论文摘要
1.4种帘蛤科贝类同工酶研究 采用不连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对文蛤(Meretrix meretrix L.,1758)、青蛤(Cyclina sinensis G.,1791)、硬壳蛤(Mercenaria mercenaria L.,1758)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum A.,1850)的4种组织(肝、鳃、后闭壳肌和外套膜)的酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶进行了研究。结果表明,不同帘蛤的同工酶谱有明显的差异;同种帘蛤不同组织间的EST和MDH同工酶有一定的组织特异性;EST和MDH同工酶位点丰富,可用于不同物种的鉴定;肝、鳃EST和闭壳肌MDH酶活性较高,是进行同工酶分析的理想材料。 对硬壳蛤5种组织(足、外套膜、闭壳肌、鳃和肝)的酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了比较研究,并对酶谱表型及位点表达进行了分析。结果表明,硬壳蛤上述组织的EST和MDH同工酶存在不同程度的组织特异性,而LDH没有组织特异性。在EST酶谱中,肝组织染色最深,说明其EST活性最高,这与肝脏是重要的消化腺和解毒器官相适应。在MDH酶谱中发现了s-MDH和m-MDH所形成的谱带,闭壳肌的MDH谱带染色很深,这与肌肉需要由三羧酸循环提供大量ATP相适应。 2.4种帘蛤群体遗传多样性和种间关系及文蛤4个地理种群遗传结构的fAFLP分析 利用荧光标记扩增片段长度多态性(fAFLP)技术对4种帘蛤(文蛤、青蛤、菲律宾蛤仔和硬壳蛤)的群体遗传多样性和种间关系进行了研究。选择EcoR Ⅰ/Mse Ⅰ进行酶切,使用6个E+3/M+3引物组合进行扩增,共获得1096个位点,多态位点比率95.1%,片段长度50-456bp。其中,文蛤、青蛤、菲律宾蛤仔和硬壳蛤分别得到681、715、702和694个位点,各物种相应的多态位点比率为76.8%、81.7%、83.0%和75.1%,得到17个物种特异性位点,可作为4物种特征标记。分析了群体遗传相似系数和遗传多样性指数以及种间遗传相似系数。结果表明,硬壳蛤群体遗传相似系数最高(0.6709),遗传多样性指数最低(0.2360);菲律宾蛤仔群体遗传相似系数最低
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