秋水仙素对红檵木离体材料生长发育的影响及其玻璃化现象研究

论文摘要

红檵木（Loropetalum chinense var.rubrum）又称红桎木、红花檵木、红檵花,系金缕梅科（Hamamelidaceae）、金缕梅亚科、橙木属,常绿灌木或小乔木。花叶俱美、季相变化明显,为湖南特有的珍稀观赏树种。本研究采用浸渍法和混培法,研究不同浓度、不同时间秋水仙素处理下的红檵木茎尖、愈伤组织和丛生芽,通过其致死率、褐化率分析秋水仙素对各材料生长发育的影响。针对这一过程中组培苗出现的玻璃化问题,首次对红檵木玻璃苗的形态结构、生理变化及玻璃化影响因素进行了研究,旨在解决组织培养过程中的玻璃化问题,为红檵木规模化生产提供参考,为秋水仙素诱导变异材料的保存提供基础。本试验主要结果如下:1.经秋水仙素处理,发生异常现象的茎尖表现为裂叶、生长缓慢、玻璃化现象;愈伤组织易褐化,浸渍法处理的愈伤组织出现糊状;丛生芽则矮化、茎干增粗、叶片增厚。2.为了降低致死率、玻璃化率,又能达到一定的变异效果,最佳材料为丛生芽,选择0.005～0.02%秋水仙素混培法处理10～20d为宜。3.红檵木玻璃苗呈两种形态:一是纤细伸长型,表现为茎节纤细、叶突然明显地生长,长度约为正常叶片的2～3倍;二是莲座叶丛状,表现为节间很短或几乎没有节间,矮化巨大,叶片脆弱易破碎。4.以正常苗为对照,制作石蜡切片进行显微观察,结果表明:玻璃苗叶表皮细胞、海绵组织排列松散,局部出现细胞不连续,甚至出现组织空洞:叶脉维管束排列疏松,叶脉内径张大。5.玻璃苗生理指标的变化为:叶绿素总量、花色素苷含量较正常苗低,含水量、SOD、POD较正常苗增高。6.6-BA、NAA、琼脂、活性碳、聚乙烯丙醇显著影响玻璃苗的产生。考虑到玻璃化率与增殖率的平衡,6-BA浓度应控制在0.5～1.0mg·L-1范围内,NAA浓度为0.1～0.5 mg·L-1;琼脂浓度为1.2%;添加0.1%的活性碳或1g·L-1的聚乙烯醇能有效降低玻璃化率:2%～6%浓度的蔗糖对玻璃化的影响不显著。正交实验中的最优培养基为:MS+6-BA1.0 mg·L-1+蔗糖3%+琼脂1.2%+活性碳0.1%或聚乙烯醇1g·L-1。7.外植体的来源对试管苗玻璃化几率影响如下:茎尖＞中部节段＞基部节段;继代次数与玻璃化率呈正相关,减少继代次数,可降低玻璃化的产生。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1 红檵木研究进展
• 2 秋水仙素在观赏植物多倍体育种中的应用研究进展
• 3 观赏植物试管苗玻璃化现象研究进展
• 4 本研究的目的和意义
• 第二章 秋水仙素对红檵木离体培养材料生长发育的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 主要药品及试剂
• 1.3 试验方法
• 1.3.1 材料的获得
• 1.3.2 秋水仙素处理茎尖
• 1.3.3 秋水仙素处理愈伤组织
• 1.3.4 秋水仙素处理丛生芽
• 1.3.5 变异植株的筛选
• 1.3.6 红檵木试管苗玻璃化现象研究
• 2 结果与分析
• 2.1 秋水仙素对茎尖生长发育的影响
• 2.1.1 浸渍法对红檵木茎尖致死率的影响
• 2.1.2 混培法对红檵木茎尖致死率的影响
• 2.1.3 浸渍法与混培法对红檵木茎尖生长发育的影响
• 2.2 秋水仙素对愈伤组织生长发育的影响
• 2.2.1 浸渍法与混培法对红檵木愈伤组织生长发育的影响
• 2.2.2 浸渍法对红檵木愈伤组织褐化率的影响
• 2.2.3 混培法对红檵木愈伤组织褐化率的影响
• 2.3 混培法对红檵木丛生芽致死率、增殖系数的影响
• 2.4 红檵木试管苗玻璃化现象研究
• 2.4.1 红檵木玻璃苗的形态解剖学观察和生理生化测定
• 2.4.2 红檵木试管苗玻璃化影响因素的研究
• 3 小节与讨论
• 3.1 秋水仙素对离体培养材料生长发育的影响
• 3.2 秋水仙素与致死率、褐化率
• 3.3 离体培养材料与处理方法
• 3.4 红檵木试管苗玻璃化现象研究
• 3.4.1 红檵木玻璃苗形态解剖结构
• 3.4.2 红檵木正常苗与玻璃苗的生理生化变化
• 3.4.3 红檵木试管苗玻璃化的影响因素
• 3.5 秋水仙素与玻璃化现象
• 第三章 全文总结、创新点及展望
• 1 结论
• 1.1 秋水仙素对红檵木离体培养材料生长发育的影响
• 1.2 红檵木试管苗玻璃化现象研究
• 2 创新点
• 3 问题与展望
• 参考文献
• 附图
• 常用缩写词表
• 致谢
• 作者简介