人胰腺癌Hedgehog信号转导途径膜蛋白受体PTCH重组蛋白的克隆、表达、多抗血清制备

人胰腺癌Hedgehog信号转导途径膜蛋白受体PTCH重组蛋白的克隆、表达、多抗血清制备

论文题目: 人胰腺癌Hedgehog信号转导途径膜蛋白受体PTCH重组蛋白的克隆、表达、多抗血清制备

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科学

作者: 邵建国

导师: 许国铭,李兆申,屠振兴

关键词: 胰腺癌,基因,载体构建,抗体

文献来源: 第二军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:克隆人胰腺癌Hedgehog信号通路中PTCH基因,构建表达载体并诱导融合蛋白表达,免疫家兔制备多抗血清,检测胰腺癌组织中PTCH的表达。方法:从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,RT-PCR扩增PTCH基因,纯化、回收后,将其插入表达载体PET22b,转化E.ColiBL21-CodonPlusTM-RP.构建重组质粒PTCH/PET22b,IPTG诱导表达,免疫印迹鉴定。融合蛋白免疫家兔制备多抗血清,免疫组化检测胰腺癌组织PTCH表达。结果:成功构建重组质粒PTCH/PET22b并诱导表达目的蛋白。PTCH多抗血清经Western免疫印迹鉴定。免疫组化检测胰腺癌标本其阳性率55%。结论:构建重组质粒PTCH/PET22b并成功表达;制备了PTCH多抗血清,为研究Hedgehog信号通路在胰腺癌中的发病机制提供了有效工具。

论文目录:

英文缩写

中文摘要

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前言

实验第一部分 Hedgehog信号通路PTCH目的基因表达载体的构建

材料与方法

结果

讨论

实验第二部分 PTCH目的基因的原核表达和纯化

材料与方法

结果

讨论

实验第三部分 抗人PTCH重组蛋白的多抗血清制备

材料与方法

结果

讨论

全文总结

综述一

综述二

附录

致谢

发布时间: 2005-07-19

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