子宫内膜癌雌激素依赖型与非依赖型基因表达谱的初步研究

论文摘要

在美国，子宫内膜癌(endometrial carcinoma)是一种最常见的女性生殖系统恶性肿瘤，在所有的肿瘤中排名第四，仅次于乳腺癌、肺癌和大肠癌。2000年，美国大约新增36，100新病例，约有6，500死于这种疾病。我国子宫内膜癌也已成为女性最常见的恶性肿瘤之一。 一般认为，子宫内膜癌的发生与雌激素长期刺激有直接关系，是一种雌激素依赖性肿瘤，其发现较早，预后较好，5年生存率达70％左右。但在实际临床工作中发现：部分患者，尤其是绝经后患者，并无内源性或外源性高雌激素的表现，而且激素治疗效果不好，预后较差。 在20多年前，Bohkman就子宫内膜癌提出了二元模型，即子宫内膜癌Ⅰ型，(雌激素依赖型)和Ⅱ型(非雌激素依赖型)，现在已逐渐被人们所接受。子宫内膜癌Ⅰ型源自于持续暴露于雌激素的刺激。这种病人典型的发生于围绝经期，经常有一些危险因素，包括肥胖、糖尿病、高血压、高血脂及绝经较晚的妇女。持续的雌激素刺激可导致子宫内膜增生，最终可由不典型增生发展成为子宫内膜癌。该型肿瘤一般分化良好，肌层浸润少，预后较好，并有相对长期的生存。 而Ⅱ型子宫内膜癌，既没有内源性或外源性的雌激素的刺激，也没有明显确定的危险因素。这种病人一般发生在年龄较大的绝经后妇女，其手术标本癌旁子宫内膜萎缩。原发Ⅱ型子宫内膜癌是一种浆液性肿瘤，与卵巢癌非常相似。这类患者肌层浸润较深，淋巴结转移早，远处播散快，恶性度高，预后在所有的

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 临床资料分析
• 1.1 一般资料
• 1.2 临床合并症
• 1.3 病理分型及手术病理分期
• 1.4 子宫内膜癌组织雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）表达的测定
• 第二章 子宫内膜癌雌激素依赖型与非依赖型基因差异表达初步检测
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 组织标本
• 2.1.2 主要试剂／试剂盒
• 2.1.3 常用试剂配制
• 2.1.4 实验需用的仪器
• 2.1.5 实验数据分析用软件
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 以生物素为标记的Affymetrix基因芯片实验流程图谱
• 2.2.2 实验流程
• 2.2.3 具体操作步骤
• 2.3 实验结果及分析
• 2.3.1 子宫内膜癌标本总RNA提取与鉴定
• 2.3.2 芯片杂交结果
• 第三章 数据处理和生物信息学分析
• 3.1 应用GCOS（GeneChip Operating Software）软件进行数据分析
• 3.2 数据挖掘与生物信息分析
• 3.3 分析结果
• 3.3.1 GCOS软件进行数据分析部分示意图
• 3.3.2 子宫内膜癌Ⅰ型与Ⅱ型表达平均值比较散点图
• 3.3.3 Gostat分析
• 3.3.4 MILANO分析
• 第四章 半定量RT-PCR鉴定芯片结果
• 4.1 差异表达基因半定量RT-PCR
• 4.1.1 子宫内膜癌组织总RNA的提取
• 4.1.2 RNA中痕量DNA的去除
• 4.1.3 变性与退火
• 4.1.4 消化RNA
• 4.1.5 PCR反应
• 4.2 半定量RT-PCR结果分析
• 4.3 半定量RT-PCR验证结果
• 4.3.1 组织样品
• 4.3.2 总RNA提取图谱
• 4.3.3 半定量RT-PCR结果
• 4.3.4 基因芯片ratio值与半定量RT-PCR ratio值比较
• 第五章 讨论
• 参考文献
• 英语缩写注解
• 成果
• 致谢
• 原创性声明及版权使用授权说明