论文摘要
目的:采用单细胞凝胶电泳技术检测X射线对人离体外周血中有核细胞的DNA的损伤及损伤修复;探讨不同剂量的X射线对人离体精液DNA及运动性的损伤;采用单细胞凝胶电泳技术检测不同剂量X射线对人离体外周血有核细胞DNA及精子DNA的损伤,评估外周血有核细胞及精子在高剂量X射线照射后DNA的损伤程度。方法:采用正常人的离体外周血,用能量为6MV的X射线分别给予0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy的剂量照射,分别在0.5h,lh,2h用单细胞凝胶电泳技术检测全血中有核细胞的彗星率,彗尾长度和尾部DNA含量。采用正常人离体的精液以能量为6MeV的X射线分别给予0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy剂量的照射。照射后lh,2h,4h,6h,8h,10h,12h检测精液常规,观察精子活率,精子活力;照射后1h内行单细胞凝胶电泳,观察彗星率,彗尾长度,尾部DNA含量。采用正常人的外周血和采集正常的人精液,以能量为6MV的X射线分别给予0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy的剂量照射。照射后1h内行单细胞凝胶电泳检测人离体外周血中有核细胞和人离体精液中精子的彗星率,彗尾长度和尾巴DNA含量。结果:1.0Gy的对照组彗星率1%,2Gy时彗星率到达27.10%,4Gy时彗星率达到76.32%,6Gy,8Gy,10Gy时彗星率在90%以上,接近100%。2Gy,4Gy时经2h修复彗星率下降具有统计学意义(p<0.05);6Gy、8Gy、10G时彗星率下降无统计学意义(p>0.05)。DNA修复在1小时内最快,在1h-2h间修复速率较1h内修复速率减慢。2.2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy剂量照射组与0Gy对照组相比精子的活率和精子活力在各时间点没有统计学差异(P<0.05);2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy剂量照射组的彗星率分别是47.37±8.32%,92.22±9.025%,100%,100%,100%;与0Gy组(2.10±1.50%)相比彗星率明显升高,具有明显的统计学差异(P<0.05)。3.0Gy对照组人外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率分别是1.00±0.10%,2.1±1.5%,有统计学差异(p<0.05);2Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率分别是27.10±4.71%,47.37±8.32%,有统计学差异(p<0.05);4Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率分别是76.32±10.28%,92.22±9.02%,有统计学差异(p<0.05);6Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率分别是94.36±3.24%,100%,有统计学差异(p<0.05);8Gy,10Gy组人离体外周血中有核细胞的彗星率和精液中精子的彗星率都分别是100%,100%,无统计学差异。结论:在2Gy以上的X射线照射下全血中有核细胞的DNA均受到不同程度的损伤。6Gy以上DNA损伤接近100%,且修复明显减慢或消失,推测:6Gy的X射线可能是全血细胞所能承受的极限。精子受到不同剂量的X线照射后,精子活率和精子活力没有明显的变化,仍然具有与卵子结合的运动性;精子的DNA受到了严重的损伤。在一定剂量范围内(2-6Gy)精子彗星实验比人离体外周血中单个核细胞彗星实验能更敏感的反应X射线对人体的损伤。
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