甘蓝型油菜叶色基因的初步定位

论文摘要

为了将核不育有效地应用于杂种优势利用,必须解决人工拔除母本行中50%的可育株的问题;甘蓝型油菜紫叶紫茎性状属质量性状,遗传稳定。为准确及时地辨别可育株,减少田间劳动量,有必要开发紫叶和紫茎标记的指示性状,这为利用指示性状杂交优势开拓了新领域。本试验通过紫叶绿茎与绿叶紫茎材料杂交及其F1的性状表型和BC1后代的分离情况调查分析证明:紫叶受一对不完全显性基因控制,紫茎受一对显性控制。为进一步从分子水平验证上述结果,本试验利用BSA法筛选到了5个与紫叶基因连锁的AFLP多态性片段:P3MC1、P08MC01、P10MC03、P11MC15和P14MC11,4个与绿叶基因连锁的片段P05MC04、P06MC06、P16MC05和P10MC10;没有成功找到与紫茎连锁的片段。其中片段P11MC15和P14MC11重复性较好,将以上片段回收测序并根据序列设计了SCAR引物,其中Scar14.11显示了较好的多态性。回收片段测序后经BLAST分析显示:有3个标记序列在拟南芥中找到了同源序列,它们分别位于拟南芥第3、第4和第5染色体上。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1.前言
• 1.1 植物叶色的研究进展
• 1.1.1 叶色的成因
• 1.1.2 花色素苷的化学组成、特性
• 1.1.3 在乔木和草本植物中的紫叶现象
• 1.1.4 蔬菜中的叶色突变体
• 1.1.5 棉花紫叶性状的利用
• 1.1.6 水稻叶片紫色性状
• 1.2 甘蓝型油菜的紫叶
• 1.3 本研究涉及的分子标记
• 1.3.1 AFLP分子标记原理
• 1.3.2 SCAR标记及其引物设计
• 1.4 近等基因系分析法的基本原理
• 1.5 基于性状表现的BSA法
• 1.6 甘蓝型油菜细胞核雄性不育
• 1.7 本研究的目的与意义
• 2.材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.2.1 取材
• 2.2.2 DNA的提取
• 2.2.3 混合基因池的构建
• 2.2.4 AFLP引物的筛选与标记的验证
• 2.2.5 差异片段的测序与BLAST分析
• 2.2.6 AFLP标记的SCAR转化
• 2.2.7 构建遗传连锁图
• 3.结果与分析
• 3.1 性状连锁遗传分析
• 3.1.1 叶色的遗传分析
• 3.1.2 茎色的遗传分析
• 3.2 AFLP引物筛选结果
• 3.3 多态性引物的小群体验证结果
• 3.4 多态性引物大群体验证结果
• 3.4.1 与绿叶基因连锁的特异片段的重复验证
• 3.4.2 与紫叶基因连锁的特异片段的大群体重复验证
• 3.5 差异片段的回收、克隆与测序
• 3.6 差异片段的测序与相似性分析
• 3.7 AFLP标记的SCAR转化
• 3.7.1 SCAR引物设计
• 3.7.2 SCAR引物的PCR扩增和群体分析
• 3.8 标记遗传连锁图的构建
• 4.讨论
• 4.1 大群体验证结果分析
• 1性状分离比分析'>4.2 紫茎BC₁性状分离比分析
• 4.3 紫茎近等基因系的构建
• 4.4 blast分析的作用
• 4.5 叶片非正常发红的解决措施
• 4.6 AFLP的单引物扩增现象
• 4.7 SCAR引物的群体验证结果分析
• 参考文献
• 附录
• 致谢