论文摘要
本试验通过在日粮中添加二氢吡啶研究饲喂二氢毗啶对奶牛热应激蛋白基因（Hsp70mRNA, Hsp90mRNA）相对表达量,血液淋巴细胞凋亡相关基因（Bcl-2mRNA, BaxmRNA）相对表达量,血液淋巴细胞凋亡率,以及抗氧化和抗热应激能力的影响。二氢毗啶可以通过影响奶牛血液的抗氧化酶活力、促进奶牛热应激蛋白基因表达量,提高细胞凋亡基因Bcl-2mRNA/BaxmRNA比值,降低血液淋巴细胞凋亡率,进而提高奶牛的抗热应激能力,改善奶牛的健康状况、提高奶牛的免疫功能,可以缓解夏季高温高湿环境对奶牛生产性能所造成的不利影响。试验一根据胎次、产奶量、体重相似的原则选取40头健康状况良好的泌乳中期中国荷斯坦奶牛。根据牛场DHI记录报告计算奶牛从四月份至八月份的总产奶量下降率,其中产奶量下降率低于30%定为耐热组（n=20）,产奶量下降率高于50%定为热应激组（n=20）。将奶牛抗氧化指标、热应激蛋白及细胞凋亡基因表达量与产奶量进行相关性分析。试验结果表明,夏季奶牛血液中抗氧化酶活力及总抗氧化能力均与产奶量下降率呈负相关,与脂质过氧化产物MDA含量呈正相关。其中GSH-Px活力以及T-AOC与产奶量下降率呈中等强度负相关,r值和P值分别为（r=-0.619,P<0.01）和（r=-0.515,P<0.01）,SOD活力与产奶量下降率呈低等强度负相关（r=-0.462,P<0.01）,CAT活力与产奶量下降率相关性不显著（r=-0.291,P>0.05）,夏季奶牛产奶量下降率与MDA含量呈中等强度正相关（r=0.371,P<0.05）。夏季奶牛产奶量下降率与血液淋巴细胞热应激蛋白Hsp70mRNA和Hsp90mRNA表达量呈低等强度负相关,r值和P值分别为（r=-0.619,P<0.01）和（r=-0.515,P<0.01）,与Bcl-2mRNA/BaxmRNA比值呈中等强度负相关（r=-0.669,P<0.01）。说明热应激导致的产奶量下降可能与热应激引起的血液淋巴细胞的凋亡以及机体抗氧化能力下降有关。试验二选取16头健康状况良好、处于泌乳中期的中国荷斯坦奶牛根据胎次、产奶量、体重相似的原则分为对照组和试验组,每组8头奶牛。试验时间为春季适温期4月、夏季高温期7月1-8月15日,春季适温期对照组和试验组奶牛饲喂常规日粮、夏季高温期对照组奶牛饲喂常规日粮,试验组奶牛日粮添加二氢吡啶,粗饲料固定不变。试验结果表明,随着高温应激时间的延长对照组和试验组奶牛SOD, CAT, GSH-Px等抗氧化酶活性及总抗氧化能力T-AOC均逐渐下降,MDA含量逐渐升高。血清和乳清抗氧化指标呈现一致的变化趋势。日粮中添加二氢吡啶可显著提高试验组奶牛血清及乳清抗氧化酶活性,降低MDA含量（P<0.05）。适温期对照组和试验组奶牛外周血液淋巴细胞热应激蛋白Hsp70mRNA和Hsp90mRNA表达量低于高温期。并且随着高温应激时间的延长Hsp70mRNA和Hsp90mRNA表达量有逐渐升高的趋势,高温期15天,30天时试验组奶牛Hsp90mRNA表达量显著高于对照组（P<0.05）。高温期30天,45天时试验组奶牛Bcl-2mRNA/BaxmRNA比值显著高于对照组（P<0.05）。试验组奶牛血液淋巴细胞凋亡率低于对照组5.38%。说明热应激可引起奶牛抗氧化能力的下降,通过促进BaxmRNA基因表达,抑制Bcl-2mRNA基因表达导致淋巴细胞凋亡水平升高。饲料中添加二氢吡啶可以通过提高抗氧化酶活性,促进热应激蛋白表达,从而降低血液淋巴细胞凋亡率。