论文摘要
本项研究以筛选代谢农药活性物质稀有放线菌为目标,对从安徽、浙江、山东、陕西、四川等5省11地采集的31份土壤样品和11份海沙样品中的稀有放线菌进行了选择性分离,并测定了所分离放线菌的农药活性,在此基础上对部分活性菌株进行了初步分类鉴定。本文主要研究成果如下:（1）从42份样品中共分离得到578株放线菌,分别隶属链霉菌属（Streptomyces）、小单孢菌属（Micromonospora）、马杜拉菌属（Actinomadura）、诺卡氏菌属（Nocardia）、链孢囊菌属（Streptosporangium）、小双孢菌属（Microbiospora）、糖多孢菌属（Saccharopolyspora）和游动放线菌属（Actinoplane）等8属。研究发现,以改进HVA培养基为分离培养基,将土壤样品稀释100倍,添加20mg·L-1重铬酸钾+20mg·L-1萘啶酮酸+10mg·L-1卡那霉素作为抑制剂对稀有放线菌分离效果最好。（2）测定了578株放线菌的发酵液对小麦根腐病菌（Bipolaris sorokiniana）、玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum）、烟草赤星病菌（Alternaria alternate）3种病原真菌和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）3种细菌的抗菌活性,发现其中8株表现良好的的抑菌活性。其编号分别为NWAFU032,NWAFU075,NWAFU223,NWAFU227,NWAFU238,NWAFU309,NWAFU313,NWAFU526。其中,菌株NWAFU032,NWAFU075,NWAFU223,NWAFU227,NWAFU238等5株对供试病原真菌和细菌均表现出良好的活性,NWAFU309,NWAFU313仅对供试细菌表现良好的活性,NWAFU526只对供试真菌表现良好的活性。离体条件下NWAFU032,NWAFU075,NWAFU223,NWAFU227,NWAFU238和NWAFU526等6株放线菌菌株发酵液对小麦根腐病菌、玉米大斑病菌、烟草赤星病菌的菌丝生长和孢子萌发均有强烈的抑制作用,其中NWAF223和NWAF238菌株发酵液对病原真菌菌丝生长的抑制中浓（EC50）值均小于10mL·L-1;NWAF526菌株发酵液对小麦根腐病菌、玉米大斑病菌、烟草赤星病菌孢子萌发的EC50分别为14.01 mL·L-1、14.56 mL·L-1、17.36 mL·L-1。NWAFU032,NWAFU075,NWAFU223,NWAFU227,NWAFU238, NWAFU309和NWAFU313等7株放线菌发酵液对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有显著抑制作用,其中NWAFU223菌株发酵液抑制作用最强,抑菌圈直径达30mm以上。盆栽实验结果表明,6株具抗植物病原真菌活性的放线菌发酵液防治小麦白粉病的保护效果为71.29%～82.35%,治疗效果为58.53%～70.80%。未发现具有明显杀虫或除草活性的菌株。（3）采用传统分类和分子分类相结合的方法研究了NWAFU227、NWAFU238、NWAFU309和NWAFU313四株菌的分类地位。基于16SrDNA序列的系统发育树表明,NWAFU227,NWAFU238和NWAFU309属于链霉菌属,NWAFU313隶属小单孢菌属,16SrDNA序列相似度均为98%。结合培养特征和生理生化特性实验分析,菌株NWAFU238、NWAFU309、NWAFU313可能为新种,菌株NWAFU227可能为Streptomyces sp. US80的近缘种。