内皮抑素基因联合骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究

内皮抑素基因联合骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究

论文摘要

脑胶质瘤是目前神经外科治疗中最棘手的难治性肿瘤之一,由于其恶性度高、生长快、病程短,侵袭性强,手术完全切除困难,死亡率高,严重威胁人类健康。目前,脑胶质瘤的基本治疗手段还是手术切除加放疗和化疗,尽管术后辅以积极的放、化疗,但术后仍然很快复发。近年来,免疫治疗、抗血管生成及基因治疗等新的治疗手段的兴起,为胶质瘤的治疗带来了希望。采用基因转导系统将抑制血管生成基因转染肿瘤细胞或载体细胞并使其长时间、高效表达,抑制血管和肿瘤生长,是胶质瘤治疗的新策略。本研究采用了具有多向分化潜能的骨髓间充质干细胞联合抑制血管生成基因-内皮抑素基因治疗大鼠脑胶质瘤,以观察其联合治疗效果。从大鼠骨髓中分离、提取出MSCs,进行原代及传代培养,通过加入成骨、成脂及成神经诱导剂,对MSCs进行了体外的分化培养,成功的向成骨细胞、成脂细胞、神经元样细胞方向转化,证实了其多向分化潜能;在成功的构建重组真核表达质粒pcDNA3-Endo并建立pcDNA3-Endo稳定转染MSCs体系后,将pcDNA3-Endo-MSCs以立体定向方式注射大鼠胶质瘤脑内模型进行治疗,并设立多组对照;从治疗后的大鼠生存期、各时段肿瘤体积、各时段病理切片、透射电镜、肿瘤坏死率和血管计数等检测结果显示,pcDNA3-Endo-MSCs组治疗效果明显好于其它各对照组,证实了endostatin基因联合MSCs治疗胶质瘤比单一应用endostatin基因和单独使用MSCs更加有效。本实验利用了内皮抑素强烈抑制血管生成以及MSCs的多向分化潜能和良好的组织修复能力等特性来治疗胶质瘤,并取得了良好的效果,为今后将这一技术手段应用于临床奠定了基础。

论文目录

  • 提要
  • 综述一 胶质瘤治疗新策略--抗血管生成疗法
  • 综述二 内皮抑素与胶质瘤治疗
  • 第一部分 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养、鉴定及其多向诱导分化与鉴定
  • 引言
  • 一、 实验材料
  • 二、 实验方法
  • 三、 实验结果
  • 四、 讨论
  • 第二部分 内皮抑素基因真核表达载体的构建及体外抑制血管生成的实验研究
  • 引言
  • 一、 实验材料
  • 二、 实验方法
  • 三、 实验结果
  • 四、 讨论
  • 第三部分 转染内皮抑素基因的MSCs治疗大鼠胶质瘤的体内实验研究
  • 引言
  • 一、 实验材料
  • 二、 实验方法
  • 三、 实验结果
  • 四、 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 攻读博士学位期间研究成果
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 致谢
  • 相关论文文献

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