论文摘要
玫瑰花是我国传统药材之一,《本草纲目拾遗》载:“玫瑰花活血、行血、健脾降火、理气调经、滋补养颜”,其养颜美容的功效被广泛接受。原花青素是具有极强抗氧化能力的多酚类物质,药理作用广泛,目前国外已制成多种药品、保健品、化妆品上市,是一种很有开发前途的天然抗氧化剂。本文主要研究玫瑰花中原花青素的提取及纯化工艺,并建立玫瑰花原花青素中单体和二聚体的HPLC分析方法,最后对玫瑰花原花青素的抗氧化能力进行评价。本论文首先采用微波法从玫瑰花中提取原花青素,通过单因素实验考察了微波反应时间、反应次数和料液比对提取率的影响,最终确定提取条件为:60%乙醇为溶剂,料液比1:20,微波功率5.00V,微波反应时间20min,反应次数为1次,原花青素的提取率达到1.59%。并将微波法与传统溶剂浸提法进行了对比,结果表明微波法下原花青素的提取率高于溶剂浸提法。继而采用大孔吸附树脂柱进一步纯化初提液,首先通过静态实验从五种树脂（D101、D1300、NKA,AB-8和NKA-Ⅱ）中筛选出适合纯化原花青素的树脂型号,以饱和吸附量和解吸率为指标综合考虑,结果显示:D101型树脂综合性能最好,其静态饱和吸附量为9.3mg/g湿树脂,解吸率为77.20%。论文进一步通过正交实验考察了纯化工艺参数,包括上样浓度、上样pH、洗脱液浓度、洗脱流速四个因素,以原花青素纯度和回收率为指标,极差分析和方差分析结果表明:上样pH是影响最显著的因素,最优纯化工艺条件为:上样浓度为1.25mg/ml,上样pH为2,洗脱液浓度为70%,洗脱流速为2ml/min。本文还对树脂纯化过程的动力学特征进行了初步探索,绘制了渗漏及洗脱曲线,并用数学方法将渗漏曲线拟合为(y=1.18(e0.31x-e-0.79x)),由此方程积分可得出树脂的动态饱和吸附量即最大上样浓度。论文进一步建立了玫瑰花原花青素中单体及二聚体的HPLC分析方法,具体色谱条件为:分析柱:Eslipse XDB-C18,4.6mm×150mm,5μm;流动相:A:乙腈,B:1.0%冰醋酸（pH=2.71）;洗脱梯度:0-10min:5-10%A;10-100min:10-25%A;流速:1.0ml/min;检测波长:280nm;柱温:30℃;进样量:20μl。在此条件下,四种物质（儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和原花青素B2）的分离度、方法的线性、精密度和加样回收率均符合要求。定量分析结果显示:原花青素B2的含量最高,达2.54%,表儿茶素含量为0.612%,表儿茶素没食子酸酯含量为0.257%。论文最后将纯化得到的玫瑰花原花青素产品进行抗氧化活性研究,采用DPPH法测定其抗氧化能力,以维生素C为对照,实验测得原花青素对[DPPH·]的半抑制量EC50=0.053mg/ml,维生素C对[DPPH·]的半抑制量EC50=0.066mg/ml,结果表明:原花青素的抗氧化能力强于维生素C。