柴油废气颗粒的吸入对大鼠速发型哮喘反应的影响

论文摘要

目的:探讨空气污染物中柴油废气颗粒（diesel exhaust particle DEP）的吸入对大鼠速发型哮喘反应的影响。方法:选择Wistar雄性大鼠60只,随机分为六组,每组各10只,B组为哮喘模型组,利用新鲜配制卵清白蛋白（OVA）100mg+氢氧化铝100mg共1ml于第1,8,15天给予腹腔注射,第22天开始给予3%卵清白蛋白（OVA）+生理盐水溶液雾化吸入,每天一次,每次30min,连续7d。A组为正常对照组,以生理盐水代替卵清白蛋白分别进行腹腔注射和雾化吸入。C,D,E,F组于第一天开始用OVA攻击（方法与B组相同）,之后在给予吸入DEP200μg/ml+生理盐水溶液分别各1,2,3,4周,所有攻击结束一周后再给予3%卵清白蛋白气道激发30min。测定每只大鼠气道阻力（RL）的变化,观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中的炎症细胞的百分比和肺组织病理形态学的改变,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清中IgE的浓度和肺组织中的白介素-5（IL-5）和γ-干扰素（IFN-γ）水平的变化。结果:①A组大鼠未发生呼吸道高反应性,B、C、D、E、F组在吸入3%卵清白蛋白30min内的不同时间点（5min,10min,15min,20min,25min,30min）的气道阻力与A组比较差异均有统计学意义（F=160.646,F=148.901,F=146.644,F=162.204,F=160.935,F=156.186,P＜0.01）,B组与E、F组吸入3%卵清白蛋白30min内不同时间点（5min,10min,15min,20min,25min,30min）的气道阻力比较差异有统计学意义（P＜0.01）,吸入DEP组各组大鼠的气道阻力与与DEP吸入的时间有显著的相关性（r=0.948,P＜0.01）。②B组BALF中嗜酸性粒细胞占细胞总数的百分比（EOS%）较A组明显增高,与A组比较差异有统计学意义（F=23.240,P＜0.01）,B组BALF中嗜酸性粒细胞占细胞总数的百分比与C、D、E、F组比较差异有统计学意义（F=23.240,P＜0.01）,从DEP吸入1周（C组）开始以中性粒细胞为主浸润的炎症细胞明显增多,B组大鼠BALF中的中性粒细胞数占细胞总数的百分比与E、F组间比较差异有统计学意义（F=36.329,P＜0.01）。③B组大鼠的血清中IgE的浓度较A组的明显增加,与A组比较差异有统计学意义（F=2.490,P＜0.01）,B组大鼠的血清中IgE的浓度与C.D、E、F组间比较差异均无统计学意义（p＞0.05）。④肺组织病理切片中可以看到A组上皮细胞完整,气道周围未见炎症细胞的浸润,以纤毛柱状上皮细胞为主,仅有少量的杯状细胞,基底膜未见纤维化。实验组随着DEP的1,2,3,4周的吸入,逐渐出现上皮细胞的坏死、中断、脱落,杯状细胞增生,气道周围的炎症细胞的浸润及基底膜的纤维化等改变。⑤B组大鼠肺组织中IL-5的浓度与C、E组间比较差异有统计学意义（F=4.263,P＜0.01）,各组大鼠肺组织中IFN-γ的浓度之间比较差异均无统计学意义（F=1.193,P＞0.05）。结论:空气污染物中DEP的吸入可以加重大鼠速发型哮喘反应。

论文目录

• 前言
• 摘要
• Abstract
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 实验试剂
• 1.1.3 实验的主要仪器
• 1.2 实验设计和方法
• 1.2.1 哮喘模型建立,分组及处理
• 1.2.2 气道反应性的测定
• 1.2.3 血液,支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞计数及分类
• 1.2.4 肺组织病理标本的制备
• 1.2.5 肺组织中IL-5与IFN-Y的测定
• 1.3 统计学处理
• 第二章 结果
• 2.1 气道反应性
• 2.2 BALF中炎症细胞占细胞总数的百分比
• 2.3 血清中IgE浓度的变化
• 2.4 肺组织病理形态学的表现
• 2.5 附图
• 2.6 肺组织中IL-5和IFN-Y浓度的变化
• 第三章 讨论
• 3.1 支气管哮喘的概况及实验目的
• 3.2 DEP对哮喘大鼠气道反应性的影响
• 3.3 DEP对哮喘大鼠BALF和肺部病理学改变的影响
• 3.4 DEP对哮喘大鼠血清中IgE和肺组织中细胞因子的影响
• 第四章 结论
• 第五章 致谢
• 第六章 参考文献
• 第七章 综述
• 附录 攻读学位期间发表的学术论文目录