论文摘要
缺血再灌注后神经细胞死亡有坏死和凋亡两种形式。其中缺血中心区主要以细胞坏死为主,是不可逆的,缺血半暗带区主要以凋亡为主,如能及时恢复血液循环则凋亡是可逆的,所以缺血半暗带是目前缺血性脑血管病的研究热点。虽然这一区域脑组织暂时丧失了生理机能,但细胞形态的完整性未受到破坏,仍存在生机,并可诱发细胞产生系列反应,部分表现这一区域的生物信息发生改变,包括细胞的凋亡,DNA的损伤,SOD活力,MDA水平及线粒体膜电位的改变。本文就上述几个指标在缺血再灌注后的变化情况做一探讨。研究目的:1.探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡,DNA损伤,SOD活力,MDA水平,线粒体膜电位及神经细胞凋亡的变化。2.探讨中药海风藤在缺血性脑损伤中对神经细胞凋亡的影响。研究方法:1.应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型。2.用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测局灶性脑缺血再灌注大鼠神经细胞DNA损伤。3.应用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥法检测SOD活力及MDA水平4.流式细胞技术分别观察神经细胞凋亡和线粒体膜电位的变化。5.根据传统中药炮制方法,将海风藤提取物制成浸膏,稀释后大鼠腹腔内注射,观察其对上述各指标的影响。研究结果:1.受损DNA解旋后释放出的小分子量的DNA片段,可以离开核DNA在凝胶分子中向阳极移动,形成彗星状图象。从6h至72hDNA损伤率明显升高。2.模型组SOD活力在24h和72h时与假手术组相比,明显降低;而MDA水平明显升高。3与假手术组相比,模型组神经细胞凋亡率明显升高;伴随线粒体膜电位下降。4.海风藤干预后,缺血半暗带内神经细胞凋亡率,DNA损伤程度及SOD活力下降程度明显减轻;MDA水平的上升也得到有效控制,同时进一步稳定了线粒体膜电位。研究结论:海风藤具有抑制脑缺血后氧化应激反应、以及抗脑缺血后神经细胞DNA损伤,减少细胞凋亡,稳定线粒体膜电位,发挥缺血性脑损伤的保护作用。
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