壳聚糖抑菌与抗疲劳作用的研究

壳聚糖抑菌与抗疲劳作用的研究

论文题目: 壳聚糖抑菌与抗疲劳作用的研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 食品科学

作者: 高献礼

导师: 刘安军

关键词: 壳聚糖,羧甲基壳聚糖,血糖,乳酸,糖原

文献来源: 天津科技大学

发表年度: 2005

论文摘要: 壳聚糖是一种广谱抑菌剂,能有效抑制细菌和真菌的生长。此外,与一般抑菌剂相比,它具有抑菌活性强、广谱、杀灭率高及对哺乳动物细胞毒性低等优点。因此,壳聚糖作为一种天然防腐剂具有广阔的应用前景,但壳聚糖仅溶解于酸性溶液,而难溶解于pH>6.5的溶液和绝大多数有机溶剂中,这极大地限制了壳聚糖的应用。为了提高壳聚糖的溶解性本实验制备了N,O-羧甲基壳聚糖;并分别用H2O2法和纤维素酶法降解壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖制备了分子量不同的壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖。 大肠杆菌(G-)和金黄色葡萄球菌(G+)均为常见的致病微生物,是食品加工、储存与运输过程中主要致病微生物源。本文用光密度法(OD)和杯碟法分别测定了浓度、分子量、脱乙酰度、取代度、pH、温度、盐和培养基形态等因素对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用的影响;并得出壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖的最佳抑菌条件。 随着人们对多糖研究的不断深入,其抗疲劳作用日益受到重视。有关壳聚糖抗疲劳研究的相关报道较少。本实验用脱乙酰度为92.8%、相对分子质量分别为2.4×103Da和7.6×104Da的两种壳聚糖为实验材料,按不同剂量喂养,通过对小鼠负重游泳时间、血糖、血乳酸、肝糖原和肌糖原测定,初步探讨了它们对小鼠的抗疲劳作用。 本实验得到以下结果: (1)得出浓度、培养基形态、分子量、脱乙酰度、取代度、pH、温度、盐等因素对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌效果均有显著影响;试验结果显示分子量为1.0×10-5Da的壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌效果最佳。 (2)动物实验显示:不同分子量壳聚糖均能显著延长小鼠游泳时间、加速游泳后体内血糖恢复和乳酸清除、提高运动前后肝糖原和肌糖原含量。壳聚糖具有抗疲劳作用,且与壳聚糖的剂量和分子量有关;高剂量和低分子量壳聚糖显示了更优的抗疲劳效果。

论文目录:

摘要

Abstract

1.前言

1.1 壳聚糖

1.1.1 甲壳素和壳聚糖

1.1.2 甲壳素和壳聚糖的存在

1.1.3 甲壳素和壳聚糖的结构特征

1.1.4 甲壳素与壳聚糖的化学性质

1.1.4.1 0-酰化和N-酰化

1.1.4.2 含氧无机酸酯化

1.1.4.3 醚化

1.1.4.4 N-烷基化

1.1.4.5 其他反应

1.1.5 甲壳素和壳聚糖的应用

1.1.5.1 甲壳和壳聚糖及其衍生物在生化药物方面的应用

1.1.5.2 甲壳素和壳聚糖在生物技术方面的应用

1.1.5.3 甲壳素和壳聚糖及其衍生物在环境及环保方面的应用

1.2 研究内容和意义

1.3 本研究创新点

1.3.1 N,O-壳聚糖的降解、分离

1.3.2 壳聚糖存在最佳抑菌效果分子量段

1.3.3 初步证实了壳聚糖的抗疲劳作用与-NH_3~+的关系

2 材料与方法

2.1 实验原料

2.2 主要试剂

2.3 主要仪器

2.4 实验方法

2.4.1 壳聚糖理化性质的测定

2.4.1.1 水分的测定

2.4.1.2 脱乙酰度的测定

2.4.1.3 分子量的测定

2.4.2 壳聚糖羧甲基化反应原理及实验流程

2.4.2.1 壳聚糖羧甲基化反应原理

2.4.2.2 实验流程

2.4.3 N,O-羧甲基壳聚糖理化性质的测定

2.4.3.1 样品的紫外扫描

2.4.3.2 样品的红外扫描

2.4.3.3 取代度的测定

2.4.3.4 水溶性的测定

2.4.3.5 分子量的测定

2.4.4 壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖的降解

2.4.4.1 壳聚糖降解流程

2.4.4.2 N,O-羧甲基壳聚糖降解流程

2.4.4.3 壳聚糖降解产物部分理化性质的测定

2.4.4.4 N,O-羧甲基壳聚糖降解产物部分理化性质的测定

2.4.4.5 两种降解壳聚糖的红外扫描图

2.4.5 壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用的测定

2.4.5.1 浓度对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用影响的测定

2.4.5.2 培养基形态对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用影响的测定

2.4.5.3 分子量对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用影响的测定

2.4.5.4 脱乙酰度对壳聚糖抑菌作用影响的测定

2.4.5.5 取代度对N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用影响的测定

2.4.5.6 pH值对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用影响的测定

2.4.5.7 温度对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌率影响的测定

2.4.5.8 盐对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用影响的测定

2.4.6 壳聚糖抗疲劳作用的测定

2.4.6.1 试验用壳聚糖

2.4.6.2 受试动物分组及给药量和方式

2.4.6.3 游泳时间的测定

2.4.6.4 血糖和乳酸的测定

2.4.6.5 肝糖原和肌糖原的测定

2.4.6.6 交叉实验

2.4.6.7 小鼠肝、脾、肾的观察

2.4.6.8 骨强度的测定

3 结果与讨论

3.1 壳聚糖的部分理化性质

3.2 N,O-羧甲基壳聚糖的制备及鉴定

3.2.1 影响羧甲基壳聚糖取代度的因素

3.2.1.1 一氯乙酸用量的影响

3.2.1.2 NaOH用量的影响

3.2.1.3 反应时间的影响

3.2.1.4 反应温度的影响

3.2.2 壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖紫外和红外扫描结果

3.2.2.1 紫外扫描结果

3.2.2.2 红外扫描结果

3.3 壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖的降解

3.3.1 不同分子量段壳聚糖

3.3.2 不同分子量段N,O-羧甲基壳聚糖

3.3.3 两种分子量壳聚糖红外扫描结果

3.4 壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖的抑菌作用

3.4.1 浓度对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用的影响

3.4.2 培养基形态对壳聚糖抑菌作用的影响

3.4.3 分子量对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用的影响

3.4.4 脱乙酰度对壳聚糖抑菌作用的影响

3.4.5 取代度对N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用的影响

3.4.6 pH值对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用的影响

3.4.7 温度对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌率的影响

3.4.8 盐对壳聚糖和N,O-羧甲基壳聚糖抑菌作用的影响

3.5 壳聚糖的抗疲劳作用

3.5.1 壳聚糖对小鼠耐力的影响

3.5.2 壳聚糖对运动前后小鼠血糖和乳酸含量的影响

3.5.3 壳聚糖对运动前后小鼠肝糖原和肌糖原含量的影响

3.5.4 交叉实验结果

3.5.5 壳聚糖对小鼠肝、脾、肾的影响

3.5.6 壳聚糖对小鼠股骨强度的影响

4 结论

5 展望

6 参考文献

7 致谢

8 研究生期间发表文章

发布时间: 2007-01-10

参考文献

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