红树莓总黄酮的提取、纯化及抗氧化性的研究

论文摘要

本研究以红树莓为原料进行总黄酮的提取、纯化及抗氧化性能的研究。建立了分光光度法测定红树莓总黄酮,考察了溶剂提取黄酮物质的最佳工艺条件及超声辅助提取的效果,选取了纯化黄酮物质的最佳大孔吸附树脂及研究其吸附解吸性能,并利用溶剂萃取进一步纯化黄酮物质,还对红树莓总黄酮的抗氧化性能做了研究。结果表明:以芦丁为标准品,采用紫外分光光度法测定红树莓总黄酮。芦丁在0.011-0.066mg/mL的浓度范围内线性关系良好,总黄酮的平均回收率为100.7%,RSD=2.2%。此法简单、快捷、准确,可以用于测定红树莓总黄酮的含量。采用醇法提取红树莓总黄酮,研究了影响得率的主要因素,采用正交法确定了最佳提取工艺。结果表明,各因素对总黄酮提取的影响次序为:提取温度>料液比>乙醇浓度>提取时间,最佳提取条件是:以70%乙醇溶液为提取剂,料液比为1:16（g:mL）,在80℃下回流提取4h。在此条件下红树莓总黄酮得率为0.152%。超声处理15min植物细胞壁已经基本破碎,继续增加超声处理时间对黄酮物质的得率影响不大。超声辅助提取可以使黄酮物质有效溶出,从而大大提高了其得率。以树脂对红树莓总黄酮的吸附量和解吸率为考察指标,选用HPD100、HPD400、D4020、HPD500、X-5、AB-8和S-8七种型号的大孔吸附树脂进行考察。结果表明,AB-8大孔树脂对红树莓黄酮物质的吸附和解吸效果最佳,吸附流速为2BV/h,吸附pH值为3.0,解吸剂为60%乙醇。AB-8大孔吸附树脂对红树莓总黄酮的纯化具有较好的重复使用性能。用乙酸乙酯对树脂纯化后的红树莓总黄酮进一步纯化。经测定,萃取后的黄酮物质纯度可达32.56%,远远高于树脂纯化后的纯度。利用纯化后的红树莓总黄酮进行了还原能力的测定、抗猪油氧化、清除羟基自由基试验和抗亚油酸氧化试验。结果表明,红树莓总黄酮有较强的还原能力、能有效抑制猪油和亚油酸氧化并能有效清除羟自由基,具有良好的抗氧化能力。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 文献综述
• 1 前言
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 仪器与试剂
• 2.2.1 主要仪器
• 2.2.2 主要试剂
• 2.2.3 树脂类型
• 2.3 方法
• 2.3.1 总黄酮含量的测定方法
• 2.3.2 红树莓总黄酮的提取方法
• 2.3.3 红树莓总黄酮的纯化方法
• 2.3.4 红树莓总黄酮抗氧化性能的研究方法
• 3 结果与分析
• 3.1 总黄酮测定方法的建立
• 3.1.1 最佳吸收波长的确定
• 3.1.2 标准曲线的建立
• 3.1.3 精密度试验结果
• 3.1.4 稳定性试验结果
• 3.1.5 重现性试验结果
• 3.1.6 加样回收率试验结果
• 3.2 溶剂提取条件的确定
• 3.2.1 最剂提取溶剂的确定
• 3.2.2 乙醇浓度对总黄酮得率的影响
• 3.2.3 提取温度对总黄酮得率的影响
• 3.2.4 料液比对总黄酮得率的影响
• 3.2.5 提取时间对总黄酮得率的影响
• 3.2.6 总黄酮最佳提取工艺的确定
• 3.3 超声辅助提取结果
• 3.4 红树莓总黄酮的纯化
• 3.4.1 吸附树脂筛选结果
• 3.4.2 不同流速对红树莓总黄酮吸附率的影响
• 3.4.3 不同pH 值对红树莓总黄酮吸附率的影响
• 3.4.4 上样液浓度对红树莓总黄酮吸附率的影响
• 3.4.5 树脂的动态吸附曲线
• 3.4.6 不同乙醇浓度对红树莓总黄酮解吸率的影响
• 3.4.7 动态解吸曲线
• 3.4.8 树脂重复使用次数
• 3.4.9 经AB-8 大孔吸附树脂纯化的红树莓总黄酮纯度测定
• 3.4.10 乙酸乙酯纯化
• 3.5 抗氧化试验
• 3.5.1 还原能力的测定
• 3.5.2 抗油脂氧化试验
• 3.5.3 清除羟基自由基试验
• 3.5.4 在亚油酸中抗氧化性的研究
• 4 讨论
• 4.1 红树莓总黄酮含量测定方法的研究
• 4.1.1 分光光度法的测定依据和特点
• 4.1.2 红树莓总黄酮的测定方法
• 4.2 红树莓总黄酮提取条件的研究
• 4.2.1 溶剂提取法
• 4.2.2 超声提取法
• 4.3 红树莓总黄酮纯化工艺的研究
• 4.3.1 大孔树脂纯化法
• 4.3.2 溶剂萃取纯化法
• 4.4 红树莓总黄酮抗氧化性的研究
• 4.4.1 抗氧化、清除自由基作用机理
• 4.4.2 抗氧化性能的研究
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 个人简介
• 导师简介
• 论文指导教师简介