高F值寡肽的制备

高F值寡肽的制备

论文摘要

玉米醇溶蛋白(zein)是玉米中主要的贮藏蛋白,约占玉米总蛋白含量的40%-50%。它可溶于60%~95%的乙醇水溶液中,是玉米湿法生产淀粉的主要副产物。但因其缺少赖氨酸、色氨酸等人体必需氨基酸,且生物学价值较低,大多作低值饲料蛋白出售。只有发展对玉米醇溶蛋白的深度开发,提高其利用率和产品附加值,才能更好的提高玉米利用效率。本文以玉米醇溶蛋白粉为原料采用酶水解法制备高F值寡肽。高F值寡肽是一类由3-7个氨基酸残基组成的混合小肽体系,它具有消除或减轻肝性脑病症状,补充膳食蛋白,改善肝、肾、肠、胃疾病患者营养,解酒等功能。高F值寡肽的制备进一步改善和提高了玉米醇溶蛋白的营养价值,在食品、医药领域里应用前景广泛。论文采用单因素和响应面实验方法对碱性蛋白酶水解玉米醇溶蛋白的影响因素进行了研究,确定水解的最适条件为底物浓度5%,酶与底物浓度比4%,温度50℃,pH10.0,水解时间4h,在最适条件下水解度可达到30.88%。利用木瓜蛋白酶和复合风味酶对玉米醇溶蛋白碱性蛋白酶解液进行二次酶解,通过单因素试验和正交试验方法确定双酶法水解的最适条件为:底物浓度5%时,温度55℃,pH6.0,木瓜蛋白酶浓度5%(E/S),风味酶浓度4.5%(E/S),水解时间2h。在此条件下氨基态氮含量可达到256.54mg/100mL。比较了粉末活性炭用量、温度、pH和时间等因素对分离芳香族氨基酸结果的影响。确定吸附时间60min、活性炭用量为1%、pH2.0-3.O。对产品进行脱色处理。确定了粉末活性炭用量1%,吸附时间60min,pH2.0,温度为45℃,脱色率达到93.25%,氮损失率为8.53%。通过旋转蒸发和真空冷冻干燥进一步精制,并对产品进行了理化性质分析。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 前言
  • 1.1 玉米醇溶蛋白概述
  • 1.1.1 玉米醇溶蛋白的组成及构型
  • 1.1.2 玉米醇溶蛋白的性质
  • 1.1.3 玉米醇溶蛋白的功能
  • 1.2 高F值寡肽概述
  • 1.2.1 高F值寡肽的定义
  • 1.2.2 高F值寡肽的功能和用途
  • 1.2.3 高F值寡肽的国内外研究概况
  • 1.2.4 高F值寡肽的制备方法
  • 1.2.5 高F值寡肽的生产工艺
  • 1.2.6 高F值寡肽的检测
  • 1.2.7 高F寡肽产品的理化性质
  • 1.3 论文的立题依据与研究内容
  • 1.3.1 立题依据
  • 1.3.2 研究内容
  • 2 材料与方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.1.1 实验原料
  • 2.1.2 主要实验药品
  • 2.1.3 仪器设备
  • 2.1.4 主要溶液
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 试验流程
  • 2.2.2 玉米醇溶蛋白成分分析
  • 2.2.3 酶活的测定
  • 2.2.4 预处理方法
  • 2.2.5 Alcalase碱性蛋白酶酶水解玉米醇溶蛋白的方法
  • 2.2.6 水解度的测定方法
  • 2.2.7 可溶性氮的测定
  • 2.2.8 氨基态氮含量的测定
  • 2.2.9 平均肽链长度
  • 2.2.10 木瓜蛋白酶的活化
  • 2.2.11 苦味评定方法
  • 2.2.12 芳香族氨基酸的分离
  • 2.2.13 脱色
  • 2.2.14 高F值寡肽产品的浓缩
  • 2.2.15 高F值寡肽产品的制备
  • 2.2.16 高F值寡肽产品性质测定
  • 3 结果与讨论
  • 3.1 预处理条件的优化
  • 3.2 Alcalase碱性蛋白酶水解条件的优化
  • 3.2.1 Alcalase碱性蛋白酶单因素试验
  • 3.2.2 应用响应面分析优化酶解条件
  • 3.2.3 平均肽链长度
  • 3.2.4 单酶水解后肽相对分子质量的估计
  • 3.3 二次酶水解过程研究
  • 3.3.1 木瓜蛋白酶水解条件确定
  • 3.3.2 风味酶脱苦条件
  • 3.3.3 双酶水解
  • 3.4 活性炭分离芳香族氨基酸和脱色
  • 3.4.1 活性碳分离芳香族氨基酸
  • 3.4.2 高F值寡肽混合物脱色
  • 3.5 玉米高F值寡肽的浓缩
  • 3.6 玉米高F值寡肽理化性质的分析
  • 3.6.1 感官性质的研究
  • 3.6.2 组成成分的分析
  • 3.6.3 氨基酸组成及含量分析
  • 4 结论
  • 5 展望
  • 6 参考文献
  • 7 攻读硕士学位期间发表论文情况
  • 8 致谢
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