洋金花对实验性PD大鼠脑CPU中酪氨酸羟化酶及细胞凋亡影响的研究

论文摘要

目的:观察单味药洋金花细粉对帕金森病（PD）大鼠模型行为学、细胞和分子水平上的影响,并探讨其作用机制。方法:本实验采用6-羟基多巴胺（6-OHDA）注入纹状体尾壳核（CPU）的方法,在Wistar大鼠身上复制出偏侧PD模型,以美多巴为阳性对照药物,连续给药后观察给药前后大鼠30min旋转次数的行为学变化,于麻醉后心脏灌注多聚甲醛处死大鼠后迅速取出脑组织按ABC法检测损毁侧黑质或纹状体中酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞表达情况及TUNEL法检测损毁侧黑质或纹状体的细胞凋亡。结果:1.洋金花各给药组对阿扑吗啡诱导的旋转行为有明显改善,旋转圈数与模型组相比较明显减少。洋金花高、中剂量组P＜0.01:低剂量组P＜0.05,两者有统计学差异。2.TH免疫组化结果表明:PD大鼠模型毁损侧黑质部位多巴胺神经元明显减少,纹状体部位多巴胺神经元纤维终末光密度值明显降低,与模型组相比,洋金花治疗组大鼠毁损侧黑质多巴胺神经元数量明显增多,纹状体部位TH阳性纤维的相对光密度值明显增强,洋金花高、低剂量组P＜0.05,两者有统计学差异。3.原位细胞凋亡结果表明:模型组镜下见有大量密集分布的阳性凋亡细胞,细胞核呈棕褐色,圆形或不规则,部分细胞核裂解成多个深棕色凋亡小体,洋金花治疗组大鼠镜下见阳性凋亡细胞数比模型组明显减少,呈散在分布,差异显著,洋金花各剂量组P＜0.05,两者有统计学差异。结论:本研究发现,单味药洋金花粉末对PD大鼠模型有较好的治疗作用,其能够明显改善PD大鼠行为学、明显增高TH阳性细胞的表达、抑制阳性细胞凋亡。本课题通过对PD大鼠模型的实验研究,首次对临床上具有确定疗效的洋金花粉末进行了系统研究,在行为学、细胞和分子水平上为洋金花治疗PD的作用机制提供实验依据,也为中药治疗PD的实验研究提供新的方法依据。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 引言
• 文献综述
• 一、现代医学对PD的研究进展
• 1.PD 病因病机的现代医学研究进展
• 1.1 α-突触核蛋白因素的相关研究
• 1.2 铁离子因素的相关研究
• 1.3 组胺因素的相关研究
• 1.4 多聚ADP核糖聚合酶因素的相关研究
• 1.5 泛素羧基端水解酶L1因素的相关研究
• 1.6 DJ-1蛋白因素的相关研究
• 1.7 NO因素的相关研究
• 1.8 免疫分子因素的相关研究
• 1.9 氧化应激与自由基因素的相关研究
• 1.10 Parkin基因因素的相关研究
• 2.PD 治疗方案的现代医学研究进展
• 2.1 补充DA前体,左旋多巴和复方左旋多巴
• 2.2 加强突触前DA的合成和释放,减少DA的再摄取
• 2.3 抗胆碱能药物
• 2.4 DA受体激动剂
• 2.5 外周脱羧酶抑制剂
• 2.6 阻止多巴或（和）DA降解的药物
• 2.7 抗氧化剂
• 2.8 神经营养因子
• 2.9 传统的PD基因治疗
• 2.10 干细胞移植结合基因治疗
• 二、PD动物模型建立的研究进展
• 1.体内实验动物模型
• 1.1 基于神经毒素创建的模型
• 1.1.1 6-OHDA动物模型
• 1.1.2 MPTP动物模型
• 1.1.3 鱼藤酮动物模型
• 1.1.4 百草枯动物模型
• 1.1.5 利血平动物模型
• 1.1.6 蛋白酶体抑制剂
• 1.2 以基因为基础创建的动物模型
• 2.体外细胞模型
• 三、中草药治疗PD的研究进展
• 1.肉苁蓉对PD的治疗研究
• 2.人参对PD的治疗研究
• 3 银杏叶对PD的治疗研究
• 实验研究
• 一、材料与方法
• 1.实验材料
• 1.1 主要仪器和试剂
• 1.2 实验动物
• 2.实验方法
• 2.1 PD大鼠模型建立
• 2.2 PD大鼠模型的选择
• 2.3 组别设计
• 2.4 指标测定
• 2.4.1 旋转行为测定
• 2.4.2 组织形态学检测
• 2.5 统计学处理
• 二、结果
• 1.一般观察
• 2.洋金花治疗后对APO诱发PD大鼠旋转行为的观察
• 3.各组大鼠损毁侧黑质、纹状体TH免疫组化检测结果
• 4.各组大鼠黑质多巴胺能神经细胞凋亡检测结果
• 讨论
• 一、中医学对PD的认识
• 二、洋金花的现代药理研究及在PD中的指导意义
• 1.药理作用
• 2.洋金花在PD中的指导意义
• 三、选择细胞凋亡为检测指标的依据
• 四、选择酪氨酸羟化酶为检测指标的依据
• 1.TH 蛋白的性质和功能
• 2.酪氨酸羟化酶在PD中的作用机制
• 五、结果的分析
• 1.洋金花对PD大鼠诱发旋转行为的影响
• 2.洋金花对PD大鼠TH免疫组化及细胞凋亡的结果分析
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 个人简历