葛根素后处理对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

论文摘要

目的:本研究通过对比观察中药葛根素后处理与缺血后处理干预对在体大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤中心肌酶谱、光镜下形态、NF-κBp65与p50蛋白水平、MMP-2、TIMP-2 mRNA表达水平及MMP-2/TIMP-2mRNA比值的影响,初步探讨葛根素后处理保护心肌I/R损伤的可能性及可能机制。方法:建立大鼠在体心肌I/R损伤模型,以缺血（I）30min再灌注（R）30min为观察点,50只SD大鼠随机分为5组,每组10只:①假手术组（sham组）;②单纯缺血组（Ischemic组,I组）;③缺血再灌注损伤组（Ischemic Reperfusion Injury组,I/R组）;④缺血后处理组（Ischemic Postconditioning组,I-postC组）;⑤葛根素后处理组（Puerarin Postconditioning组,Pur组）。以血清心肌酶、心肌组织光镜下病理观察作为评价心肌I/R损伤严重程度的指标;采用蛋白免疫印迹法（western-blotting）检测心肌细胞核中NF-kBp65、p50蛋白水平;RT-PCR技术检测心肌组织中MMP-2、TIMP-2的mRNA表达水平。结果: 1.与sham组及I组相比,I/R组血清CK-MB及LDH明显升高（P<0.05）;HE染色光镜下心肌组织病理变化明显;心肌细胞核中NF-kBp65及p50蛋白水平明显升高（P<0.05）;心肌组织中MMP-2 mRNA表达水平明显升高而TIMP-2 mRNA表达水平则显著降低（P<0.05）;MMP-2/TIMP-2mRNA比值明显升高（P<0.05）;2.I-postC组及Pur组与I/R组相比,心肌损伤程度明显改善;NF-kBp65、p50蛋白水平均显著下降（P<0.05）;MMP-2 mRNA表达水平显著下降（P<0.05）而TIMP-2 mRNA表达水平则明显升高（P<0.05）;MMP-2/TIMP-2mRNA比值明显降低（P<0.05）;I-postC组与Pur组上述指标比较无显著统计学差异（P>0.05）。结论:1.大鼠心肌I/R损伤早期（I30min R30min时）心肌细胞损伤明显;NF-kBp65、p50蛋白水平及MMP-2mRNA表达水平明显增高,TIMP-2mRNA表达减少, MMP-2/TIMP-2比值升高。提示NF-κB、MMP-2及MMP-2/TIMP-2比值失衡参与了心肌I/R损伤过程的发生;2.类似于缺血后处理,葛根素后处理可明显减轻心肌缺血再灌注损伤;可明显下调NF-κBp65、p50蛋白水平及MMP-2mRNA表达水平,上调TIMP-2mRNA表达水平,调节MMP-2/TIMP-2比值趋于平衡。提示葛根素后处理可改善缺血再灌注心肌的损伤程度,并可通过抑制NF-κB的激活及调节MMP-2/TIMP-2比值平衡而保护I/R损伤的心肌组织。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 一、葛根素后处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌 NF-kBp65 与p50 蛋白水平的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 二、葛根素后处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌 MMP-2
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢