论文摘要
目的:观察辛伐他汀对K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,进一步检测辛伐他汀是否经死亡受体途径诱导K562细胞凋亡。方法:20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞24h,48h,72h后:1.MTT法检测细胞增殖情况。2.流式细胞仪测定辛伐他汀对K562细胞周期的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测20μmol/L辛伐他汀在不同时间段对K562细胞凋亡的影响。3. RT-PCR检测死亡受体通路中FADD、TRADD和DR5在mRNA水平的变化;提取细胞总蛋白,western-blot检测FADD、TRADD和DR5蛋白水平变化。结果:1. 20μmol/L辛伐他汀能抑制K562细胞增殖,其作用具有浓度和时间依赖性。2.辛伐他汀作用K562细胞24h开始,G0/G1期细胞百分比增加,而S期细胞百分比减少,细胞阻滞于G1/S期。随着辛伐他汀作用K562细胞时间的延长,细胞凋亡增加。AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测结果显示:20μmol/L辛伐他汀作用K562细胞24h、48h、72h能诱导其凋亡,细胞凋亡率分别为（9.41±0.86）%,（12.41±0.35）%和（19.08±1.05）%,与对照组比较,差异具有显著性统计学意义（P<0.01）。3. FADD、TRADD和DR5这3个基因mRNA水平表达上调,处理组与对照组的差异具有统计学意义（P<0.01）。FADD、TRADD和DR5蛋白表达增加,各处理组与对照组相比,存在明显差异,随辛伐他汀药物作用时间的延长,蛋白表达有明显增加。结论:1.辛伐他汀能抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,其作用具有浓度和时间依赖性。2.经过辛伐他汀作用K562细胞不同时间段后,死亡受体通路中关键性始动因子FADD、TRADD和DR5的mRNA水平存在明显差异,且western-blot检测FADD、TRADD和DR5蛋白水平变化同样存在显著差异,表明辛伐他汀抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡经过了死亡受体途径。3.本研究较深入探讨了辛伐他汀的抗慢性粒细胞白血病机制,可为临床治疗提供理论依据。
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