论文摘要
目的:探讨丹皮酚（Paconol,Pae）在体外对人大肠癌HT-29细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用及可能的作用机制,为寻求大肠癌治疗的新策略提供理论依据。 方法:应用MTT法（噻唑蓝比色试验）检测不同浓度的Pae和5-氟尿嘧啶（5-FU）、丝裂霉素（MMC）、顺铂（DDP）对体外培养的人大肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用,同时观察低浓度的Pae与化疗药物的协同作用。流式细胞仪技术测定Pae对HT-29细胞凋亡的诱导作用及细胞周期分布的影响;应用免疫细胞化学技术检測用药前后凋亡相关基因bcl-2、bax及p53表达的变化。 结果:HT-29细胞经Pac(浓度范围7.81～250mg/L作用后细胞生长明显受到抑制,呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系,最高抑制率为91.849%（P<<0.01）;低浓度的Pae（7.81mg/L）与化疗药物协同可产生较强的抑制细胞增殖作用,其中以与5-FU的协同作用最为显著。Pae在15.63mg/L、62.5mg/L、250mg/L3种浓度下作用48h均可诱导HT-29细胞凋亡,流式细胞仪技术检测其凋亡率分别为7.6%、16.2%、和34.5%,有明显的剂量效应关系,同时Pae使细胞周期分布发生明显变化,表现为S期细胞比例上升,G0/G1期和G2/M期细胞比例下降;免疫细胞化学结果显示Pae作用48h后HT-29细胞bcl-2及p53蛋白表达显著降低,bax蛋白表达无显著改变。 结论:Pae能抑制HT-29细胞增殖,呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系。Pae与细胞周期特异性化疗药联合使用具有协同抗肿瘤作用。Pae能诱导HT-29细胞凋亡,其作用机制可能与影响癌细胞的细胞周期、下调bcl-2/bax的比例及p53蛋白的表达有关。
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