P物质预先给药对去甲肾上腺素诱导培养大鼠心肌细胞β1-受体表达的调节作用

论文摘要

目的观察P物质（Substance P,SP）与去甲肾上腺素（Norepinephrine,NE）单独作用对心肌细胞β1-受体（β1-R）表达的影响,以及SP预先给药对NE诱导的心肌细胞β1-R表达的影响。方法（1）心肌细胞的培养及鉴定。实验选用1-3 d龄的Sprague-Dawley（SD）大鼠建立新生大鼠心肌细胞体外培养模型,采用免疫细胞化学（IC）染色方法对心肌细胞进行鉴定。（2）观察不同浓度NE的作用。取15孔培养72h的心肌细胞随机分为对照组（不加药物干预）与NE组[分别给予NE(终浓度分别为10-9mol·L-1、10-8mol·L-1、10-7mol·L-1和10-6mol·L-1)干预],n=3。细胞培养基内分别加入NE共培3h后,采用IC染色方法测定心肌细胞内β1-R表达的变化。另外再取15孔培养的心肌细胞,分组与药物干预均同上,采用流式细胞术（FCM）测定心肌细胞β1-R的表达变化。（3）观察不同浓度SP的作用。实验选用6孔培养72h的心肌细胞随机分为2组（n=3）:正常对照组（不加药物干预）与实验组(给予终浓度为10-7mol·L-1SP干预)。SP作用3h后,采用IC染色方法测定心肌细胞内β1-R表达的变化。另外再取15孔培养的心肌细胞,随机分为对照组（不加药物干预）与SP组(分别给予10-9、10-8、10-7、10-6mol·L-1SP干预),n=3。细胞培养基内分别加入SP共培3h后,采用FCM测定心肌细胞β1-R表达的变化。（4）观察SP预先给药对NE作用的影响。实验选用12孔培养72h的心肌细胞随机分为4组（n=3）:对照组（不加药物干预）、10-7mol·L-1NE组、10-6mol·L-1SP+10-7mol·L-1NE组（给予SP 30 min后再加入NE）、NK-1受体拮抗剂（S3144）+10-6mol·L-1SP+10-7mol·L-1 NE组（给予S3144 30 min后加入SP,再培养30 min后加入NE）,n=3。采用FCM测定心肌细胞β1-R的表达变化。结果（1）成功建立大鼠心肌细胞体外培养模型。（2）IC与FCM结果均显示,与对照组比较,10-9、10-8、10-7、10-6mol·L-1NE组β1-R表达均上调,两种方法中,10-8mol·L-1（IC）与10-7mol·L-1（FCM）NE组β1-R表达上调最明显。（3）IC结果显示,SP组β1-R表达低于对照组（P＜0.05）。FCM结果显示,10-9、10-8、10-7、10-6mol·L-1SP组β1-R表达均低于对照组,除10-9mol·L-1SP组外,其余各组与对照组间的差异均有统计学意义（均P＜0.05）。（4）与对照组比较,NE组β1-R表达上调（P＜0.05）,SP+NE组β1-R表达无明显变化（P＞0.05）,S3144+SP+NE组β1-R表达上调但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论（1）NE可诱导体外培养的大鼠心肌细胞β1-R表达上调。（2）SP可诱导体外培养的大鼠心肌细胞β1-R表达下调。（3）SP预先干预可抑制NE引起的体外培养大鼠心肌细胞β1-R表达的上调,该作用可能部分由NK-1受体所介导。

论文目录

• 论文摘要
• 中文摘要
• 英文摘要
• 综述
• P物质的研究进展
• 1 SP的生物学特性
• 2 SP的主要生物学作用
• 3 SP与疾病
• 4 小结
• 实验研究
• 一 研究背景及主要研究内容
• 二 体外培养新生大鼠心肌细胞模型的建立
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 1-受体表达的影响'>三 NE对体外培养新生大鼠心肌细胞β₁-受体表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 1-受体表达的影响'>四 SP对体外培养新生大鼠心肌细胞β₁-受体表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 1-受体表达的影响'>五 SP预先给药对NE诱导体外培养新生大鼠心肌细胞β₁-受体表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 六 结论
• 参考文献
• 附图
• 个人简介
• 致谢