水通道蛋白4在大鼠蛛网膜下腔出血后脑水肿中的表达研究

论文摘要

【目的】自发性蛛网膜下腔出血(SAH)后,由于脑血管痉挛、颅内压升高等因素而使脑血流减少,脑缺血、缺氧后可通过不同机制导致脑水肿和神经元损伤,并由此造成患者永久性神经功能缺损乃至死亡。而目前人们对SAH后脑水肿的病理生理改变仍知之甚少。水通道蛋白是近年来发现的广泛存在于动植物细胞膜上的一组对水有特异通透性的膜蛋白,其中水通道蛋白4(AQP4)在脑组织中分布最广,可能是脑脊液重吸收、渗透压调节、脑水肿形成等生理、病理过程的分子生物学基础。因此,对其研究可为脑水肿及水代谢疾病提供分子水平的理论依据,同时为临床治疗脑水肿提供一种新途径。本实验通过建立了大鼠蛛网膜下腔出血模型,观察大鼠蛛网膜下腔出血后不同时间段内AQP4mRNA在大脑皮层、丘脑及海马的表达情况,以探讨AQP4在SAH后脑水肿中的变化规律及作用。 【方法】健康Wister大鼠62只,鼠龄3～4月,雌雄不拘,体重在250～300g,随机分成对照组、假手术组和SAH后第1h、8h、1d、2d、3d、5d、7d共7个时间点共9组,正常对照组和手术组每组各6只,假手术组共14只。蛛网膜下腔出血动物模型采用大鼠断尾取血,枕大池注入0.3ml自体血的方法建立。假手术组采用等容积生理盐水代替自体血注入正常大鼠枕大池内。采用原位杂交的方法来检测AQP4mRNA在各组大鼠大脑皮层、丘脑及海马的表达情况。 【结果】对照组和假手术组可见少量AQP4 mRNA表达阳性细胞,两者差异无显著性(P>0.05)。在蛛网膜下腔出血组,脑含水量与大脑皮质、丘脑、海马部位AQP4 mRNA的表达,在第8h后开始上升,2d达到高峰,一周后降低到正常水平,SAH后第8h、1d、2d、3d、5d与对照组和假手术组相比差别具有显著性意义(P<0.05),脑含水量和AQP4两者成正相关关系(r=0.9105～0.9457,P<0.01)。 【结论】大鼠蛛网膜下腔出血后脑水肿的程度与AQP4mRNA的表达成正比,这表明AQP4在蛛网膜下腔出血后脑水肿的病理生理中起着非常重要的作用。

论文目录

• 一、引言
• 二、材料与方法
• 1、实验动物与分组
• 2、药品及来源
• 3、主要仪器
• 4、主要溶液配制
• 5、实验方法
• 5.1 大鼠蛛网膜下腔出血模型的制备
• 5.2 标本采集和组织切片制备
• 5.3 大鼠脑片原位杂交
• 5.4 大鼠脑片HE染色
• 6、实验数据处理与统计分析
• 三、结果
• 四、讨论
• 五、小结
• 六、图表
• 七、曲线图
• 八、照片
• 九、参考文献
• 十、文献综述
• 十一、致谢
• 十二、声明