论文摘要
背景与目的肾间质纤维化是慢性肾功能衰竭（CRF）的共同途径，而肾小管上皮细胞间充质细胞转化（epithelia-mesenchymal transition，EMT）则是肾间质纤维化的主要途径之一。国内外少量研究提示，褐藻多糖硫酸酯（fucoidan polysaccharide sulfate，FPS）在改善肾血流及减少尿蛋白等方面有一定作用，但对肾小管上皮细胞EMT的作用如何，尚未见报告。本研究旨在观察FPS对腺嘌呤致大鼠慢性肾衰模型的肾小管上皮细胞EMT以及肾间质纤维化的作用。方法将6周龄Wistar雄性大鼠随机分为3组，即：1．正常对照组（n=15），2．CRF模型组（n=24），3．CRF+FPS治疗组（n=24）。第1组进食普通饲料；第2组进食含0.75％腺嘌呤的饲料，持续喂养6周；第3组在进食含0.75％腺嘌呤饲料的同时每天给予FPS 200mg／kg体重灌胃，持续6周。分别于第2、4、6周末收集大鼠24小时尿液，留取血标本；并处死大鼠，留取肾组织。应用自动分析仪测定血肌酐、白蛋白和24小时尿蛋白；Masson染色切片分析肾间质纤维化程度；免疫组化方法半定量分析肾组织中α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E钙粘素（E-cadherin）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、转化生长因子（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）和血小板反应蛋白1（TSP-1）的表达；蛋白印迹法（Western Blot）检测肾皮质α-SMA，VEGF蛋白的表达强度；用逆转录酶PCR法（RT-PCR）检测肾皮质MCP-1、TGF-β1、TSP-1和VEGF的mRNA表达。结果（1）CRF+FPS治疗组大鼠2、4、6周末24小时尿蛋白均明显低于同期CRF模型组（P＜0.05）；但两组间血肌酐水平没有显著性差异（P＞0.05）。（2）CRF+FPS治疗组大鼠MASSON染色阳性面积百分比2、4、6周均明显低于同期CRF模型组（P＜0.01），肾间质纤维化程度明显减轻。（3）CRF+FPS治疗组肾组织α-SMA蛋白表达2、4、6周均明显低于同期CRF模型组（P＜0.05）。（4）CRF+FPS治疗组肾组织VEGF蛋白和mRNA表达2、4周明显高于同期CRF模型组（P＜0.05）。（5）CRF+FPS治疗组大鼠肾组织TSP-1蛋白表达2、4周时明显低于同期CRF模型组（P＜0.05），mRNA表达2周时明显低于同期CRF模型组（P＜0.05）。（6）CRF+FPS治疗组大鼠肾组织MCP-1表达2、4周均明显低于同期CRF模型组（P＜0.05）。（7）CRF+FPS治疗组大鼠肾组织免疫组化法TGF-β1表达2、4周时明显低于同期CRF模型组（P＜0.05），mRNA表达2周时明显低于同期CRF模型（P＜0.05）。结论FPS治疗可以减少腺嘌呤致肾衰大鼠的尿蛋白排泄，减轻肾间质纤维化程度；其机制可能与FPS抑制肾小管上皮细胞EMT，下调肾组织MCP-1、TGF-β1和TSP-1的表达及上调VEGF表达有关。
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标签：腺嘌呤论文; 慢性肾衰论文; 肾小管上皮细胞转化论文; 褐藻多糖硫酸酯论文;