论文题目: 机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞的影响
论文类型: 博士论文
论文专业: 眼科学
作者: 侯旭
导师: 惠延年,韩泉洪
关键词: 牵拉,磁珠,视网膜色素上皮细胞,丝裂素活化蛋白激酶,钙离子,增生,移行,基质金属蛋白酶
文献来源: 第四军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 研究背景和目的 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是发生于视网膜脱离后的一种并发症,是导致视网膜脱离手术失败的重要原因。PVR是视网膜脱离后视网膜色素上皮细胞(RPE)损伤的一种自我修复过程,是一种过度的眼内创伤修复反应。RPE细胞是参与PVR的主要细胞,在正常位置上处于静止状态,而在某些病理条件下,如视网膜裂孔形成和视网膜脱离后,RPE细胞脱离原位,开始去分化、移行、增生、发生表型转化,并分泌多种的炎性因子和细胞因子,多种因素在病变的发展过程中发挥不同的作用。从而形成一个连续的变化。有关RPE细胞的生长调控机制仍有许多细节不明。RPE的损伤修复应该是这个过程起始的主要环节。既往的研究多是对培养细胞的观察,而针对视网膜脱离和PVR形成过程中RPE生物力学因素及损伤因素的考虑较少。 视网膜色素上皮层位于视网膜神经感觉层和Bruch膜之间,作为血一视网膜屏障的重要组成部分,发挥着重要的生理作用,许多眼内疾病的发生都与之相关。机械力是普遍存在于生物体内的一种现象,在生理或者病理状态下,视网膜色素上皮层会暴露在不同来源的力作用下,来源于玻璃体和增生膜的牵拉是常见的因素之一。在孔源性视网膜脱离形成时,色素上皮层会直接暴露,受到视网膜感觉层的牵拉和液化玻璃体的冲击,当眼球运动时,承受的拉力可能更加明显。眼内增生膜的收缩也
论文目录:
缩略语表
中文摘要
Abstract
前言
文献回顾
1 培养人视网膜色素上皮细胞机械牵拉模型的建立和观察
1.1 材料和方法
1.1.1 主要试剂
1.1.2 主要仪器
1.1.3 细胞培养
1.1.4 磁珠包被
1.1.5 细胞爬片的制备
1.1.6 细胞包被
1.1.7 磁珠结合率分析
1.1.8 扫描电镜观察
1.1.9 细胞机械牵拉模型
1.2 结果
1.2.1 细胞爬片
1.2.2 磁珠结合率
1.2.3 扫描电镜
1.2.4 机械牵拉模型
1.3 讨论
2 机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞移行和增生的影响
2.1 材料和方法
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要仪器
2.1.3 细胞移行实验
2.1.4 细胞增生实验
2.1.5 统计分析
2.2 结果
2.2.1 机械牵拉对RPE移行的影响
2.2.2 去炎松对RPE移行的抑制
2.2.3 机械牵拉对RPE增生的影响
2.2.4 去炎松对RPE增生的抑制
2.3 讨论
3 机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞基质金属蛋白酶表达的影响
3.1 材料和方法
3.1.1 主要试剂
3.1.2 主要仪器
3.1.3 实验分组
3.1.4 细胞准备
3.1.5 RT-PCR
3.1.6 Western blot
3.1.7 ELISA
3.2 结果
3.2.1 RT-PCR
3.2.2 Western blot
3.2.3 ELISA
3.3 讨论
4 机械牵拉对培养人视网膜色素上皮细胞内钙离子和丝裂素活化蛋白激酶信号转导通路影响
4.1 材料和方法
4.1.1 主要试剂
4.1.2 主要仪器
4.1.3 钙离子测定
4.1.4 MAPK的检测
4.1.5 活化型p38的表达
4.1.6 统计学处理
4.2 结果
4.2.1 机械牵拉和MnCl_2对钙离子的作用
4.2.2 EGTA预处理对钙离子的影响
4.2.3 细胞松弛素D预处理对钙离子的影响
4.2.4 MAPK的变化
4.2.5 SB203580对p38活化的影响
4.2.6 活化型p38的表达
4.3 讨论
小结
参考文献
附录
附图
个人简历
攻读学位期间的研究成果
志谢
发布时间: 2005-07-19
参考文献
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