人血清高尔基体蛋白-73与HBV相关肝病的研究

论文摘要

肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma, HCC）在我国大多是在乙型肝炎病毒感染慢性化并伴随肝硬化的基础上发展而来。HCC恶性程度高,预后差,诊断时大多为晚期,若能做到早期诊断与治疗,可改善患者的预后。目前应用于HCC早期诊断与筛查的血清学指标为甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein, AFP）,而AFP敏感性约60%,诊断HCC易造成漏诊,找寻更好的HCC相关血清学指标仍有重要的临床意义。高尔基体蛋白-73（Golgi protein73, GP73）是新近发现的一种潜在的肝癌相关蛋白,引起了广泛关注,其在肝病患者血清中的表达水平被认为是增高的,而对于HCC的诊断价值还不能确定。研究目的：探讨GP73在不同HBV相关肝病患者、健康对照者及HBV感染后自愈者血清中的表达差异,并评估其在HCC的诊断与预后中所起到的作用。研究方法：收集慢乙肝患者（n=48）、肝硬化患者（n=106）、不典型增生患者（n=23）和HCC患者（n=208）等HBV相关肝病患者,HBV感染自愈者（n=21）及健康人群（n=73）共479人的919份血清标本,部分患者进行了动态观察。HCC手术患者中51例有术前术后血,其中20例有对应的两个月内门诊复查血,肝硬化患者、HCC非手术患者各有36例、70例进行动态观察,每例患者有2到6次住院期间血标本,间隔时间为3个月。采用ELISA方法检测以上血清中GP73水平,比较各组间GP73表达水平的差异,与相关临床指标相结合进行统计学分析以及结合HCC手术患者随访资料进行生存分析。研究结果：血清GP73水平在各实验组分别为：健康对照组42.71ng/ml（31.56-62.46）、乙肝自愈组36.79ng/ml（28.53-58.54）、慢乙肝组64.46ng/ml（44.72-117.29）、肝硬化组219.65ng/ml（143.46-297.11）、不典型增生组98.06ng/ml（61.04-189.10）和HCC治疗前组124.95ng/ml（78.53-219.17）。相对于乙肝自愈组和健康对照组,各肝病患者组GP73明显升高（P<0.01）；同时,肝硬化组GP73水平明显高于HCC患者治疗前组（P<0.01）、慢乙肝组（P<0.01）及不典型增生组（P<0.01）,HCC治疗前组显著高于慢乙肝组（P<0.01）。制作利用GP73诊断HBV相关肝病的ROC曲线,曲线下面积为：0.888（95%CI：0.858-0.917）,当cut-off值为85.20ng/ml时,敏感度：73.67%,特异度：95.74%。动态分析表明,HCC手术患者术后一天组[167.93ng/ml（92.69-269.45）]血清GP73水平显著高于术前组[106.51ng/ml（59.24-152.55）]（P<0.01）,且在术后两个月内有增高的趋势。在肝硬化组与HCC组中,血清GP73水平分别随肝功能Child-Pugh分级级别的升高而升高,同时在动态观察时与反映肝功能的指标如ALT、ASTm、TBIL、Child-Pugh分级呈正相关,与ALB呈负相关。HCC组患者血清GP73在肿瘤TNM Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的水平可见逐渐增高的趋势,Ⅲ期相对于Ⅰ期、Ⅱ期显著升高差异具有统计学意义（P<0.05）。应用GP73制作诊断HCC的ROC曲线,曲线下面积：0.447（95%CI：0.388-0.506）,cut-off值为98.19ng/ml时,敏感度为68.84%,特异度为39.69%。当采用AFP与GP73的比值（AFP/GP73）制作诊断HCC时,曲线下面积：0.868（95%CI：0.807-0.918）,cut-off值为0.12时,敏感度为77.97%,特异度为87.36%,优于单独应用AFP检测,后者曲线下面积：0.802（95%CI：0.751-0.853）,cut-off值为20ng/ml时,敏感度为65.12%,特异度为83.23%。行手术切除的HCC患者白手术日起进行随访,以随访患者中GP73的中位数108ng/ml为界分为高浓度组和低浓度组,制作Kaplan-Meier生存曲线及无瘤生存曲线,经Log-rank检验,两组的生存曲线P=0.441、无瘤生存曲线P=0.870,结果无统计学意义。研究结论：GP73存在于所有HBV相关肝病患者与健康人的血清中,在HBV相关肝病患者组血清GP73水平明显升高,血清GP73可以用于区分HBV相关肝病患者与健康人群。据本实验结果,GP73单独检测不适于诊断HCC,而且未发现其与HCC手术患者的预后评估存在关系。GP73联合AFP检测（AFP/GP73）,可以辅助AFP对HCC进行诊断。血清GP73的水平变化与肝功能状态有关,有可能成为一个评价肝功能的指标。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 1 对象和方法
• 1.1 实验对象
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 试剂盒质量分析
• 2.2 各组患者的GP73浓度分析
• 2.3 HBV相关肝病组与健康组ROC曲线
• 2.4 HCC与LC患者动态血清GP73水平变化
• 2.5 GP73水平与临床指标的关系
• 2.6 GP73对肝癌诊断的意义
• 2.7 GP73与HCC术后复发及生存期的关系
• 3 讨论
• 4 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 高尔基体蛋白-73在肝癌诊断中的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢