中性粒细胞在沙眼衣原体小鼠肺炎易感性差异免疫学机制的研究

论文摘要

目的:用沙眼衣原体小鼠肺炎菌株（Chlamydia trachomatis mouse pneumonitis,CtMoPn）呼吸道感染遗传背景不同的小鼠,在感染的不同时期通过对感染肺组织及外周血中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils,PMN）活性以及与PMN浸润相关的粘附分子、TLR在肺组织中表达的检测,探讨PMN在Ct MoPn呼吸道感染易感性差异中的免疫学机制。方法:遗传背景不同的小鼠C57BL/6（C57）和C3H/HeN（C3H）鼻腔吸入3×103IFUCt MoPn,建立沙眼衣原体小鼠肺炎模型。通过用肺组织匀浆感染Hep-2细胞,检测衣原体包涵体形成单位（IFU）,确定衣原体在肺组织中的生长;对感染后不同时期小鼠体重变化及死亡率的监测及肺组织病理学改变的检测,确定感染小鼠的疾病状态;通过肺组织炎症细胞计数、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性检测,确定PMN在肺组织中的浸润水平;利用RT—PCR技术,检测C57和C3H小鼠肺组织与PMN浸润相关的黏附分子ICAM-1、VCAM-1,选择素P-selectin、L-selectin、E-selectin以及Toll样受体TLR2、TLR4、MyD88 mRNA的表达;分离不同感染时期小鼠外周血及肺组织的PMN,用荧光素标记的抗鼠CD11b单克隆抗体进行染色,用流式细胞仪收获染色细胞,比较Ct MoPn感染不同时期C57和C3H小鼠PMN的活性差异。结果:用3×103 IFU Ct MoPn经鼻腔吸入建立了小鼠沙眼衣原体呼吸道感染模型,以小鼠体重下降、肺组织衣原体繁殖及大量炎症细胞浸润为特征。C3H和C57小鼠对Ct MoPn呼吸道感染存在明显的易感性差异。与C57小鼠比较,C3H小鼠感染后存在严重的体重降低、较高的死亡率、较长的疾病过程及严重的肺组织病理变化。与正常对照组小鼠相比,Ct MoPn感染在两组小鼠均诱导较高水平的黏附分子、选择素、Toll样受体的产生,诱导大量的PMN在感染小鼠肺组织的浸润。感染后7天及14天,高易感性的C3H小鼠肺组织黏附分子VCAM-1,选择素E-selectin、P-selectin、TLR2、MyD88表达及PMN在感染肺组织的浸润程度均高于C57小鼠。衣原体呼吸道感染,感染小鼠外周血及肺组织PMN活化分子CD11b表达明显升高,感染后第7天C3H小鼠PMN CD11b表达明显高于C57小鼠,感染后14天,C57小鼠PMN CD11b表达高于感染后第7天而C3H小鼠CD11b表达则明显降低。结论:Ct MoPn鼻腔吸入感染小鼠引起典型的衣原体肺炎。不同种系的小鼠对沙眼衣原体呼吸道感染存在易感性差异,C3H小鼠是Ct MoPn呼吸道感染的易感表型,而C57小鼠是有抵抗的表型。Ct MoPn呼吸道感染在C3H小鼠肺组织诱导高水平的黏附分子及TLR表达,从而使大量PMN在肺组织浸润。而感染后期C3H小鼠肺组织PMN活性降低,不足以吞噬清除病原体,导致C3H小鼠持续的疾病过程及加重的肺组织病理,可能是C3H小鼠对衣原体感染高易感性的主要原因。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、沙眼衣原体感染小鼠肺炎模型的建立
• 1.1 对象和方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 二、不同种系小鼠对沙眼衣原体呼吸道感染易感性差异的研究
• 2.1 对象和方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 三、中性粒细胞在沙眼衣原体感染易感性差异中作用机制的研究
• 3.1 对象和方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 沙眼衣原体感染免疫反应的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢