60%~70%最大摄氧量跑台运动对大鼠右心室肌蛋白质组差异表达的影响

60%~70%最大摄氧量跑台运动对大鼠右心室肌蛋白质组差异表达的影响

论文摘要

目的:本研究探讨4周60%~70%最大摄氧量跑台运动对大鼠右心室肌蛋白质组差异表达的影响,筛选出对运动应激敏感的目标蛋白质点,并对部分目标蛋白质的mRNA表达水平进行检测,为科学指导运动健身及慢性心血管疾病的运动康复研究提供新的思路及理论依据。方法:将20只SD雄性大鼠随机分为对照组和实验组,以跑台运动的方式,复制递增运动负荷至24m-min-1的4周60%~70%最大摄氧量运动实验动物模型;提取右心室肌组织的全蛋白进行双向凝胶电泳分离,运用ImageMaster 2D Platinum图像分析软件对2-DE胶进行分析,选择差异表达上调5倍以上及下调至1/5以下的12个蛋白质点作为备选目标蛋白质点,用串联飞行时间质谱蛋白质仪(ULGRAFL-FLEX-TOF/TOF)进行质谱鉴定,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对部分目标蛋白质的mRNA表达水平进行检测。结果:①大鼠经4周60%~70%最大摄氧量运动后,与对照组相比,心脏重量增加的百分率为0.62%,而心脏重量指数增加13.7%。心脏重量指数的增高有显著性差异(P<0.05)。②2-DE图谱上,对照组检测蛋白质点437±17个,实验组检测448±19个;运动后47个蛋白质点发生了较明显的变化。③通过对差异表达上调5倍以上及下调至1/5以下的12个点进行质谱鉴定,共鉴定出了11个蛋白,这些蛋白分别是:线粒体琥珀酸脱氢酶辅酶黄素蛋白亚基、线粒体-吡咯啉-5-羟酸酯脱氢酶、线粒体ATP合酶α亚基、Josephin-1、谷胱甘肽·S-转移酶Mu2、线粒体细胞色素b-cl联合体亚基、心肌肌动蛋白α、核苷二磷酸激酶B、微管动力调控蛋白、泛素融合降解1、腺苷酸激酶同工酶1。④逆转录聚合酶链实验结果显示:运动组大鼠心肌肌动蛋白α1、腺苷酸激酶同工酶1、谷胱甘肽S转移酶Mu2、核苷二磷酸激酶B、线粒体ATP合酶亚基a等的mRNA相对净光密度值低于对照组(p>0.05),表达水平下降;Josephin域蛋白1的mRNA相对净光密度值高于对照组(p>0.05),表达水平上升。结论:①4周60%~70%最大摄氧量有氧运动后,大鼠心脏的形态学变化不明显。②筛选出11个与心肌的抗氧化能力、收缩能力、细胞分裂能力、能量代谢水平、物质代谢水平等密切相关的目标蛋白质。③目标蛋白质的差异表达一部分受其合成过程中上游基因转录水平的调控,一部分受下游翻译、修饰等的调控。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1.前言
  • 2.材料与方法
  • 2.1 研究对象与分组
  • 2.2 运动实验动物建模方案
  • 2.3 仪器设备与试剂
  • 2.4 样品制备
  • 2.5 固相PH梯度-SDS双向凝胶电泳方法与图像分析
  • 2.6 质谱鉴定分析
  • 2.7 逆转录聚合酶链实验方法
  • 2.8 实验质量控制
  • 2.9 实验数据的统计学处理
  • 3 实验结果
  • 3.1 大鼠心脏重量及心重指数的变化
  • 3.2 2-DE图谱分析结果
  • 3.3 目标蛋白质点的质谱鉴定结果
  • 3.4 逆转录聚合酶链实验结果
  • 4.分析讨论
  • 4.1 大鼠心脏的形态结构变化分析
  • 4.2 右心室肌蛋白质点的差异表达量分析
  • 4.3 目标蛋白质点的质谱鉴定结果分析
  • 4.4 目标蛋白质的基因表达分析
  • 5.结论
  • 参考文献
  • 缩略词表(中英文对照)
  • 专题综述
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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