菊藤胶囊对应激性高血压大鼠血管内皮功能的保护作用

论文摘要

目前心血管疾病,特别是高血压病的患病率明显上升,据我国流行病学的资料表明,一定强度的应激刺激如现代社会快节奏生活是导致高血压病的重要原因。高血压病的病理过程与血管内皮功能紊乱密切相关。因此,保护血管内皮功能是防治高血压及其靶器官损害的关键所在。高血压以外周血管阻力增高为特征,血管系统既是外周阻力的调节器又是高血压的靶器官。高血压状态下血流切应力及血流搏动过程刺激血管内皮细胞,血管痉挛性收缩引起内皮细胞缺血缺氧以及氧自由基产生增加等等,均引起内皮功能损伤,而内皮损伤后造成各种血管活性物质和生长因子调控失常,内皮素（endothelin, ET）和血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）等血管收缩因子大量释放,而血管舒张因子主要是一氧化氮（nitrogenmo noxide, NO）的合成释放不能相应增加,甚或减少,导致血管结构和功能的改变。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）特异地作用于血管内皮细胞,在血管内皮系统中,VEGF在促进血管形成、维持血管内膜的完整性方面具有重要作用。缺血缺氧可诱导VEGF mRNA转录水平上调,调节细胞生长,刺激细胞增殖,从而引起细胞肥大,并参与了动脉粥样硬化的形成和发展。高血压病病机复杂,我们认为本病的病机关键为肝阳上亢。菊藤胶囊（Juteng capsule,JTC）是在此理论指导下完成的,已在临床应用多年,取得较好的临床效果。本研究的目的是探讨菊藤胶囊对应激性高血压（SIH）大鼠血压的影响及其对血管内皮功能的保护作用。采用电击足底应激刺激的方法制备应激性高血压大鼠模型。通过观察每天应激刺激前灌服菊藤胶囊对应激大鼠血压的影响,运用硝酸还原酶法检测血清一氧化氮（NO）及放射免疫法检测血浆内皮素（ET）的含量,采用反转录PCR方法检测主动脉ET-1 mRNA及VEGF mRNA的表达,观察主动脉及心脏组织病理结构变化,来阐明菊藤胶囊的降压效果及对内皮功能保护作用的有关机制,予以客观的、科学的论证。本研究的主要实验方法及结果如下:1.动物模型的建立:采用电击足底作为单一应激源对大鼠进行应激刺激,刺激强度为30-48.5V,频率0.5HZ。将大鼠放于自制分格式电击鼠箱,并连接应激源。除正常对照组外,其余实验组大鼠每天上午8:30～10:30、下午2:00～4:00各接受1次应激刺激,共4周。分别在施以应激刺激前3 d及应激刺激的第1、2、3、4周的应激后2～5 h内用尾套法测量血压。2.分组及给药42只健康雄性SD大鼠,被随机分为6组,每组7只,分别对应以下处理: A为应激+菊藤胶囊高剂量3 g/ （kg·d）组（JTC-H）;B为应激+菊藤胶囊中剂量1.5 g/ （kg·d）组（JTC-M）;C为应激+菊藤胶囊低剂量0.75 g/ （kg·d）组（JTC-L）;D为应激+卡托普利20mg/ （kg·d）组（Capropril）;E为应激+蒸馏水10ml/ （kg·d）组（model）;F为正常对照+蒸馏水10ml/ （kg·d）组（control）,每天应激刺激前食道灌胃,共4周。3.结果血压的改变:应激刺激前各组血压比较无统计学差异P>0.05,应激28天后,应激模型组血压明显升高,升高程度2.76±0.68 kPa,实验后模型组与其它各组血压比较均有统计学差异P<0.01;菊藤胶囊高剂量与中、低剂量组比较均P<0.01,中剂量组与正常组比较P<0.05,低剂量组与正常组比较P<0.01。正常组、西药对照组、治疗高剂量组之间进行比较,无统计学差异P>0.05。主动脉及心肌组织病理学特征:正常组大鼠血管内皮光滑完整,与正常组比较,模型组及低剂量组大鼠血管内皮细胞核突出于腔内,其余各用药组均有一定程度的抑制作用。ET和NO含量的变化:模型组与正常对照组、西药组、菊藤高剂量组血清NO含量比较均有较显著差异（P<0.01）;正常组、西药组、中药高中剂量组之间进行比较并无显著性差异（P>0.05）;中药高剂量与中、低剂量比较有统计学差异（P<0.05）。模型组与正常对照组、西药组、菊藤高中剂量组血浆ET含量比较均有统计学差异（P<0.01）;高剂量与中剂量比较有统计学差异（P<0.05）;正常组、西药组、高剂量组之间进行比较并无统计学差异（P>0.05）。RT-PCR结果:在内参照β-actin表达基本一致的情况下,模型组出现特异的ET-1、VEGF基因条带,而其余各组的基因条带明显减弱。本研究采用电击足底应激刺激的方法成功制备了应激性高血压大鼠模型。结果表明菊藤胶囊可降低应激性高血压大鼠的血压,提高SIR大鼠血清中NO浓度,降低血浆中ET含量,下调SIH大鼠血管组织ET-1及VEGF基因的表达,保护内皮细胞的功能,同时对SIH大鼠血管及心肌组织病理结构有改善作用。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 一 应激与高血压
• 1 应激的概念
• 2 应激的要素及分期
• 3 应激可引起多种疾病
• 4 应激引起血压升高的主要机制
• 二 高血压与内皮功能障碍
• 1 一氧化氮（NO）
• 2 内皮素（ET）
• 3 血管内皮生长因子（VEGF）
• 三 中医学对应激性高血压的认识
• 1 中医学对应激源的论述
• 2 中医学对高血压病的认识
• 3 应激性疾病的中医病机
• 4 应激性高血压的病因病机分析
• 四 菊藤胶囊的方证基础
• 1 方剂组成与方义分析
• 2 药物功效及现代药理研究
• 正文 菊藤胶囊对应激性高血压大鼠血管内皮功能保护作用的实验研究
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢