白细胞介素18在卵清蛋白诱发的小鼠哮喘模型中对嗜酸性粒细胞肺内募集作用的研究

论文摘要

前言Th1／Th2型免疫应答失衡是支气管哮喘的主要免疫学改变。Th2型免疫应答的增强及Th1型免疫应答的减弱，是导致嗜酸性粒细胞增殖、活化和气道浸润，造成慢性气道炎症反应的主要原因。因此调节Th1／Th2型免疫应答的平衡成为目前支气管哮喘（简称哮喘）治疗研究的重点之一。白细胞介素18（IL-18）是新近发现的由活化巨噬细胞产生的强有力的γ干扰素诱导因子。研究认为它能降低气道高反应性，对哮喘气道炎症中的嗜酸性粒细胞也有重要的调节作用。使用IL-18基因敲除鼠支气管哮喘动物模型，Kodama等发现IL-18对气道黏膜免疫的诱导和维持具有调节作用。IL-18基因缺陷鼠肺嗜酸性粒细胞数量明显高于正常鼠，提示IL-18在抑制呼吸道嗜酸性粒细胞浸润方面具有作用。Linpei等也通过比较哮喘患者、肉样瘤病患者及健康人之间支气管肺泡灌洗液中IL-18的水平，发现低水平的IL-18可能与哮喘的气道炎症的发生有关。然而，Kumano等的研究则认为IL-18在诱导嗜酸性粒细胞向呼吸道器官的募集中起促进作用，且IL-18的水平与嗜酸性粒细胞募集呈正相关，即IL-18可能促进和加重哮喘的气道炎症。由此，IL-18是否参与支气管哮喘中嗜酸性粒细胞向肺内的募集目前尚无定论。白细胞介素18结合蛋白（IL-18BP）是新发现的一种糖蛋白，系免疫球蛋白超家族成员。IL-18BP与IL-18结合后可抑制IL-18的生物学活性。故本文使用卵清蛋白（OVA）诱发的小鼠哮喘模型，采用体内注入IL-18BP的方法阻断IL-18的生物学活性，从而探讨IL-18对嗜酸性粒细胞肺内募集的作用，从另一角度揭示IL-18在哮喘发病中的作用机理。实验材料与方法6周龄清洁级雌性BALB／C小鼠24匹，随机分为三组，每组8匹鼠。A组：生理盐水对照组；B组：OVA-哮喘组；C组：IL-18BP处理组。试验开始第1天及第8天，B组，C组小鼠分别经腹膜注射0.1ml含OVA 10μg与Al（OH）3 20μg的生理盐水混悬液，A组小鼠注射等量的生理盐水。试验第21天，B组，C组小鼠吸入雾化的含5％OVA的生理盐水20分钟，连续6天至小鼠出现哮喘症状。A组吸入雾化的生理盐水。C组小鼠于激发前经腹膜注射IL-18BP（5gg／鼠）。于末次激发后24小时，三组小鼠颈动脉取血，收集血清，ELISA法测定外周血IL-18含量。同时收集鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）做细胞涂片并计数白细胞及嗜酸性粒细胞数量。试验结果IL-18BP处理组外周血中IL-18水平明显下降，与哮喘组相比有显著性差异（P＜0.05）。哮喘组及IL-18BP处理组BALF中白细胞数量及嗜酸性粒细胞百分比与生理盐水对照组相比显著升高（P＜0.01），但二组间相比无显著差异（P＞0.05）。讨论小鼠哮喘模型是用于研究人类支气管哮喘的主要工具。本文模型的建立主要参照刘春涛等人的方法并略加改进。IL-18BP处理组外周血中IL-18水平明显低于哮喘组，但高于生理盐水对照组，说明IL-18BP对OVA诱导的IL-18的产生有一定的抑制作用。在本实验中，哮喘小鼠肺内嗜酸粒细胞聚集没有因给予IL-18BP而减少。其原因可能为：①IL-18BP未能完全抑制小鼠体内IL-18的活性。②卵清蛋白诱导Th2型细胞因子IL-4，IL-5，IL-13等的产生，这些细胞因子对哮喘鼠嗜酸性粒细胞肺内募集起促进作用。③IL-18对嗜酸性粒细胞募集的影响小于IL-4，IL-5，IL-13等细胞因子的作用。结论IL-18可能参与OVA诱导的哮喘鼠肺内嗜酸性粒细胞的募集。

论文目录

• 一、摘要
• 中文论著摘要
• 英文论著摘要
• 二、英文缩略语
• 三、论文
• 前言
• 材料与方法
• 试验结果
• 讨论
• 结论
• 四、本研究创新性的自我评价
• 五、参考文献
• 六、附录
• 综述
• 在学期间科研成绩
• 致谢
• 个人简介