雷公藤内酯醇对黑色素瘤A375细胞生长及mTOR、Survivin、COX-2 mRNA表达的影响

论文摘要

目的:观察雷公藤内酯醇（Triptolide,TP）对恶性黑色素瘤（MalignantMelanoma,简称恶黑）A375细胞生长和mTOR、Survivin、COX-2基因mRNA表达的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法:1.选择皮肤恶性黑色素瘤A375细胞株为研究对象,分别采用倒置显微镜,噻唑蓝比色（MTT）法及流式细胞术（FCM）等方法检测不同浓度TP对A375细胞的形态学、增殖、凋亡率及细胞周期时相的影响;2.采用半定量逆转录-聚合酶联反应（RT-PCR）方法,分别检测不同浓度TP对皮肤恶性黑色素瘤A375细胞株中mTOR、Survivin、COX-2 mRNA表达水平变化的影响。结果1.TP能明显抑制A375细胞增殖,诱导细胞凋亡,且具有浓度和时间依赖性;流式细胞术结果证明TP促进细胞凋亡,阻断细胞于G2/S期;2.A375细胞株中存在有mTOR、Survivin、COX-2基因mRNA的较强表达,TP可抑制其表达,5、10ng/mlTP浓度处理组与未经药物处理组相比,差异显著（p＜0.05）。结论:雷公藤内酯醇可能通过抑制mTOR、Survivin、COX-2等mRNA的表达诱导肿瘤细胞凋亡、抑制细胞生长,从而发挥抗肿瘤作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 前言
• 第一章 材料和方法
• 2.1 研究对象
• 2.2 仪器设备与试剂
• 2.3 液体配制
• 2.4 实验步骤
• 2.5 统计学分析
• 第二章 结果
• 3.1 光学倒置显微镜观察TP处理前后A375细胞形态学变化
• 3.2 MTT法检测TP对A375细胞的增殖抑制
• 3.3 流式细胞仪检测TP对细胞凋亡的影响
• 3.4 流式细胞仪检测TP对细胞周期时相的影响
• 第三章 讨论
• 一、雷公藤内酯醇对A375细胞凋亡诱导效应
• 二、雷公藤内酯醇对A357细胞mTOR、Survivin、COX-2mRNA表 达的影响
• 第四章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果