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补肾强肝活血法治疗缺血性脑卒中的实验研究

2020-12-07阅读(856)

补肾强肝活血法治疗缺血性脑卒中的实验研究

论文摘要

目的：通过建立缺血性中风后动物模型,探讨补肾强肝活血法思想指导下的回春偏瘫方对缺血性中风后神经再生作用的影响,为其修复缺血性脑卒中后的神经功能提供实验依据。方法：用线栓法造成大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusionMCAO）再灌注模型,造模成功后随机分为假手术组,模型组、回春偏瘫方高、中、低剂量（回高组／回中组／回低组）、西药尼莫地平组（西药组）,连续给药14天,治疗结束后观察大鼠一般情况和体重改变,按照改良Berdson评分分级法观察神经行为学的改变,TTC染色观察大鼠脑梗死体积变化和脑细胞形态学改变,开颅取脑制成10%脑匀浆溶液,测定脑内SOD、MDA、Glu的水平,用酶联免疫吸附法测定缺血再灌注大鼠颅内NGF水平,免疫组化染色观察脑源性神经营养因子（BDNF）,生长相关蛋白-43（GAP-43）,突触素p38（SYN）在颅内的表达。结果：经过MCAO再灌注造模后,大鼠均出现体重下降,神经功能缺失评分明显升高（p<0.01）；实验结束后,与模型组比较,治疗各组体重有所恢复,神经功能缺失情况得到不同程度改善,各治疗组脑梗死体积和脑梗死体积百分比均有不同程度的减少,有极显著的差异（P<0.01）：各治疗组脑组织中Glu水平均有所降低,有明显差异性（P<0.05）,中剂量组或高剂量组脑内SOD水平明显升高（P<0.01）,MDA水平明显降低（P<0.01）,但治疗低剂量组仅对SOD的升高有明显效果（P<0.05）,但对MDA的改变效果不明显（P>0.05）；治疗各组脑内NGF水平均高于模型组（P<0.01）,尤其是中剂量组效果最佳,疗效与西药组相当（P>0.05）；治疗各组与单纯模型组病理切片结果相比有不同程度改善,其中以中剂量治疗组改善略明显；缺血性卒中大鼠脑内BDNF表达显著增强（P<0.01）,其中尤以中剂量组疗效最佳,与西药组无明显差异性（P>0.05）；各剂量组脑内GAP-43表达增强（P<0.01）,其中高剂量和中剂量组表达水平与西药组相当,无明显差异性（P>0.05）；但就脑内SYN表达而言,仅中剂量组和高剂量组脑内SYN表达显著增强（P<0.05）,与西药组相当（P>0.05）。结论：回春偏瘫方作为体现补肾强肝活血法的有效方剂,具有促进MCAO再灌注后大鼠神经功能恢复的作用。其作用机理与减小大鼠脑梗死体积,降低脑内Glu、MDA水平,升高脑内SOD、NGF水平,有效改善脑病理形态学,提高颅内BDNF、GAP-43和SYN的表达。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 目录
  • 缩略词表
  • 前言
  • 1. 补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠体重及神经行为学评分的影响
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 实验用药
  • 1.3 实验试剂
  • 1.4 实验仪器及器械
  • 1.5 实验方法
  • 1.5.1 左侧大脑中动脉梗阻（MCAO）再灌注模型的制备
  • 1.5.2 MCAO模型建立成功的判断及纳入标准（神经行为学评分法）
  • 1.5.3 动物分组
  • 1.5.4 给药剂量和时间
  • 1.6 观察指标
  • 1.6.1 一般情况的观察
  • 1.6.2 神经行为评分法
  • 1.7 统计学方法
  • 1.8 结果
  • 1.8.1 死亡分析
  • 1.8.2 一般情况分析
  • 1.8.3 治疗过程中各组体重比较
  • 1.8.4 治疗过程中各组神经功能障碍评分的变化
  • 2. 补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠脑梗死体积的影响
  • 2.1 实验动物
  • 2.2 实验用药
  • 2.3 实验试剂
  • 2.4 实验仪器及器械
  • 2.5 实验方法
  • 2.6 观察指标——大鼠TTC染色及脑梗死体积测定
  • 2.7 统计学方法
  • 2.8 结果
  • 2.8.1 死亡分析
  • 2.8.2 各组大鼠脑梗死体积的比较
  • 3. 补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠脑内谷氨酸GLU,MDA,SOD水平的影响
  • 3.1 实验动物
  • 3.2 实验用药
  • 3.3 实验试剂
  • 3.4 实验仪器及器械
  • 3.5 实验方法
  • 3.5.1 动物造模及纳入
  • 3.5.2 动物分组
  • 3.5.3 指标检测及方法
  • 3.6 统计学方法
  • 3.7 结果
  • 3.7.1 死亡分析
  • 3.7.2 用药14天后,各组MCAO再灌注大鼠脑组织中Glu（μ mol/gprot）水平的比较
  • 3.7.3 用药14天后,各组MCAO再灌注大鼠脑组织中SOD、MDA水平的比较
  • 4. 补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠脑内神经生长因子（NGF）的影响
  • 4.1 实验动物
  • 4.2 实验用药
  • 4.3 实验试剂
  • 4.4 实验仪器及器械
  • 4.5 实验方法
  • 4.5.1 动物造模及纳入
  • 4.5.2 动物分组
  • 4.5.3 指标检测及方法
  • 4.6 统计学处理
  • 4.7 结果
  • 4.7.1 死亡分析
  • 4.7.2 回春偏瘫方对MCAO再灌注大鼠脑组织中神经生长因子（NGF）的影响
  • 5. 补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠脑细胞形态学的影响
  • 5.1 实验动物
  • 5.2 实验用药
  • 5.3 实验试剂
  • 5.4 实验仪器及器械
  • 5.5 实验方法
  • 5.5.1 动物造模及纳入
  • 5.5.2 动物分组
  • 5.5.3 指标检测及方法
  • 5.6 结果
  • 5.6.1 死亡分析
  • 5.6.2 回春偏瘫方对MCAO再灌注大鼠脑细胞形态学的影响
  • 6. 补肾强肝活血法对缺血再灌注大鼠颅内BDNF表达的影响
  • 6.1 实验动物
  • 6.2 实验用药
  • 6.3 实验试剂
  • 6.4 实验仪器及器械
  • 6.5 实验方法
  • 6.5.1 动物造模及纳入
  • 6.5.2 动物分组
  • 6.5.3 指标检测及方法
  • 6.6 统计学方法
  • 6.7 结果
  • 6.7.1 死亡分析
  • 6.7.2 回春偏瘫方对MCAO再灌注大鼠脑内BDNF表达的影响
  • 6.7.3 回春偏瘫方对MCAO再灌注大鼠脑内GAP-43表达的影响
  • 6.7.4 回春偏瘫方对MCAO再灌注大鼠脑内SYN表达的影响
  • 7. 讨论
  • 7.1 祖国医学对缺血性中风的认识
  • 7.2 立题依据
  • 7.2.1 肝肾亏虚,瘀血阻络是缺血性脑卒中的基本病机
  • 7.2.2 补肾强肝活血法为治疗缺血性脑卒中的基本法则
  • 7.3 补肾强肝活血法治疗缺血性脑卒中的有效方剂——回春偏瘫方
  • 7.3.1 方义分析
  • 7.3.2 组方特点
  • 7.4 补肾强肝活血法对MCAO再灌注大鼠神经功能恢复的疗效评价
  • 7.4.1 动物模型评价
  • 7.4.2 补肾强肝活血法能改善MCAO再灌注损伤大鼠机体症状
  • 7.4.3 补肾强肝活血法能改善MCAO再灌注损伤神经功能障碍
  • 7.4.4 补肾强肝活血法可减少MCAO再灌注损伤大鼠脑梗死体积
  • 7.4.5 补肾强肝活血法对MCAO再灌注损伤大鼠颅内氧自由基损伤的保护作用
  • 7.4.6 补肾强肝活血法可有效降低Glu对MCAO再灌注损伤大鼠的神经毒性作用
  • 7.4.7 补肾强肝活血法可提高MCAO再灌注大鼠颅内神经生长因子（NGF）水平
  • 7.4.8 补肾强肝活血法可提高MCAO再灌注大鼠颅内BDNF表达
  • 7.4.9 补肾强肝活血法促进MCAO再灌注大鼠颅内神经细胞轴突生长
  • 7.4.10 补肾强肝活血法促进MCAO再灌注大鼠脑神经细胞突触重构
  • 8. 结论
  • 9. 问题与展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 文献综述
  • 附图
  • 附件

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