番茄对青枯病抗性与酶活性关系的研究

番茄对青枯病抗性与酶活性关系的研究

论文摘要

番茄青枯病是由Ralstonia solanacearum引起的一种毁灭性病害,在世界各地均有发生,热带、亚热带地区更为严重,该病为土传病害,寄主范围广。目前,番茄青枯病发生日益频繁,造成了番茄的大面积减产甚至绝收,已成为番茄生产上的重要障碍。然而对番茄青枯病生理生化抗性机制的研究却很少,并且,番茄抗青枯病材料很难收集,这就对番茄抗病育种造成了很大的困难。传统的鉴定方法多为苗圃和田间调查,费时,工作量大。80年代后,酶法和分子标记辅助育种普遍运用,大大缩短了抗病育种的进程。本文通过研究番茄抗感品种(材料)接种青枯菌前后几种酶活性及同工酶的变化,以预测番茄对青枯病的抗性水平,以便有选择地进行繁殖和育种工作,减少了盲目性,提高工作效率,同时推动与抗青枯病有关的其它生理生化指标的研究和番茄抗青枯病机制的研究。本文研究了S13、S24、L33、L55和强丰5个番茄品种(材料)对青枯病的苗期和成株期抗病性,5种防御性酶(PAL、PPO、POD、SOD和CAT)活性的变化和两种同工酶(PPO和POD)的变化,结果如下:经过常规接种测定,在四川农业大学园艺系试验田番茄病株提取的供试青枯菌菌株具有致病性。番茄苗期采用伤根灌注法接种,接种最佳浓度为3×108CFU/ml。分别于接种后7d、14d、21d周进行发病株率调查。结果表明,S13、S24、L33、L55四个材料发病率在三次调查中均明显低于强丰。综合上述三个时期调查结果,可以将五个番茄材料的抗性水平初步分成三类:S13、S24、L33为中抗;L55为耐病;强丰为感病。番茄成株期采用伤根灌注法接种,接种浓度为6×108个菌/ml。结果表明,S13,S24,L33,L55四个番茄材料的抗性指数分别为8.6,8.3,9.5,6.8,均在5-9.9范围内,属中抗品种。而强丰的抗性指数只有2.8,属感病品种。番茄苗期未接种青枯菌处理各品种(系)叶片5种防御酶活性处在动态平衡中。接种青枯菌后,各品种(系)叶片PAL、PPO、POD、SOD 4种酶活性均升高,S13、S24、L33、L55酶活性始终高于接种前,且上升速度、最大增幅、峰值均高于强丰,而强丰接种后酶活性初期高于接种前,后期酶活性则低于接种前。接种青枯菌后,5个番茄材料叶片CAT活性变化紊乱,没有规律。除强丰外其余的四个番茄材料PAL、PPO、POD和SOD活性峰值的高低与苗期感病性呈显著负相关,而与成株期抗病性呈显著正相关,所以,接种青枯菌后番茄叶片PAL,PPO,POD,SOD4种酶可以作为早期筛选抗病育种材料的辅助指标,CAT酶还有待于进一步研究。番茄苗期接种青枯菌后,S13、S24、L33、L55叶片POD和PPO同工酶谱带数与接种前相比较没有变化,但各酶带的活性均明显增强,而感病品种强丰苗期叶片POD和POD同工酶酶带与接种前酶带强度差异不大,无明显变化。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 1. 文献综述
  • 1.1 植物细菌性青枯病研究概况
  • 1.1.1 青枯菌的分类地位
  • 1.1.2 致病性研究机理
  • 1.1.3 抗病机理
  • 1.2 番茄抗青枯病遗传研究
  • 1.3 番茄青枯病的防治
  • 1.3.1 化学防治
  • 1.3.2 生物防治
  • 1.3.3 内生菌的运用
  • 1.3.4 无致病力青枯菌的利用
  • 1.3.5 生物制剂的运用
  • 1.3.6 真菌的运用
  • 1.3.7 其他防治途径
  • 1.4 酶活性和植物抗病性的关系
  • 2 目的和意义
  • 3 材料与方法
  • 3.1 试验材料
  • 3.1.1 供试菌株
  • 3.1.2 供试培养基
  • 3.1.3 供试番茄材料
  • 3.2 试验仪器与试剂
  • 3.2.1 主要试验仪器与器具
  • 3.2.2 主要试验试剂
  • 3.3 试验方法
  • 3.3.1 病菌分离、保存与增殖
  • 3.3.2 常规致病性测定
  • 3.3.3 番茄对青枯病的抗病性鉴定
  • 3.3.4 苗期抗病性鉴定
  • 3.3.5 成株期抗病性鉴定
  • 3.4 番茄杭青枯病的生理生化机制
  • 3.4.1 酶活性测定
  • 3.4.2 过氧化物酶(POD)的提取及活性测定
  • 3.4.3 多酚氧化酶(PPO)的提取及活力测定
  • 3.4.4 苯丙氨酸解氨酶(PAL)的提取及活性测定
  • 3.4.5 超氧化物岐化酶(SOD)的提取及活性测定
  • 3.4.6 过氧化氢酶(CAT)的提取及活性测定
  • 3.5 同工酶电泳
  • 3.5.1 POD同工酶电泳
  • 3.5.2 PPO同工酶电泳
  • 4 结果与分析
  • 4.1 番茄对青枯病的抗病性鉴定
  • 4.1.1 苗期抗病性鉴定
  • 4.1.2 成株期抗病性鉴定
  • 4.2 番茄杭青枯病的生理生化机制
  • 4.2.1 PAL酶活性的测定结果
  • 4.2.2 PPO酶活性的测定结果
  • 4.2.3 POD酶活性的测定结果
  • 4.2.4 SOD酶活性的测定结果
  • 4.2.5 CAT酶活性的测定结果
  • 4.3 同工酶变化
  • 4.3.1 POD同工酶变化
  • 4.3.2 POD同工酶变化
  • 5 讨论
  • 5.1 青枯菌致病性的测定
  • 5.2 番茄品种(材料)苗期抗病性鉴定
  • 5.3 酶活性与抗病性的关系
  • 5.4 POD和PPO同工酶与抗性的关系
  • 6 结论
  • 6.1 致病性测定
  • 6.2 不同番茄品种(系)苗期抗病性鉴定
  • 6.3 不同番茄品种(系)成株期抗病性鉴定
  • 6.4 番茄苗期接种青枯菌后防御酶活性的变化
  • 6.5 同工酶的变化
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 相关论文文献

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