益生菌应用雏鸡IBD免疫后免疫器官免疫功能和IL-2及其受体mRNA表达变化

论文摘要

以1日龄雏鸡为研究对象,应用细胞培养技术、MTT检测法,组织化学染色法和荧光定量PCR技术全面系统的研究了雏鸡应用益生菌及其联合IBD疫苗免疫和IBD强毒攻击后,其免疫胸腺、法氏囊、脾脏IL-2及其受体mRNA表达和T、B淋巴细胞增殖功能及其数量的动态变化。旨在全面系统揭示益生菌及其联合IBD疫苗对雏鸡免疫器官细胞因子分子调节、细胞和体液免疫功能的影响,为益生菌研发利用提供重要的科学实验依据。研究结果发现:1)1日龄雏鸡应用益生菌后,其上述免疫器官的IL-2和IL-2R mRNA表达分别于47天和411天较未饲喂益生菌的对照雏鸡显著增多（P<0.05或P<0.01）;TANAE+细胞数量于411天明显高于对照雏鸡;胸腺和脾脏T淋巴细胞增殖功能不同程度高于对照雏鸡;法氏囊和脾脏B淋巴细胞增殖功能均于411天显著高于对照雏鸡（P<0.05或P<0.01）;表明雏鸡应用益生菌后,其免疫器官细胞因子分子调节、细胞和体液免疫功能均明显增强。2)益生菌应用雏鸡IBD疫苗免疫后,其免疫器官IL-2及IL-2R mRNA表达、TANAE+细胞数量和T、B淋巴细胞增殖功能均明显高于单独疫苗免疫雏鸡。表明益生菌与IBD疫苗联合使用可提高机体免疫器官细胞和体液免疫水平,发挥了免疫增强效应,此与益生菌促进机体细胞因子的生物合成,使其免疫调节功能增强密切相关。3)IBD强毒攻击后,应用益生菌雏鸡IBD疫苗免疫后,其免疫器官IL-2及IL-2R mRNA表达、TANAE+细胞数量和T、B淋巴细胞增殖功能均明显高于IBD疫苗单独免疫雏鸡。可见,益生菌可显著提高IBD疫苗免疫雏鸡细胞因子分子调节功能,增强免疫器官细胞和体液免疫功能,从而提高IBD疫苗免疫雏鸡对IBDV攻击的免疫保护力。4)以芽孢杆菌为主配合乳酸菌的益生菌制剂无论是单独饲喂雏鸡,还是与IBD疫苗协同,其对雏鸡免疫器官IL-2及IL-2R mRNA表达、TANAE+细胞数量和T、B淋巴细胞增殖功能均显著高于以乳酸菌为主配合芽孢杆菌的益生菌制剂应用雏鸡。表明以芽孢杆菌为主配合乳酸菌的益生菌对雏鸡细胞因子分子调节功能、细胞与体液免疫功能的促进作用要明显高于以乳酸菌为主配合芽孢杆菌的益生菌。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1. 引言
• 1.1 益生菌研究进展
• 1.1.1 益生菌的定义
• 1.1.2 益生菌来源及分类
• 1.1.3 益生菌的作用机制
• 1.1.4 益生菌的应用
• 1.1.5 益生菌微胶囊包埋技术
• 1.2 鸡传染性法氏囊病研究进展
• 1.2.1 IBD 病原
• 1.2.2 IBD 的流行病学
• 1.2.3 IBD 的临诊症状和病理变化
• 1.2.4 IBD 的免疫抑制机制
• 1.2.5 IBD 的防治
• 1.3 禽类免疫系统研究进展
• 1.3.1 禽类免疫系统的特点
• 1.3.2 禽类T 淋巴细胞
• 1.3.3 禽类B 淋巴细胞
• 1.3.4 家禽IL-2 及IL-2R
• 1.4 研究的目的和意义
• 2. 材料和方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 菌种
• 2.1.3 IBD 疫苗和IBD 强毒
• 2.1.4 主要生物制剂和化学试剂
• 2.1.5 主要仪器设备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 益生菌微胶囊制备
• 2.2.2 实验动物分组及其处理
• 2.2.3 被检材料采取
• 2.2.4 检测指标及方法
• 2.3 数据处理
• 3. 结果与分析
• 3.1 鸡IL-2 和IL-2R mRNA 表达Real Time-PCR 检测方法的建立
• 3.1.1 总RNA 提取
• 3.1.2 雏鸡IL-2 和IL-2R mRNA 表达Real Time-PCR 检测
• 3.2 益生菌雏鸡免疫器官免疫功能及IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.2.1 益生菌雏鸡免疫器官IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.2.2 益生菌雏鸡免疫器官免疫功能变化
• 3.3 益生菌应用雏鸡IBD 免疫后免疫器官免疫功能及IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.3.1 益生菌应用雏鸡IBD 免疫后免疫器官IL-2 和IL-2R mRNA 表达变化
• 3.3.2 益生菌应用雏鸡IBD 免疫后免疫器官免疫功能变化
• 3.4 雏鸡IBD 强毒攻击后免疫器官免疫功能及IL-2 和IL-2R mRNA 表达的变化
• 3.4.1 雏鸡IBD 强毒攻击后免疫器官IL-2 和IL-2R m RNA 表达的变化
• 3.4.2 雏鸡IBD 强毒攻击后免疫器官免疫功能变化
• 3.5 IBD 强毒攻击雏鸡后发病及保护情况
• 4. 讨论
• 4.1 益生菌对雏鸡IL-2 及其受体m RNA 表达的影响及机制
• 4.2 益生菌对雏鸡免疫功能的影响及机制
• 4.2.1 益生菌对雏鸡细胞免疫功能的影响及机制
• 4.2.2 益生菌对雏鸡体液免疫功能的影响及机制
• 4.3 益生菌应用雏鸡对IBD 疫苗免疫应答及其机制
• 4.3.1 IBD 疫苗免疫对雏鸡IL-2 及其受体mRNA 表达的影响及机制
• 4.3.2 益生菌对IBD 疫苗免疫雏鸡IL-2 及其受体mRNA 表达的影响及机制
• 4.4 不同配比益生菌组合对雏鸡免疫功能的影响
• 5. 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文