紫茎泽兰主效抑芽活性物质的提取、分离及结构鉴定

论文摘要

紫茎泽兰属于菊科泽兰属,是一种具有很大潜在危害的入侵植物,大量研究结果表明,紫茎泽兰的提取物具有多重生物活性。课题组前期研究发现,紫茎泽兰对贮藏马铃薯具有抑芽保鲜,延长贮藏期的作用,且紫茎泽兰地上部的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物的毒性检测显示为低毒。本研究对紫茎泽兰中的抑芽活性物质进行了系统研究,确定了活性物质的提取工艺,建立了一套快速、高效的鉴定方法。借助理化检测、柱色谱、HPLC、 TLC、TOF-MS和NMR对紫茎泽兰的主效抑芽活性物质进行了分离、提取和结构鉴定。将采集到的紫茎泽兰地上部经阴干、粉碎后,用75%乙醇浸提获得紫茎泽兰地上部提取物,该提取物经液-液萃取、柱色谱、HPLC纯化,在提取、纯化过程中以油菜种子作为快速鉴定体系,分步检测活性,活性鉴定结果表明：主效活性物质为流分Fd6,并从该流分中鉴定了2种化合物单体,化合物1为5-咖啡酰奎尼酸,化合物2可能为6-甲氧基木犀草素,化合物3因为纯度不够无法进一步解析结构。研究发现该主效活性流分通过破坏细胞膜系统,影响胞内酶活性,从而延长种子萌发时间并影响幼苗发育。主效物质通过延迟种子发芽、降低发芽率和影响幼苗生长,显示出紫茎泽兰提取物具有开发成新型马铃薯抑芽剂的潜力。通过对这2种化合物单体近一步做功能分析和生物安全性检测,可开发环境友好型,对人体健康无害的新型抑芽剂。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 紫茎泽兰研究进展
• 1.1 外来入侵物种及其特点
• 1.2 紫茎泽兰及其危害
• 1.3 紫茎泽兰的防治
• 1.4 紫茎泽兰的开发利用
• 1.5 紫茎泽兰的化学成分
• 1.6 紫茎泽兰的生物活性
• 2 抑芽与抑芽剂
• 2.1 马铃薯贮藏与抑芽
• 2.2 烟草与抑芽
• 2.3 谷物穗发芽与抑芽
• 3 本研究的目的及意义
• 第二章 抑芽活性物质的筛选
• 1 实验材料及仪器
• 1.1 实验材料
• 1.2 主要实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 实验材料的预处理
• 2.2 提取方法及溶剂的选择
• 2.3 有效成分的粗提
• 2.4 活性鉴定方法
• 3 结果与分析
• 3.1 紫茎泽兰用不同溶剂的提取效率
• 3.2 提取物活性筛选结果
• 4 本章小结
• 第三章 抑芽活性物质的提取、分离及结构鉴定
• 1 实验材料及仪器
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 实验流程图
• 2.2 植物材料前处理
• 2.3 活性检测方法
• 2.4 液液萃取
• 2.5 大孔树脂柱层析
• 2.6 硅胶柱层析
• 2.7 sephadex LH20柱层析
• 2.8 薄层层析检测
• 2.9 高效液相色谱纯化
• 2.10 TOF-MS
• 2.11 NMR
• 3 实验结果与分析
• 3.1 液液萃取活性检测
• 3.2 大孔树脂层析活性检测
• 3.3 硅胶柱首次层析活性检测
• 3.4 硅胶柱再次层析活性检测
• 3.5 sephadex LH20层析活性检测
• 3.6 HPLC纯化结果
• 3.7 主效流分对种子萌发及幼苗生长的影响
• 3.8 TOF-MS及NMR检测结果
• 4 本章小结
• 第四章 主效流分对鉴定体系酶活性影响
• 1 过氧化物酶（POD）活性测定
• 1.1 实验材料及仪器
• 1.2 实验方法
• 2 过氧化氢酶（CAT）活性测定
• 2.1 实验材料及仪器
• 2.2 试验方法
• 3 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定
• 3.1 实验材料及仪器
• 3.2 试验方法
• 4 丙二醛（MDA）含量测定
• 4.1 实验材料及仪器
• 4.2 实验方法
• 5 实验结果及分析
• 5.1 流分Fd6对SOD影响
• 5.2 流分Fd6对POD影响
• 5.3 流分Fd6对CAT影响
• 5.4 流分Fd6对MDA影响
• 6 小结
• 第五章 结论与讨论
• 1 结论
• 2 讨论
• 3 展望
• 附录
• 参考文献
• 致谢