论文摘要
目的研究Hedgehog （Hh）信号通路相关因子在舌癌细胞株TCA中的表达,探讨其对TCA细胞株增殖和迁移的影响。方法本研究用Hh信号通路抑制剂Cyclopamine处理TCA细胞后,采用MTT和划痕实验来检测细胞抑制率和迁移能力,利用RT-PCR法和Western-Blot方法检测Hh信号通路相关因子mRNA和蛋白表达。’结果MTT结果显示Cyclopamine对TCA细胞有抑制作用,且具有浓度依赖性。细胞划痕实验结果显示,在对照组中划痕间距随着时间的增加而减小,而Cyclopamine药物组的愈合时间较长。加药24h后RT-PCR结果显示,Ptch基因在Cyclopamine药物组中的表达低于对照组,20μM Cyclopamine和101μMCyclopamine药物组中表达明显低于5μM Cyclopamine药物组。Smo基因在药物组中的表达低于对照组,且随着药物组浓度增高表达降低。加药48h后结果显示,Ptch基因在Cyclopamine药物组中的表达低于对照组。Smo基因在药物组中的表达低于对照组,且随着药物组浓度增高表达降低。Gli1基因在对照组中的表达高于药物组。加药后72h结果Ptch基因在Cyclopamine药物组中的表达低于对照组,在各药物组间无明显差异。加Cyclopamine24h后Western Blot结果显示,Ptch蛋白在药物组中的表达低于对照组,随着浓度的增高表达降低。Smo蛋白在药物组中的表达低于对照组,10μM Cyclopamine药物组表达低于20μM Cyclopamine药物组。48h结果显示Ptch蛋白和Smo蛋白在Cyclopamine药物组中的表达低于对照组,10μM Cyclopamine药物组中的表达高于其他Cyclopamine药物组。72h结果显示Smo蛋白在Cyclopamine药物组中的表达低于对照组,随着浓度增高蛋白表达降低。结论Hh信号通路特异性抑制剂Cyclopamine可以抑制TCA的生长,并可能降低其迁移能力,降低Smo mRNA和蛋白的表达。Hh信号通路可能在舌癌的发生、发展中起重要作用。