基于“AAA通路”探讨活血消异方抑制大鼠子宫内膜异位症复发的机理

论文摘要

目的：观察中药活血消异方对大鼠模型种植灶体积变化、形态学变化以及ICAM-1、MMP-9及VEGF表达水平变化的影响,探讨活血消异方抑制子宫内膜异位症复发的作用机理。方法：分组：将70只SD雌性大鼠随机分为7组：1组正常组（10只）,2组模型对照组（各10只）,2组孕三烯酮组（各10只）,2组活血消异方组（各10只）,除正常组外,余60只大鼠均采用自体子宫皮下移植法进行造模。给药及剂量：均从术后第1天开始给药。活血消异方组：12.5g/kg/d（相当于成人2g/kg/d）,按照1250mg/ml的浓度,以lml/100g给药,每日一次；孕三烯酮组：0.26mg/kg/d（相当于成人0.042mg/kg/d）,按照0.026mg/ml的浓度,以lml/100g给药,每周两次,余下每天予1ml/100g生理盐水；正常组及模型对照组,均予以1ml/100g生理盐水,每日一次。给药方式均采用灌胃。上法持续3周后,将正常组、1组模型对照组、1组孕三烯酮组、1组活血消异方组共40只大鼠麻醉后采取外周血及种植物,随后处死。余下的30只大鼠于停药3周后麻醉采取外周血及种植物,随后处死。观察指标：种植灶体积的变化；内膜组织形态学的变化；子宫内膜组织和血清中MMP-9、ICAM-I和VEGF的表达水平的改变。统计方法：应用SPSS （V15.0）统计软件进行统计学处理分析,所有计量资料以均数±标准差（X±S）表示,以P<0.05为差异有统计学意义。结果：1活血消异方组种植灶体积在给药3周时及停药3周后,与模型对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）2活血消异方组异位内膜ICAM-1的表达水平在给药3周时低于模型对照组、孕三烯酮组,差异有统计学意义（P<0.05）；停药3周时低于模型对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。活血消异方组血清ICAM-1的表达水平在给药3周时及停药3周后均较模型对照组为低,差异均有统计学意义（P<0.05）3活血消异方组异位内膜中MMP-9的表达水平在给药3周时低于模型对照组、孕三烯酮组,差异有统计学意义（P<0.05）；停药3周时低于模型对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。活血消异方组血清MMP-9的表达水平在给药3周时较模型对照组为低,差异有统计学意义（P<0.05）4活血消异方组异位内膜中VEGF的表达水平在给药3周时低于模型对照组、孕三烯酮组,差异有统计学意义（P<0.05）；停药3周时低于模型对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。活血消异方组血清VEGF的表达水平在给药3周时较模型对照组为低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1建立大鼠内异症模型并在造模后第一天给药,这种模拟内异症复发风险环境的方法具有可行性。2活血消异方能促进异位病灶的缩小、萎缩甚至消失。3活血消异方能抑制异位内膜的粘附作用,降低异位内膜的侵袭性,抑制局部组织新生血管的形成,从而降低异位内膜组织种植、侵袭、转移的能力,进而抑制EMs形成和发展。4本实验研究证明了“AAA通路”与EMs的复发密切相关,活血消异方能通过抑制“AAA通路”相关因子的表达而达到抑制内异症复发的作用,且作用持久。5活血消异方在预防内异症复发方面比孕三烯酮更具优势。6本研究结果体现了中医学“治未病”的学术思想。7本实验仅仅研究了ICAM-1、MMP-9及VEGF等因子与EMs复发的关系,及中药活血消异方对这些因子的短期和长期影响,尚不能完全、系统的解释内异症的复发机制及活血消异方的作用机理,今后我们有必要多方面展开对内异症复发机制及中药作用机制的进一步研究。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略词表
• 综述一:子宫内膜异位症的中西医相关研究进展
• 1 内异症的中医药相关进展
• 1.1 病因病机
• 1.2 中医药治疗
• 1.3 中医药的动物实验研究
• 1.4 中医药对内异症复发的防治
• 2 内异症术后复发的西医相关进展
• 2.1 复发的定义及发病率
• 2.2 复发的可能机制及相关因素
• 2.3 复发的诊断标准
• 2.4 复发的预防及治疗
• 3 结语
• 参考文献
• 综述二:"AAA通路"相关因子与子宫内膜异位症
• 1 粘附
• 1.1 细胞间粘附分子-1
• 1.2 E-钙黏附素
• 1.3 整合素家族
• 1.4 选择素家族
• 1.5 CD44
• 2 侵袭
• 2.1 基质金属蛋白酶-9
• 2.2 基质金属蛋白酶-2
• 3 血管生成
• 3.1 血管内皮生长因子
• 3.2 血管生成素家族
• 3.3 肿瘤坏死因子-α
• 3.4 碱性纤维细胞生长因子
• 3.5 表皮生长因子
• 3.6 转化生长因子-β
• 3.7 肝细胞生长因子
• 3.8 白细胞介素-8
• 3.9 小板衍生生长因子
• 4 结语
• 参考文献
• 实验部分
• 前言
• 1 实验材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验步骤
• 1.3 HE染色
• 1.4 免疫组织化学染色
• 1.5 酶联免疫分析操作步骤
• 1.6 结果判定
• 1.7 统计学处理
• 2 结果
• 2.1 种植灶大体观察
• 2.2 造模大鼠种植灶体积情况
• 2.3 光镜下各组大鼠内膜组织形态观察
• 2.4 各组大鼠内膜组织ICAM-1、MMP-9、VEGF的表达情况
• 2.5 各组大鼠血清中ICAM-1、MMP-9、VEGF的表达情况
• 3 讨论
• 3.1 活血消异方的组方分析
• 3.2 阳性药物的选择
• 3.3 实验模型的建立
• 3.4 各组大鼠种植灶体积变化及光镜下形态学改变
• 3.5 活血消异方抑制EMs复发的作用机理探讨
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 附图