论文摘要
目的:研究不同剂量的吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol, I3C)对球囊损伤术后大鼠颈动脉壁 Akt-1、NF-κB、Bcl-X/L、Bax 和 Bcl-2 蛋白表达的影响,探讨 I3C 诱导血管损伤后平滑肌细胞(vascular smooth musclecells,VSMCs)凋亡的分子机制,为利用 I3C 防治经皮冠状动脉介入术(perutaneous corcnary intervention, PCI)后再狭窄(restenosis,RS)提供理论基础。 方法:建立 35 只雄性 SD 大白鼠(体重 300-400g)颈动脉损伤的动物模型,采用完全随机分组设计,分为对照组和实验组。对照组:5只动物,颈动脉球囊损伤术后不给药;实验组:30 只动物,球囊损伤术后给药量为 12.5mg/d,25mg/d,50mg/d,给药时间分别为 4 天,7天,共 6 个亚组,每个亚组 5 只动物。所有动物均在术后 14 天取材,免疫组化 SABC 法检测血管壁细胞 Akt-1、NF-κB、Bcl-X/L、Bax 和Bcl-2 蛋白的表达,计算机图像分析 Akt-1、NF-κB、Bcl-X/L 蛋白表达的平均光密度值和 Bax、Bcl-2 蛋白表达的平均评分值。 结果: 1 Akt-1 蛋白表达的部位主要集中在大鼠颈动脉中层平滑肌细胞中。对照组 Akt-1 蛋白的表达值较高,各实验组 Akt-1 蛋白均有降低,其中以 50mg 4 天组、25mg 7 天组、50mg 7 天组蛋白表达值降低显著(0.0725 ±0.00581 vs. 0.0590 ±0.00235,P<0.01;0.0725 ±0.0058 vs.0.0646 ±0.00257,P<0.05;0.0725 ±0.00581 vs. 0.0517 ±0.00207,重庆医科大学硕士研究生学位论文 3P<0.01)。同一剂量的 I3C (50mg)作用下,4 天组和 7 天组的 Akt-1 蛋白的表达值有差异(0.0590 ±0.00235 vs. 0.0517 ±0.00207,P<0.01)。2 NF-κB 蛋白在对照组和各实验组大鼠颈动脉壁细胞均有表达,阳性颗粒可以出现在胞浆中或是胞核中。各实验组 NF-κB 蛋白表达值均较对照组减低,除 12.5mg 4 天组 NF-κB 蛋白表达值与对照组比较无差异外(0.0947 ±0.00252 vs. 0.1003 ±0.00700,P=0.516),其他各实验组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05 或 P<0.01)。同一给药剂量不同给药时间组的比较中, 仅 25mg 作用 4 天和作用 7 天(0.0872 ±0.00146 vs. 0.0816 ±0.00211,P<0.01)显示有统计学意义。3 Bcl-X/L 蛋白阳性颗粒主要出现在胞浆中,而且表达的部位主要集中在血管中层平滑肌细胞中。 对照组 Bcl-X/L 蛋白表达的平均光密度值较高(0.0809 ±0.00170),各实验组均有降低,以 50mg 4 天组(0.0593 ±0.00111)、25mg 7 天组(0.0766 ±0.00059)、50mg 7 天组(0.0516 ±0.00235)的平均光密度值与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。同一剂量(50mg)实验 4 天组和实验 7 天组之间 P <0.01,其他同一剂量不同给药时间之间的平均光密度值比较无意义。4 Bax 蛋白在球囊损伤后的大鼠颈动脉壁细胞对照组和各实验组均有表达,表达的部位主要集中在血管中层平滑肌细胞中。各实验组Bax 蛋白的表达值和对照组平均评分值比较均有增加,其中 50mg 4 天组、25mg 7 天、50mg 7 天作用后,Bax 蛋白表达的平均评分值增加明显(5.8000±0.46368 vs. 2.4400 ±0.35777, P<0.01;3.0600±0.18166 vs.2.4400 ± 0.35777, P<0.05 ; 5.9800 ± 0.41473 vs. 2.4400 ± 0.35777,P<0.01 )。相同剂量的 I3C 作用下 Bax 蛋白表达 4 天组和 7 天组无显著差异。5 Bcl-2 蛋白表达各实验组与对照组比较其蛋白表达的平均评分值均有减低,但除外 12.5mg 4 天组(4.1200 ±0.47645)、12.5mg 7 天组
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