多烯紫杉醇对人肝癌细胞系HepG2蛋白质组影响的体外实验研究

论文摘要

肝癌（Human hepatocellular careinoma，HCC）是全世界死亡率很高的疾病，手术切除是肝癌的首选治疗方法，但许多病例为多中心发生，极易发生早期播散和转移等复杂病情限制了手术切除的应用。肝癌对现有药物全身化疗的效果较差，因此寻找新的有效的化学治疗药物对提高晚期和复发肝癌病人的生存率具有重大意义。多烯紫杉醇是由浆果紫杉（Taxus baccata，European yew）针叶中提取的前体物，再经半合成的产物。结构与紫杉醇类似，抑制微管解聚的作用比紫杉醇更强。多烯紫杉醇用于乳腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、软组织肉瘤、头颈癌、胃癌、卵巢癌和前列腺癌等，单独用药和联合用药均有显著疗效。蛋白质组学作为后基因组学时代研究的一个重要内容，已广泛深入到生命科学和医药学的各个领域，其理论和技术的发展完善为肿瘤研究带来了新的思维方式和研究领域，它不仅可以从组织或细胞蛋白质整体水平这一全新角度来研究肿瘤发病机理，而且能寻找用于肿瘤诊断和防治的生物标志物。蛋白质组学技术使得从整体上观察多烯紫杉醇对肝癌蛋白表达的影响成为可能。鉴定多烯紫杉醇作用相关蛋白质，有助于了解多烯紫杉醇治疗肝癌的作用模式，可望从中筛选出评价多烯紫杉醇疗效的特异蛋白质和新药开发的靶点。 研究目的 观察多烯紫杉醇的体外抗肝癌细胞HepG2的活性，通过比较多烯紫杉醇处理前后人肝癌细胞系HepG2蛋白质表达谱的变化，鉴定多烯紫杉醇作用于肝癌细胞的相关蛋白质，从蛋白质水平上对多烯紫杉醇抗肝癌机制作初步探讨。 研究方法 ①应用MTT比色观察多烯紫杉醇对肝癌细胞HepG2的生长抑制作用，通过统计分析确立多烯紫杉醇处理HepG2细胞的浓度。 ②进行分组观察：以确立浓度的多烯紫杉醇处理组为实验组；未加药物干预的HepG2为对照组。 ③利用固相pH梯度（Immobilized pH gradient，IPG）双向凝胶电泳（Two-dimensional electrophoresis，2-DE）分离实验组和对照组人肝癌细胞HepG2的总蛋白质，凝胶银染及考马斯亮蓝染显色，

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语
• 前言
• 第一章 多烯紫杉醇对人肝癌细胞系HepG2蛋白质双向电泳表达谱的影响
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二章 多烯紫杉醇作用人肝癌细胞系HepG2差异蛋白质点的指纹图谱分析
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述一
• 综述二
• 致谢
• 在读期间发表的论文