子宫平滑肌分娩发动相关差异基因表达谱的筛选及意义

论文摘要

子宫平滑肌分娩发动相关差异基因表达谱的筛选及意义 目的：探讨人类分娩发动时，不同临产状态及部位的子宫平滑肌组织差异基因表达谱的变化，筛选出分娩发动相关的差异表达基因；并对其中的差异表达基因在不同临产状态的子宫平滑肌中的基因表达及孕妇外周血中的蛋白表达水平进行验证，探讨其临床意义。 方法：cDNA微阵列技术：30例健康孕妇（分为未临产组、自然临产组和缩宫素诱发临产组，每组10例），剖宫产术中活检子宫体部与子宫下段平滑肌组织，分别提取组织总RNA、逆转录成cDNA、cy3／cy5分别标记cDNA探针，与8064条人类全长cDNA微阵列杂交，用Array Vision、MIDAS等软件分析杂交图像和数据筛查，以比值大于2或小于-2的数据点为显著性差异表达基因的筛选标准，通过http://www.ncbi.nlm.nih.gov、http://www.chgc.sh.cn等网上数据库查询基因的功能，建立人类临产时子宫体部比子宫下段、自然临产子宫体部比未临产子宫体部及缩宫素诱导临产子宫体部比未临产子宫体部平滑肌组织差异基因表达谱。 半定量RT-PCR实验：从上述筛选出的差异表达基因谱中，选择高丰度、有显著差异表达的热休克蛋白70KD家族1B（HSPA1B）和低丰度、无显著差异表达的电压依赖性钙通道-L型α亚单位1C（CACNA1C），对30例孕妇子宫平滑肌组织中的相对表达量，采用RT-PCR方法进行验证。 免疫散射比浊法、酶联免疫吸附实验：从差异表达基因谱中，选择无差异的C-反应蛋白（CRP）和有差异的白介素-6（IL-6）基因表达产物，对140例孕妇外周血中的蛋白表达变化，分别用免疫散射比浊法、酶联免疫吸附测定法（ELISA）进行验证。 Spss12.0统计软件包进行分析。P＜0.05作为检验水准。

论文目录

• 一、中文摘要
• 二、英文摘要
• 三、英文缩略词表
• 四、论文正文
• 前言
• 第一章 子宫平滑肌分娩发动相关差异基因表达谱的筛选
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 第二章 HSPA1B、CACNAIC基因在不同临产状态子宫平滑肌组织中表达变化及意义
• 2.1 资料与方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 第三章 CRP、IL-6蛋白在不同临产状态孕妇外周血中表达变化及意义
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 五、结论
• 六、参考文献
• 七、综述
• 八、致谢
• 九、攻读博士学位期间发表论文、科研及奖励题录