论文摘要
前言 各种原因所致的急慢性肝功能衰竭严重威胁人类健康,其显著特点是短期内肝细胞大量严重坏死,病死率极高,目前发病机制尚不清楚,至今尚无有效的药物治疗方法。肝脏是再生能力很强的人体器官,有多种细胞因子参与调节这一过程,对肝再生调控因子的研究一直是一个热点,迄今已发现包括肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子-α(TGF-α)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素等二十余种来自肝内外的参与调节肝再生的刺激因子和抑制因子,但它们均难以解释器官特异性的肝再生调控机制。1994年Hygiya等从初断乳大鼠肝组织中克隆得到的一种新型的促肝细胞增殖因子,命名为肝再生增强因子(ALR),肝再生增强因子是目前已知唯一对肝源性细胞有特异性增殖刺激活性的因子,且无种属特异性,实验证明该细胞因子能促进肝再生,并对各种急慢性肝损伤有保护作用,在肝损伤或部分肝切除后其表达量明显提高。 本研究采用分子生物学技术,从正常人肝组织中获取人肝再生增强因子(hALR)阅读框全序列,结合pET28a(+)构建hALR原核表达体系,成功地从大肠杆菌中高效而稳定地表达出重组人肝再生增强因子蛋白质,并获高效纯化,为进一步进行蛋白质生物学功能鉴定和研制出一种新的抗肝损伤药物奠定基础。
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