论文摘要
研究背景：缺血预处理（IPC）可减轻心肌缺血再灌注（I／R）损伤，但因临床实施具有不可控性而使其应用受到限制。药物预处理（PP）与IPC有相似的效果，并因可控性强临床应用前景良好。已有的研究显示PKC可介导IPC，近来文献报道增加细胞内cAMP的药物亦具有不依赖于PKC的心肌保护作用，由此推测cAMP-PKA信号途径介入了预处理过程。炎症损伤贯穿于心肌I／R损伤全过程，具有炎性因子基因转录调节功能的NF-κB在心肌损伤中起着重要作用。该课题研究了预处理是否可通过cAMP-PKA信号途径抑制NF-κB活化，减少炎性因子基因转录，继而减轻心肌I／R损伤。材料与方法：50只SD大鼠，体重300～350g，随机分为5组（每组10只）：I／R组、IPC组、H89（PKA抑制剂）组、PDTC（NF-κB抑制剂）组和db-cAMP组。建立大鼠心脏Langendorff灌注模型。在平衡期、复灌10min、20min、30min记录血流动力学指标、冠脉流量，测定冠脉流出液中LDH、CK含量。检测复灌30min后心肌组织中NF-κB-DNA结合活性（EMSA），TNF-amRNA（Real-time PCR），磷酸化的CREB（Ser133）、IκB-a（Ser32／36）和NF-κBp65（Ser276）含量（Western blotting）。结果：1、I／R组心肌组织中NF-κB-DNA结合活性、磷酸化的NF-κBp65（Ser276）含量以及TNF-a mRNA表达与IPC和db-cAMP预处理组相比明显升高（P＜0.01），而与H89和PDTC组相比差异不显著。IPC、PDTC和db-cAMP组中磷酸化的CREB（Ser133）显著高于I／R组和H89组（P＜0.01）。I／R组和PDTC组中磷酸化的IκB-a（Ser32／36）显著高于其余三组（P＜0.01）。2、在I／R组、H89和PDTC组，复灌期心功能损伤严重，IPC和db-cAMP组复灌30min时心功能恢复优于其余三组（P＜0.05）。结论预处理可通过cAMP-PKA信号转导途径抑制NF-κBp65磷酸化、降低NF-κB-DNA结合活性从而减少炎性因子基因转录，具有减轻心肌缺血再灌注损伤的作用。
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