产志贺毒素大肠埃希菌多重耐药分子机制的研究

论文摘要

产志贺毒素大肠埃希菌（Shiga toxin-producing E.coli,STEC）是世界范围内最严重的食源性致病菌。STEC耐药性产生与传播已受到世界广泛关注。为探讨STEC多重耐药性产生和传播机制,本研究采用PCR、接合与转化、克隆测序、Southern blot和酶切图谱分析等技术,在测定抗菌药物敏感性的基础上,对STEC分离株携带整合子、R质粒和耐药基因进行研究分析。结果表明多重耐药STEC染色体、R质粒携带1500bp 750bp第1类整合子和dfrA1、aadA1基因盒及sul1、tem、tet、erm等耐药基因,传递对磺胺类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、四环素类和红霉素类等抗菌药物的耐药性。发现了染色体上一种缺陷型及编码宋内志贺菌（S.sonnei）跨膜转运蛋白基因的第1类整合子。证明了STEC多重耐药菌株的出现和流行与农业、畜牧业将磺胺类、氨基糖苷类等抗菌药物作为动物生长促进剂长期使用有关。STEC在抗菌药物的选择压力下不断进化,通过整合子与R质粒促进多重耐药性的产生和扩散。本研究结果揭示了STEC在耐药性表达及耐药性传递方面的作用机制,为进一步更好地控制STEC基因水平的耐药性传播提供重要的科学依据。

论文目录

• 英文缩略词表
• 前言
• 第一章 文献综述
• 第一节 细菌耐药性产生及扩散机制的研究进展
• 一、细菌耐药性产生及耐药基因的来源
• 二、细菌耐药性扩散的机制
• 三、针对细菌耐药的措施
• 第二节 细菌基因盒-整合子系统的研究进展
• 一、整合子结构
• 二、整合子的功能
• 三、基因盒的结构、种类与细菌耐药性关系
• 第二章 实验研究
• 第一节 材料与方法
• 一、材料
• 二、方法
• 第二节 实验结果
• 一、不同来源肠杆菌及STEC 的分离鉴定
• 二、STEC 耐药性检测
• 三、STEC 质粒和转接合子图谱
• 四、PCR 检测STEC 第1、2 类整合酶、整合子和耐药基因
• 五、STEC 第1 类整合子及插入盒分析
• 六、STEC 第1 类整合子Southern blot 定位分析
• 七、STEC 第1 类整合子-基因盒图谱
• 第三节 讨论
• 第四节 结论
• 参考文献
• 攻读博士期间发表的学术论文
• 攻读博士期间出版的著作
• 攻读博士期间承担的课题
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢