长春新碱靶向缓释微球的制备及其体内外研究

论文摘要

本文采用W/O/W复乳法制备了长春新碱靶向缓释微球,并从基体材料PLGA、有机溶剂、内水相乳化剂和外水相乳化剂等四个方面研究了影响微球载药率的关键因素,并通过正交实验,研究了微球制备的最佳条件和载药率。通过透射电子显微镜观察微球形貌,动态光散射粒径分析仪测定微球粒径及粒径分布,傅立叶红外光谱和核磁共振观察微球表面叶酸连接情况,此外,我们还检测了微球载药率并研究了体外释药行为。结果显示,微球成规则圆形,表面光滑,分散性好,平均粒径为249.2nm,多分散系数为0.154,载药率为4.53%。体外释药结果显示微球在PBS缓冲液中有很好的释药效果,累计释放达十四天。经拟合表明,微球释药规律符合Higuchi释放动力学模型。本文对长春新碱靶向缓释微球进行了生物相容性实验、体外肿瘤细胞抑制试验和细胞水平靶向实验。结果表明:空载微球与腺样囊性癌肿瘤细胞共培养5天,细胞存活率始终保持在80%以上;对肿瘤细胞进行了5天的体外抑制实验,抑制率高达约96%,并发现抑制率受药物浓度和治疗时间的双重影响;靶向缓释微球在叶酸的靶向作用下3个小时内识别并附着于肿瘤细胞的表面。本文建立了腺样囊性癌的裸鼠模型,并研究了微球对肿瘤的治疗作用。通过计算肿瘤体积大小的变化情况可以直观看出长春新碱缓释微球组和长春新碱靶向缓释微球组的治疗效果明显好于长春新碱原药组和空白对照组,治疗14天后肿瘤抑瘤率高达90%。高效液相色谱、组织病理切片和电镜照片显示,靶向缓释微球能够持续释放长春新碱,对肿瘤保持持续的治疗作用,体现了缓释技术的优势。并且靶向缓释微球能够降低长春新碱对周围正常组织的损伤。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 概述
• 1.2 药物的缓控释体系
• 1.2.1 药物剂型的发展
• 1.2.2 药物载体释放体系
• 1.2.3 微球的药物释放过程
• 1.2.4 药物缓控释体系
• 1.2.5 药物靶向投递体系
• 1.3 可用作药物载体的高分子材料
• 1.3.1 天然高分子材料
• 1.3.2 合成高分子材料
• 1.4 眼眶腺样囊性癌简介
• 1.5 本文研究内容和意义
• 第二章 长春新碱靶向缓释微球的制备及评价
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 实验仪器与原料
• 2.2.2 复乳法制备靶向缓释微球
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 标准曲线
• 2.3.2 影响微球载药率的因素
• 2.3.3 正交实验
• 2.3.4 微球的载药率、包封率及叶酸含量
• 2.3.5 靶向缓释微球的表征
• 2.3.6 靶向缓释微球的释放行为
• 2.4 本章小结
• 第三章 长春新碱靶向缓释微球的体外研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 实验仪器与原料
• 3.2.2 体外培养人ACC 细胞
• 3.2.3 MTT 比色法评价微球的生物相容性
• 3.2.4 测定ACC 细胞生长抑制率
• 3.2.5 VCR 微球与VCRF 微球在肿瘤细胞水平的靶向实验
• 3.2.6 统计学处理
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 形态学观察
• 3.3.2 本实验统计学处理
• 3.3.3 MTT 比色法评价PLGA 空载微球的生物相容性
• 3.3.4 时间对ACC 细胞抑制率的影响
• 3.3.5 浓度对ACC 细胞抑制率的影响
• 3.3.6 微球在细胞水平的靶向作用
• 3.4 本章小结
• 第四章 长春新碱靶向缓释微球治疗裸鼠眼眶腺样囊性癌
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 实验仪器与原料
• 4.2.2 裸鼠动物模型的建立
• 4.2.3 分组及给药方式
• 4.2.4 观察指标
• 4.2.5 常规HE 染色
• 4.2.6 统计学分析
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 裸鼠眼眶腺样囊性癌肿瘤模型的建立
• 4.3.2 肿瘤体积的变化情况
• 4.3.3 药物的残留情况
• 4.3.4 电镜照片结果分析
• 4.3.5 HE 病理切片分析
• 4.4 本章小结
• 第五章 全文结论
• 参考文献
• 发表论文和科研情况说明
• 致谢