蛋白的表达变化 |
| 8.2 海马组织表观遗传修饰酶mRNA的表达变化 |
| 9.各组大鼠海马组织乙酰化修饰组蛋白的表达变化 |
| 10.各组大鼠大脑海马组织学习记忆相关基因mRNA及其蛋白表达变化 |
| 10.1 大脑海马组织学习记忆相关蛋白的表达变化 |
| 10.2 大脑海马组织学习记忆相关基因mRNA的表达变化 |
| 讨论 |
| 1. 老年大鼠学习记忆能力的变化及各类药物的干预作用 |
| 2. 各组大鼠大脑海马神经细胞miR-FKBP5-GR调控回路的变化 |
| 2.1 糖皮质激素及其受体(GC-GR)的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.2 Fkbp5/Fkbp4/动力蛋白调控GR入核的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.3 miRNA调控GR的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.4 小结 |
| 3. 表观遗传修饰与学习记忆调节的衰老性变化 |
| 3.1 DNA甲基化修饰与学习记忆的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 3.2 组蛋白乙酰化修饰与学习记忆衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 3.3 小结 |
| 4. 中医对增龄性学习记忆能力减退的认识与经典方剂的使用 |
| 4.1 增龄性学习记忆减退的病因病机 |
| 4.2 数据发掘临床治疗增龄性学习记忆减退常用方药的使用规律 |
| 4.3 左归丸与益气聪明汤治疗增龄性学习记忆退化的理论依据 |
| 4.4 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录一:技术路线图 |
| 附录二:文献综述一 表观遗传修饰变化与学习记忆关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录三:文献综述二 分子伴侣蛋白Fkbp5对GC-GR调控学习记忆相关基因表达的影响 |
| 参考文献 |
| 附录四:已发表文章 |
| 附录五:在读期间参加学术会议情况 |
| 附录六:其他 |
（4）核桃肽改善睡眠剥夺诱导大鼠记忆障碍及其对PC12细胞神经保护作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 记忆及记忆损伤机理的研究现状 |
| 1.2.1 记忆的形成 |
| 1.2.2 记忆损伤与睡眠剥夺 |
| 1.2.3 记忆损伤的发生机制 |
| 1.3 改善记忆的研究现状 |
| 1.3.1 改善记忆肽的研究进展 |
| 1.3.2 改善记忆肽的活性评价方法 |
| 1.3.3 改善记忆肽的分离鉴定 |
| 1.4 核桃原料资源开发与利用的现状 |
| 1.4.1 核桃概述 |
| 1.4.2 核桃蛋白生物活性肽的研究现状 |
| 1.5 本论文的立题依据及主要研究内容 |
| 1.5.1 本论文研究的立题依据 |
| 1.5.2 主要研究内容 |
| 参考文献 |
| 第二章 核桃肽对睡眠剥夺诱导大鼠记忆障碍的改善作用 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与仪器 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.2.3 仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 核桃蛋白粉基本成分分析 |
| 2.3.3 睡眠剥夺模型的建立 |
| 2.3.4 实验动物 |
| 2.3.5 动物分组及给药 |
| 2.3.6 Morris水迷宫实验 |
| 2.3.7 脑组织中生化指标的测定 |
| 2.3.8 数据处理 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 核桃蛋白粉的基本成分测定 |
| 2.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 核桃蛋白改善记忆肽的分离鉴定及活性验证 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与仪器 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 主要试剂 |
| 3.2.3 仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.2 核桃蛋白肽的分离纯化 |
| 3.3.3 核桃蛋白肽的结构鉴定 |
| 3.3.4 PC12细胞培养 |
| 3.3.5 细胞消化及传代 |
| 3.3.6 细胞冻存 |
| 3.3.7 细胞复苏 |
| 3.3.8 细胞计数 |
| 3.3.9 PC12细胞损伤模型的建立 |
| 3.3.10 MTT法检测细胞存活率 |
| 3.3.11 数据分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 核桃蛋白肽的分离纯化 |
| 3.4.2 核桃肽的序列鉴定 |
| 3.4.3 核桃肽对谷氨酸损伤PC12细胞存活率的影响 |
| 3.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 核桃肽对PC12细胞氧化损伤的保护作用及机制探讨 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与仪器设备 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 主要试剂 |
| 4.2.3 主要仪器设备 |
| 4.3 实验分析方法 |
| 4.3.1 PC12细胞培养 |
| 4.3.2 细胞消化及传代 |
| 4.3.3 PC12细胞损伤模型的建立 |
| 4.3.4 细胞外乳酸脱氢酶(LDH)含量检测 |
| 4.3.5 超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)及丙二醛(MDA)水平测定 |
| 4.3.6 细胞内活性氧(ROS)检测 |
| 4.3.7 细胞内钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)测定 |
| 4.3.8 线粒体膜电位(ΔΨm)测定 |
| 4.3.9 Western blotting检测细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达量变化 |
| 4.3.10 ABTS测定 |
| 4.3.11 数据处理 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 GGW,VYY和LLPF对LDH释放的影响 |
| 4.4.2 GGW,VYY和LLPF对ABTS自由基清除的影响 |
| 4.4.3 GGW,VYY和LLPF对细胞内ROS和MDA含量,SOD活性以及GSH-px活性的影响 |
| 4.4.4 GGW,VYY和LLPF对细胞内Ca~(2+)含量及线粒体膜电位(MMP)的影响 |
| 4.4.5 GGW,VYY和LLPF对细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达量的影响 |
| 4.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 结论与展望 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 附件 |
（5）巴戟甲素改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 老年性痴呆的研究背景 |
| 第二节 中医药对老年性痴呆的研究概述 |
| 一、中医对老年性痴呆的认识 |
| 二、中医对老年性痴呆病因病机的认识 |
| 三、中医对老年性痴呆的辨证论治 |
| 第三节 现代医学对老年性痴呆的流行病学及发病机制研究 |
| 一、关于老年性痴呆的流行病学调查研究 |
| 二、老年性痴呆发病机制的相关研究 |
| 第四节 老年性痴呆与神经营养因子的相关研究 |
| 第五节 老年性痴呆与突触结构稳定性的相关研究 |
| 第六节 巴戟天药理作用的研究近况 |
| 一、调节免疫功能 |
| 二、抗衰老及抗疲劳作用 |
| 第七节 巴戟甲素神经保护作用的相关研究 |
| 第八节 老年性痴呆动物模型的研究概况 |
| 一、转基因模型 |
| 二、tau蛋白病理模型 |
| 三、快速老化模型 |
| 四、β淀粉样蛋白沉淀模型 |
| 五、鹅膏蕈氨酸注射模型 |
| 六、胆碱能系统损伤模型 |
| 七、D-半乳糖(D-galactose,D-gal)损害动物模型 |
| 第二章 实验部分 |
| 第一节 巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响 |
| 一、实验仪器及材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第二节 巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中Aβ代谢的影响 |
| 一、实验仪器及材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第三节 巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中神经营养因子的影响 |
| 一、实验仪器及材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第四节 巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中神经炎症因子的影响 |
| 一、实验仪器及材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第五节 巴戟甲素对APP/PS1双转基因小鼠脑中突触结构的影响 |
| 一、实验仪器及材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 结语 |
| 一、实验总结 |
| 二、创新之处 |
| 三、研究展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1: 英文缩写简表 |
| 附录2: 博士期间发表论文、参与课题及获奖情况 |
| 附件 |
| 致谢 |
（6）开窍益智方对亚急性衰老小鼠学习记忆功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 缩略词表 |
| 第一部分 ：文献综述 传统医学对老年痴呆的研究 |
| 1 中医古籍对老年痴呆症病因病机的论述 |
| 1.1 肾精亏少,不能濡养大脑,脑髓渐空以致神机失用 |
| 1.2 心脾两虚,气血亏损,精气不能上荣于脑,影响学习记忆功能 |
| 1.3 因七情内伤；或因外伤,气滞血瘀；或病久气血亏损,血不养气,气不行血,气滞血瘀,使脏腑生化之气血不能充养元神之府,引起学习记忆能力减退 |
| 1.4 肝郁阻脾或胃衰土亏,土不制水,脾失运化,水湿内停,变生痰邪,痰湿上蒙清窍,下阻清阳；清阳不能荣于脑,发为呆病 |
| 2 中医文献对益智中药的相关论述 |
| 3 中医文献对老年痴呆治疗方的论述 |
| 4 中药及复方对改善记忆的论述 |
| 4.1 单味中药改善记忆的论述 |
| 4.2 益智复方的实验研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分：实验研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物及试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 药物配制 |
| 2.2 动物分组及给药 |
| 2.3 Y-型迷宫行为实验 |
| 2.3.1 原理 |
| 2.3.2 动物的筛选 |
| 2.3.3 学习训练 |
| 2.3.4 迷宫测试 |
| 2.3.5 正确判断 |
| 2.4 制作海马组织切片 |
| 2.5 制备脑组织匀浆 |
| 2.6 酶学检测 |
| 2.6.1 考马斯亮蓝法测总蛋白含最 |
| 2.6.2 分光光度法测T-SOD活性 |
| 2.6.3 分光光度法测MDA含量 |
| 2.6.4 分光光度法测AchE活性 |
| 2.7 石蜡切片 |
| 2.7.1 石蜡切片的制作步骤 |
| 2.7.2 石蜡切片的HE染色方法 |
| 3 统计学处理 |
| 实验结果 |
| 1 开窍益智方对衰老小鼠体重的影响 |
| 2 开窍益智方对衰老小鼠学习记忆能力的影响 |
| 2.1 小鼠学习完成所需训练次数的改变 |
| 2.2 小鼠对信号方位辨别学习能力的改变 |
| 3 开窍益智方对衰老小鼠大脑重量的影响 |
| 4 开窍益智方对衰老小鼠大脑总蛋白含量的影响 |
| 5 开窍益智方对衰老小鼠大脑匀浆酶学指标的影响 |
| 6 开窍益智方对衰老小鼠血清酶学指标的影响 |
| 7 开窍益智方对衰老小鼠光镜下海马组织神经元形态学变化 |
| 讨论 |
| 1 老年人学习记忆功能减退的中医学理论 |
| 1.1 学习记忆与肾虚的关系 |
| 1.2 学习记忆与痰凝血瘀的关系 |
| 2 老年人学习记忆功能减退机制现代医学理论 |
| 2.1 学习记忆与脑内相关结构之间的关系 |
| 2.2 衰老、学习记忆与自由基的关系 |
| 2.3 胆碱能神经功能与学习记忆之间的关系 |
| 2.4 学习记忆的分子机制 |
| 3 开窍益智方的功效与方义分析 |
| 3.1 远志 |
| 3.2 石菖蒲 |
| 3.3 龙眼肉 |
| 4 衰老实验动物模型的评价 |
| 4.1 AD动物模型运用现状 |
| 4.2 D-gal、AlCl_3与东莨菪碱(SCOP)联合诱导的AD动物模型 |
| 5 治疗老年痴呆药物的评价 |
| 5.1 用于治疗老年痴呆药物概况 |
| 5.2 石杉碱甲治疗老年痴呆现状 |
| 6 开窍益智方延缓衰老以及提高记忆力机制探讨 |
| 6.1 开窍益智方提高SOD活性作用机制的探讨 |
| 6.2 开窍益智方降低MDA含量作用机制的探讨 |
| 6.3 开窍益智方降低AchE活性作用机制的探讨 |
| 7 下一步的研究设想 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分：附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（7）健脑软脉颗粒治疗老年性痴呆的药效学及机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 1.引言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 立题依据 |
| 2.正文 |
| 第一部分 健脑软脉颗粒抗脑老化痴呆实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验环境 |
| 3 统计学方法 |
| 4 实验方法和结果 |
| 4.1 对脑老化痴呆小鼠学习记忆能力的影响 |
| 4.2 对脑老化痴呆小鼠血清及脑组织AchE、SOD、MDA的影响 |
| 第二部分 健脑软脉颗粒对小鼠记忆获得、巩固、再现障碍的改善作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验环境 |
| 3 统计学方法 |
| 4 实验方法和结果 |
| 4.1 健脑软脉颗粒对小鼠记忆获得障碍的影响 |
| 4.2 记忆巩固障碍实验 |
| 4.3 记忆再现障碍实验 |
| 第三部分 活血化瘀作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验环境 |
| 3 统计学方法 |
| 4 实验方法和结果 |
| 4.1 对小鼠出血、凝血时间的影响 |
| 4.2 对角叉菜胶致小鼠尾部血栓形成的影响 |
| 4.3 健脑软脉颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响 |
| 第四部分 耐缺氧实验 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验环境 |
| 3 统计学方法 |
| 4 实验方法和结果 |
| 4.1 小鼠常压耐缺氧实验 |
| 4.2 小鼠亚硝酸钠中毒实验 |
| 4.3 小鼠断头致急性缺氧实验 |
| 第五部分 抗脑缺血作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验环境 |
| 3 统计学方法 |
| 4 实验方法和结果 |
| 3.讨论 |
| 3.1 本次课题小结 |
| 3.2 动物模型及其评价 |
| 3.3 阳性药物的选择 |
| 3.4 检测指标的选择 |
| 3.5 三者的"有机结合" |
| 4.参考文献 |
| 5.致谢 |
| 6.在读期间公开发表的论文和科研成果 |
（9）参知健脑方对拟血管性痴呆大鼠的治疗作用及其对胆碱能系统的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略语中英文对照 |
| 血管性痴呆（VD）病因病机、诊断、治疗的研究进展 |
| 1 中医学对VD 的认识 |
| 1.1 古代文献对V D 的认识 |
| 1.2 病名和诊断标准的确定 |
| 1.3 对病因病机的认识 |
| 1.4 辨证分型 |
| 1.5 辨证论治 |
| 2 中药人参、知母用于痴呆的现代研究 |
| 2.1 人参用于痴呆的现代研究 |
| 2.2 知母用于痴呆的现代研究 |
| 3 现代医学对VD 的认识 |
| 3.1 流行病学研究 |
| 3.2 危险因素的研究 |
| 3.3 病理变化 |
| 3.4 诊断标准 |
| 3.5 预防和治疗 |
| 4 VD 对胆碱能调控系统的影响 |
| 4.1 胆碱能系统的生理功能 |
| 4.2 VD 对脑内胆碱能神经递质的影响 |
| 4.3 VD 对脑内胆碱能神经递质受体的影响 |
| 4.4 脑内突触超微结构与功能改变与VD 的关系 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 实验一 行为学实验 |
| 1 材料及方法 |
| 2 一般状况及大体行为观察 |
| 3 各组大鼠逃避潜伏期的比较 |
| 4 各组大鼠空间探索实验120 秒内第一象限游泳时间的比较 |
| 5 各组大鼠空间探索实验120 秒内第一象限游泳距离的比较 |
| 6 分析大鼠在 120s 内搜索平台的路线图 |
| 7 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 病理学实验 |
| 1 材料及方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 胆碱能系统部分 |
| 第一部分 ChAT 和AchE 的检测 |
| 1 材料及方法 |
| 2 结果 |
| 第二部分 乙酰胆碱的检测 |
| 1 材料及方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 Bax 凋亡相关蛋白的测定 |
| 1 材料及方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）增智益寿胶囊改善记忆与延缓衰老的作用及机理的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表(Abbreviations) |
| 前言 |
| 上篇 文献综述 |
| 文献综述一传统医学对老年痴呆的研究 |
| 一、中医文献对老年痴呆病因病机的论述 |
| 二、中医文献对益智中药的相关论述 |
| 三、中医文献对老年痴呆治疗方的论述 |
| 四、中药及复方对改善记忆的论述 |
| 五、增智益寿胶囊设计思路和特色 |
| 文献综述二现代医学对老年痴呆的研究 |
| 一、现代医学对记忆机理的探讨 |
| 二、现代医学对老年痴呆的治疗概况 |
| 下篇 实验部分 |
| 第一部分 增智益寿胶囊对小鼠记忆三个阶段的影响 |
| (一) 材料和方法 |
| (二) 实验结果 |
| (三) 讨论 |
| 第二部分 增智益寿胶囊对拟衰老模型小鼠的益智作用及机理探讨 |
| (一) 材料和方法 |
| (二) 实验结果 |
| 附图 |
| (三) 讨论 |
| 第三部分 “增智益寿胶囊”最大耐受量的测定 |
| (一) 材料和方法 |
| (二) 实验结果 |
| 小结 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、健脑合剂对小鼠急性脑缺氧的保护作用及学习记忆障碍的改善作用（论文参考文献）
- [1]保健食品益智咀嚼片的开发与研究[D]. 王双. 山西中医药大学, 2021(09)
- [2]参知健脑方对拟血管性痴呆细胞模型的神经保护作用及机制研究[D]. 田丹枫. 北京中医药大学, 2020(04)
- [3]基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用[D]. 王璐. 上海中医药大学, 2019(02)
- [4]核桃肽改善睡眠剥夺诱导大鼠记忆障碍及其对PC12细胞神经保护作用机制研究[D]. 王曙光. 华南理工大学, 2019(01)
- [5]巴戟甲素改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力及其机制研究[D]. 蔡浩斌. 广州中医药大学, 2017(05)
- [6]开窍益智方对亚急性衰老小鼠学习记忆功能的影响[D]. 揣国钢. 扬州大学, 2010(05)
- [7]健脑软脉颗粒治疗老年性痴呆的药效学及机制研究[D]. 任志丽. 成都中医药大学, 2009(S1)
- [8]血管性认知功能障碍的中药药理研究进展[A]. 何松彬. 浙江省中西医结合学会神经内科专业委员会第六次学术年会暨国家级继续教育学习班资料汇编, 2008
- [9]参知健脑方对拟血管性痴呆大鼠的治疗作用及其对胆碱能系统的影响[D]. 林海. 北京中医药大学, 2005(04)
- [10]增智益寿胶囊改善记忆与延缓衰老的作用及机理的研究[D]. 张玉苹. 北京中医药大学, 2005(04)