论文摘要
目的:建立糖尿病谷氨酸脱羧酶(GAD65)反应性T细胞ELISPOT检测的优化方案。 方法:选取经典T1DM(T1A)患者、特发T1DM(T1B)患者及健康对照者(Control)各2例,2型糖尿病(T2DM)患者3例;连续梯度离心分离外周单个核细胞(PBMC);参照U-CyTech公司(荷兰)的ELISPOT标准方案冻存、复苏PBMC及斑点检测,包括分泌IFN-γ的Th1斑点(IFN-γ-Th1)及分泌IL-4的Th2斑点(IL-4-Th2);观察不同孵育法、孵育时间、刺激抗原、细胞数及新鲜或冻存细胞等对斑点的影响,并对其进行重复性评价。 结果:①直接法与预育法检测IFN-γ-Th1、IL-4-Th2斑点无显著差异(P>0.05),但直接法较为简便;②5μg/ml T cell-GAD65刺激36h为最佳浓度及孵育时间;③3.5×105/100μl/孔的PBMC细胞浓度所形成IFN-γ-Th1与IL-4-Th2斑点数较多;④T cell-GAD65刺激所得的IFN-γ-Th1斑点数明显高于同浓度(5 μg/ml)及20μg/ml非专用于T细胞检测的重组蛋白GAD(P<0.05);⑤按程序冻存及复苏的PBMC与新鲜分离的PBMC所形成的IFN-γ-Th1及IL-4-Th2斑点数无差别
论文目录
相关论文文献
- [1].GAD:基于拓扑感知的时间序列异常检测[J]. 通信学报 2020(06)
- [2].利用米糠外添GAD制备γ-氨基丁酸的工艺条件优化[J]. 北方水稻 2013(01)
- [3].携带人类GAD_(67)基因真核表达载体的构建及转染骨髓基质细胞[J]. 神经损伤与功能重建 2011(04)
- [4].喹硫平辅助治疗症状控制不佳GAD的疗效观察[J]. 国际精神病学杂志 2016(04)
- [5].GAD基因修饰神经干细胞在创伤性颅脑损伤大鼠中的作用[J]. 浙江医学 2013(09)
- [6].雌二醇与姜黄素单用或联用对海人酸杏仁核点燃大鼠海马GAD_(67)表达的影响[J]. 复旦学报(医学版) 2010(04)
- [7].gad企业总部大楼结构设计[J]. 建筑结构 2017(19)
- [8].猪脂联素球状结构域gAd基因在乳酸乳球菌中的表达[J]. 畜牧兽医学报 2012(03)
- [9].籼稻GAD基因的克隆、序列分析及其植物表达载体构建[J]. 南方农业学报 2012(08)
- [10].GAD_(65)基因转染神经干细胞的实验研究[J]. 中国临床神经外科杂志 2009(04)
- [11].猪脂联素球状结构域gAd蛋白在重组乳酸乳球菌中表达条件的优化[J]. 食品与发酵工业 2013(06)
- [12].广泛性焦虑症(GAD)患者应用苯二氮芯卓类药物的比较分析[J]. 中国医院药学杂志 2012(06)
- [13].gAd对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖分解代谢关键酶表达的影响[J]. 生物医学工程与临床 2013(01)
- [14].GAD建筑事务所与切尔西工作室联合设计与纽约城市环境相适应的公园[J]. 风景园林 2018(05)
- [15].成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者抑郁症与其GAD抗体的关系[J]. 中国卫生检验杂志 2015(20)
- [16].羟基马桑毒素及其衍生物对粘虫体内GAD和GABA-T活性的影响[J]. 西北林学院学报 2011(05)
- [17].体外切割损伤脊髓神经元对其Fos、ChAT及GAD表达的影响[J]. 神经解剖学杂志 2010(05)
- [18].孟凡浩/gad·line+studio[J]. 建筑技艺 2020(02)
- [19].异丙酚诱导GAD_(67)-GFP基因敲入小鼠意识消失过程中GABA能神经元的活化[J]. 神经解剖学杂志 2009(04)
- [20].新型双功能融合蛋白GAD的PEG-马来酰亚胺修饰及其性质研究[J]. 中国药科大学学报 2017(03)
- [21].Fmr1基因敲除小鼠耳蜗GAD的表达[J]. 解剖学研究 2012(01)
- [22].GAD_(65)基因修饰的神经干细胞移植治疗癫痫的实验研究[J]. 激光杂志 2011(02)
- [23].沙苑子对运动大鼠海马GAD_(67)、GABA-T、SSADH酶基因表达的调控研究[J]. 山东体育科技 2017(01)
- [24].茶树谷氨酸脱羧酶基因(GAD)的原核表达及酶活快速检测[J]. 安徽农业大学学报 2018(01)
- [25].小白菜GAD基因克隆及高氮条件下外源GABA的诱导表达分析[J]. 农业生物技术学报 2017(08)
- [26].血清ICA、GAD测定在鉴别糖尿病中的临床意义[J]. 中国药物经济学 2013(S2)
- [27].芜青中谷氨酸脱羧酶(Gad)酶性质的时空差异[J]. 四川大学学报(自然科学版) 2017(06)
- [28].Fmr1基因敲除小鼠的被动回避行为及海马GAD的表达变化[J]. 临床医学工程 2012(08)
- [29].建筑师应该少一些自我表达——访gad建筑设计(杭州)合伙人/设计总监孟凡浩[J]. 新建筑 2017(04)
- [30].2型糖尿病口服耐药者血清GAD抗体的检测及意义[J]. 牡丹江医学院学报 2009(04)
标签:酶联免疫斑点试验论文; 细胞论文; 糖尿病论文; 细胞因子论文; 型糖尿病论文; 发病机制论文; 酶联免疫斑点论文; 胰岛自身抗体论文; 基因型论文; 分型论文; 二羟维生素论文; 平衡论文; 细胞凋亡论文;